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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-01-09 11:59:25瀏覽次數(shù):176次
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人乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
61192 Anti-HHV8/ORF50 人類皰疹病毒8抗體 0.2ml
61193 Anti-HHV8/ORF K2 人類皰疹病毒8抗體 0.2ml
61194 Anti-HIF-1 Alpha 缺氧誘導(dǎo)因子1α 抗體 0.1ml
61195 Anti-HIF-1 Beta/ARNT1 缺氧誘導(dǎo)因子1β 抗體 0.1ml
61196 Anti-HIF 2 Alpha 缺氧誘導(dǎo)因子2α 抗體 0.1ml
61197 Anti-HINT1 *三聚體核苷結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml
61198 Anti-HIRA/DGGR1 組蛋白替換精蛋白DGGR1抗體 0.2ml
61199 Anti-Histone H3 組蛋白3抗體 0.2ml
61200 Anti-Phospho-Histone H3 (Ser10) 磷酸化組蛋白3抗體 0.1ml
61201 Anti-Phospho-Histone H3 (Ser28) 磷酸化組蛋白3抗體 0.1ml
61202 Anti-Phospho-Histone H3 (Thr11) 磷酸化組蛋白3抗體 0.1ml
61203 Anti-Phospho-Histone H3 (Thr3) 磷酸化組蛋白3抗體 0.1ml
61204 Anti-Histone H1 組蛋白H1抗體 0.2ml
61205 Anti-phospho-Histone H1 (Thr146) 磷酸化組蛋白H1抗體 0.1ml
61206 Anti-Acetylation-Histone H1b(Lys53) 乙?;M蛋白H1b抗體 0.2ml
61207 Anti-phospho-Histone H1.4 (Thr18) 磷酸化乙?;M蛋白H1b抗體 0.1ml
61208 Anti-Histone H3-like protein 組蛋白H3樣抗體 0.2ml
61209 Anti-Histone H3-like protein 組蛋白H3樣抗體 1ml
61210 Anti-Histone H3-like protein 組蛋白H3樣蛋白抗體 0.2ml
61211 Anti-phospho Histone H1,4(Ser27) 磷酸化組蛋白H1,4樣蛋白抗體 0.1ml
61212 Anti-HDAC1/HD1 組蛋白去乙酰化酶1抗體 0.2ml
61213 Anti-HDAC2/HD2 組蛋白去乙?;?抗體 0.2ml
61214 Anti-HDAC3/HD3 組蛋白去乙?;?抗體 0.2ml
61215 Anti-Phospho-HDAC3 (Ser424) 磷酸化組蛋白去乙酰化酶3抗體 0.1ml
61216 Anti-HDAC4 組蛋白去乙?;?抗體 0.2ml
61217 Anti-HDAC5 組蛋白去乙?;?抗體 0.2ml
61218 Anti-HDAC6 組蛋白去乙?;?抗體 0.2ml
61219 Anti-phospho-HDAC6 (Ser22) 磷酸化組蛋白去乙?;?抗體 0.1ml
61220 Anti-HDAC7 組蛋白去乙?;?抗體 0.2ml
61221 Anti-phospho-HDAC7 (Ser318) 磷酸化組蛋白去乙?;?抗體 0.1ml
61222 Anti-HDAC8 組蛋白去乙酰化酶8抗體 0.2ml
61223 Anti-phospho-HDAC8(Ser39) 磷酸化組蛋白去乙?;?抗體 0.1ml
61224 Anti-HDAC9 組蛋白去乙酰化酶9抗體 0.2ml
61225 Anti-HDAC10 組蛋白去乙?;?0抗體 0.2ml
61226 Anti-HDAC11 組蛋白去乙?;?1抗體 0.2ml
61227 Anti-HDAC12 組蛋白去乙?;?2抗體 0.2ml
61228 Anti-His tag 聚*抗體標(biāo)簽抗體 0.1ml
61229 Anti-His tag(CT) 聚*抗體g標(biāo)簽抗體(C端) 0.1ml
61230 Anti-FLAG Tag (NT) FLAG Tag標(biāo)簽抗體(N端) 0.1ml
61231 Anti-FLAG Tag (CT) FLAG Tag標(biāo)簽抗體(C端) 0.1ml
61232 Anti-FLAG Tag(CT) FLAG Tag標(biāo)簽抗體(C端) 0.1ml
61233 Anti-Gst P1/GST class-pi *硫轉(zhuǎn)移酶pi基因抗體 0.1ml
61234 Anti-T7 tag T7 tag標(biāo)簽抗體 0.1ml
61235 Anti-V5 tag V5 tag標(biāo)簽抗體 0.1ml
61236 Anti-KT3 tag KT3 tag抗體 0.1ml
61237 Anti-VSV-G tag VSV-G tag標(biāo)簽抗體 0.1ml
61238 Anti-HIV gp120 艾滋病病毒抗體 0.1ml
61239 Anti-HIV gp41 艾滋病病毒抗體 0.2ml
61240 Anti-HIV-1 ENV(gp160) 艾滋病病毒-1包膜糖蛋白抗體 0.1ml
61241 Anti-HIV-1 ENV (gp160) 艾滋病病毒-1包膜糖蛋白抗體 0.1ml
61242 Anti-HLA-DR HLA-DR抗體 0.2ml
61243 Anti-HLA G 人乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)ELISA試劑盒人類白細(xì)胞抗原G抗體 0.2ml
61244 Anti-HLA E 人類白細(xì)胞抗原E抗體 0.2ml
61245 Anti-HMGA1 高遷移率族蛋白A1抗體 0.2ml
61246 Anti-HMGA2 高遷移率族蛋白A2抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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