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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-02-24 02:12:54瀏覽次數(shù):175次
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人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
61603 Anti-LIFR/CD118 白血病抑制因子受體抗體 0.2ml
61604 Anti-Lingo-1 Nogo受體反應(yīng)蛋白抗體 0.1ml
61605 Anti-LIMK1 單*蛋白激酶1抗體 0.2ml
61606 Anti-Phospho-LIMK1 (Thr508)/LIMK2 (Thr505) 磷酸化單*蛋白激酶1/2抗體 0.1ml
61607 Anti-LIR-6 白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體6抗體 0.2ml
61608 Anti-LIR-8/CD85c/LILRB5 白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體8抗體 0.2ml
61609 Anti-LIS1 無腦回的致病基因LIS1抗體 0.2ml
61610 Anti-LILRB3/CD85a/PirB 白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體-B抗體 0.2ml
61611 Anti-LIX1 LIX1抗體 0.2ml
61612 Anti-Livin 凋亡抑制蛋白抗體 0.1ml
61613 Anti-phospho-LKB1(Thr363) 磷酸化*/*蛋白激酶抗體 0.1ml
61614 Anti-phospho-LKB1(Ser334) 磷酸化*/*蛋白激酶抗體 0.1ml
61615 Anti-phospho-LKB1(Ser428) 磷酸化*/*蛋白激酶抗體 0.1ml
61616 Anti-Phospho-LKB1(Thr189) 磷酸化*/*蛋白激酶抗體 0.1ml
61617 Anti-LFABP/FABP-1 肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
61618 Anti-LFABP/FABP-2 肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
61619 Anti-laminin 層粘連蛋白抗體 0.1ml
61620 Anti-Laminin Beta 1 層粘連蛋白β1抗體 0.2ml
61621 Anti-lamin A 核纖層蛋白A抗體 0.2ml
61622 Anti-Phospho-Lamin A/C (Ser22) 磷酸化核纖層蛋白A/C抗體 0.1ml
61623 Anti-Lamin B 核纖層蛋白B抗體 0.2ml
61624 Anti-lamin C 核纖層蛋白C抗體 0.2ml
61625 Anti-LOX-1/OLR1 凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體抗體 0.2ml
61626 Anti-EDG2/LPA1 溶血磷脂酸受體蛋白1抗體 0.2ml
61627 Anti-EDG4/LPA2 溶血磷脂酸受體蛋白2抗體 0.2ml
61628 Anti-EDG7/LPA3 溶血磷脂酸受體蛋白3抗體 0.2ml
61629 Anti-EDG6/SLP4 內(nèi)皮細(xì)胞的分化蛋白6抗體 0.2ml
61630 Anti-Lpin1 protein Lpin1 抗體 0.2ml
61631 Anti-Lpin1 protein Lpin1 抗體 0.2ml
61632 Anti-LPL/PLASTIN2 脂蛋白脂酶抗體 0.2ml
61633 Anti-LPLUNC1 鼻咽癌癌基因抗體 0.1ml
61634 Anti-LRIG1 LRIG1抗體 0.2ml
61635 Anti-LRIG2 LRIG2抗體 0.2ml
61636 Anti-LRIG3 LRIG3抗體 0.2ml
61637 Anti-LRP/MVP 肺耐藥相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
61638 Anti-LRP1/CD91 低密度脂蛋白相關(guān)受體1抗體 0.2ml
61639 Anti-LRP6 低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體 0.2ml
61640 Anti-Phospho-LRP6 (Ser1490) 磷酸化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體 0.1ml
61641 Anti-LRRC4 腦瘤相關(guān)基因抗體 0.2ml
61642 Anti-LRRK2 富*重復(fù)激酶2抗體 0.2ml
61643 Anti-LTB4/Leukotriene B4 白三烯B4抗體 0.2ml
61644 Anti-LTB4-R1 白三烯B4受體1抗體 0.1ml
61645 Anti-LTB4-R2 白三烯B4受體2抗體 0.1ml
61646 Anti-Iumbrokinase *抗體 0.1ml
61647 Anti-Lxn 羧肽酶抑制劑抗體 0.2ml
61648 Anti-Ly-6G/Gr-1 淋巴細(xì)胞抗原6G抗體 0.2ml
61649 Anti-LY-86/MD-1 MD-1蛋白抗體 0.2ml
61650 Anti-LY-96/MD-2 MD-2蛋白抗體 0.1ml
61651 Anti-Lysozyme *抗體 0.1ml
61652 Anti-Lyn 膜相關(guān)蛋白*激酶Lyn抗體 0.2ml
61653 Anti-Phospho-Lyn (Tyr507) 膜相關(guān)蛋白*激酶Lyn抗體 0.1ml
61654 Anti-Phospho-Lyn (Tyr396) 人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)ELISA試劑盒磷酸化膜相關(guān)蛋白*激酶Lyn抗體 0.1ml
61655 Anti-Phospho-Lyn (Tyr497) 磷酸化膜相關(guān)蛋白*激酶Lyn抗體 0.1ml
61656 Anti-LYVE-1 淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)酸受體抗體 0.1ml
61657 Anti-M2-PK/PKM2 丙酮酸激酶-M2抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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