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人單核細(xì)胞增多性李斯特菌素O（（LLO）ELISA試劑盒

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人單核細(xì)胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA試劑盒，ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人單核細(xì)胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人單核細(xì)胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

61025 Anti-GDF8/MSTN  生長(zhǎng)分化因子8抗體 0.2ml
61026 Anti-GDF8  羊抗生長(zhǎng)分化因子8/肌肉抑制素抗體 0.2ml
61027 Anti-GDF-9  生長(zhǎng)分化因子9抗體 0.2ml
61028 Anti-GDNF  膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抗體 0.1ml
61029 Anti-Gelsolin  凝溶膠蛋白抗體 0.2ml
61030 Anti-GFAP  膠質(zhì)纖維酸性蛋白抗體 0.1ml
61031 Anti-GFP  綠色熒光蛋白（免疫組化用抗體） 0.2ml
61032 Anti-GFP  綠色熒光蛋白抗體 0.2ml
61033 Anti-GFP  綠色熒光蛋白抗體 0.2ml
61034 Anti-EGFP Tag  重組增強(qiáng)型綠色熒光蛋白標(biāo)簽抗體 0.1ml
61035 Anti-GFRA4  GDNF家族受體α-4抗體 0.2ml
61036 Anti-GFR Alpha-1  GDNF家族受體α-1抗體 0.1ml
61037 Anti-GHR  生長(zhǎng)激素受體抗體 0.1ml
61038 Anti-Ghrelin  腦腸肽抗體 0.1ml
61039 Anti-GHRF/GHRH  生長(zhǎng)激素釋放激素抗體 0.1ml
61040 Anti-ID1  DNA結(jié)合抑制因子1抗體 0.2ml
61041 Anti-GIG8/ID2  DNA結(jié)合抑制因子2抗體 0.1ml
61042 Anti-GIP  胃泌素抑制肽抗體 0.2ml
61043 Anti-TNFRSF18  糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)腫瘤壞死因子受體抗體 0.2ml
61044 Anti-Glasses Snake poison Protein  兔抗眼鏡蛇蛇毒蛋白抗體（眼鏡蛇） 0.2ml
61045 Anti-GLI1  下游轉(zhuǎn)錄因子Gli1蛋白抗體 0.2ml
61046 Anti-GLP-1 (7-36)  胰高血糖素樣肽-1抗體 0.1ml
61047 Anti-GLP-1  胰高血糖素樣肽-1抗體 0.1ml
61048 Anti-GLP-1/KG-31  GLP-1單克隆抗體 0.1ml
61049 Anti-GLP-1R  胰高血糖素樣肽-1受體抗體 0.1ml
61050 Anti-GLP-2  胰高血糖素樣肽-2抗體 0.2ml
61051 Anti-GLP-2  胰高血糖素樣肽-2抗體 0.2ml
61052 Anti-GLUT1  葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 0.1ml
61053 Anti-GLUT2  葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 0.2ml
61054 Anti-GLUT3  葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3抗體 0.2ml
61055 Anti-GLUT4  葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4抗體 0.1ml
61056 Anti-GlyR alpha 1/2/3  *受體alpha 1/2/3型抗體 0.2ml
61057 Anti-GLUT12/slc2a12  葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白12抗體 0.2ml
61058 Anti-E1 glycoprotein  風(fēng)疹病毒糖蛋白抗體 0.2ml
61059 Anti-GM-CSF  粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞克隆刺激因子抗體 0.1ml
61060 Anti-GM-CSFR alpha/CD116  粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體α抗體 0.2ml
61061 Anti-GM-CSFR Beta  粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體β抗體 0.2ml
61062 Anti-Fx1A  腎刷狀緣抗體 0.2ml
61063 Anti-GP65/SDFR1/NPTN  間質(zhì)細(xì)胞衍化因子受體1抗體 0.2ml
61064 Anti-GPA33  糖蛋白A33抗體 0.2ml
61065 Anti-GNLY/NKG5  顆粒溶素抗體 0.2ml
61066 Anti-GPNMB/Osteoactivin  GPNMB抗體 0.2ml
61067 Anti-glypican 1  磷脂?；嫉鞍拙厶?1抗體 0.2ml
61068 Anti-glypican 3/GPC3  磷脂?；嫉鞍拙厶?3抗體 0.1ml
61069 Anti-Glypican 4  磷脂?；嫉鞍拙厶?4抗體 0.2ml
61070 Anti-Glycodelin A/PP14  胎盤蛋白14抗體 0.2ml
61071 Anti-Glucocorticoid receptor  糖皮質(zhì)激素受體抗體 0.2ml
61072 Anti-Phospho-Glucocorticoid Receptor (Ser211)  磷酸化糖皮質(zhì)激素受體抗體 0.1ml
61073 Anti-GRB2/ASH  生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml
61074 Anti-GZMA  顆粒酶A抗體 0.2ml
61075 Anti-GZMB/CCPI 人單核細(xì)胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA試劑盒 顆粒酶B抗體 0.1ml
61076 Anti-Granzyme D/B/E/N/G/F/H  顆粒酶D/B/E/N/G/F/H抗體 0.1ml
61077 Anti-GRB10  生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白10抗體 0.2ml
61078 Anti-Phospho-GRB10 (Tyr67)  磷酸化生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白10 0.1ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人單核細(xì)胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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