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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-01-28 02:58:08瀏覽次數(shù):166次
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人前病毒整合位點(diǎn)1(Pim1)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人前病毒整合位點(diǎn)1(Pim1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人前病毒整合位點(diǎn)1(Pim1)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
60856 Anti-ET-1 內(nèi)皮素-1抗體 0.2ml
60857 Anti-ET-1 內(nèi)皮素-1單克隆抗體 0.2ml
60858 Anti-ET-1(whole serum) 內(nèi)皮素-1抗體(抗血清) 0.1ml
60859 Anti-Ets1/ETS-1 Ets轉(zhuǎn)錄因子家族e(cuò)ts1抗體 0.2ml
60860 Anti-ETK/BMX 非受體性蛋白*激酶ETK抗體 0.1ml
60861 Anti-Phospho-ETK (Tyr40) 磷酸化非受體性蛋白*激酶ETK抗體 0.1ml
60862 Anti-Eukaryotic aspartyl protease(Rice) 天冬氨酸蛋白酶家族蛋白抗體(水稻蛋白的一種) 1ml
60863 Anti-EV71 VP1 腸道病毒71型/手足口病病毒抗體 0.2ml
60864 Anti-EV71 VP1 (CT) 腸道病毒71型/手足口病病毒抗體(C端) 0.2ml
60865 Anti-EXPB-2 植物延展素-β 1ml
60866 Anti-ATEXPA10 植物延長(zhǎng)蛋白(擬南芥) 1ml
60867 Anti-Ezrin/Radixin 埃茲蛋白抗體 0.2ml
60868 Anti-Phospho-Ezrin (Tyr353) 磷酸化埃茲蛋白抗體 0.1ml
60869 Anti-Phospho-Ezrin (Thr567) 磷酸化埃茲蛋白抗體 0.1ml
60870 Anti-F1 operon positive regulatory protein(NT) 肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體(N端) 0.2ml
60871 Anti-F1 operon positive regulatory protein(CT) 肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體(C端) 0.2ml
60872 Anti-intestinal FABP/IFABP 腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
60873 Anti-FABP(brain) CT 腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體(C端) 0.2ml
60874 Anti-FABPB 腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
60875 Anti-factor V *5抗體 0.2ml
60876 Anti-factor VIII(FVIII) human 第八因子相關(guān)抗原抗體 0.1ml
60877 Anti-factor VIII(FVIII) 第八因子相關(guān)抗原抗體 0.1ml
60878 Anti-factor XIII *13抗體 0.2ml
60879 Anti-FADD Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白 0.1ml
60880 Anti-phospho-FADD(Ser194) 磷酸化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
60881 Anti-FAK 粘著斑激酶抗體 0.1ml
60882 Anti-Phospho-FAK (Tyr397) 磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml
60883 Anti-Phospho-FAK (Tyr861) 磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml
60884 Anti-Phospho-FAK (Tyr576/577) 磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml
60885 Anti-Phospho-FAK (Tyr925) 磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml
60886 Anti-Phospho-FAK (Tyr407) 磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml
60887 Anti-phospho-FAK (Tyr577) 磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml
60888 Anti-FAF1 Fas相關(guān)1因子抗體 0.2ml
60889 Anti-phospho-FAK (Ser732) 磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml
60890 Anti-FAK2/Pyk2 富含*的*激酶2抗體 0.2ml
60891 Anti-phospho-Pyk2 (Tyr402) 磷酸化富含*的*激酶2抗體 0.1ml
60892 Anti-phospho-Pyk2 (Tyr881) 磷酸化富含*的*激酶2抗體 0.1ml
60893 Anti-FANCD2 FANCD2抗體 0.2ml
60894 Anti-phospho-FANCD2(Ser222) 磷酸化FANCD2抗體 0.1ml
60895 Anti-FANCF 范可尼貧血相關(guān)蛋白F抗體 0.2ml
60896 Anti-FAM3B/PANDER 胰腺衍生因子抗體 0.2ml
60897 Anti-FAS/Apo-1/CD95 載脂蛋白A1抗體 0.1ml
60898 Anti-APOA1 載脂蛋白A1抗體 0.1ml
60899 Anti-FASN 脂肪酸合成酶抗體 0.2ml
60900 Anti-Apo B 載脂蛋白B抗體 0.1ml
60901 Anti-FAST kinase Fas活化的絲/*激酶抗體 0.2ml
60902 Anti-FasL 兔抗FasL抗體。 0.1ml
60903 Anti-fatty acid elongase 脂肪酸延長(zhǎng)酶抗體 1ml
60904 Anti-Fc gamma RII a/CD32a 免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ抗體 0.2ml
60905 Anti-FBN1 原纖維蛋白1抗體 0.2ml
60906 Anti-FDC-SP/ADC人前病毒整合位點(diǎn)1(Pim1)ELISA試劑盒 濾泡樹突細(xì)胞分泌蛋白抗體 0.2ml
60907 Anti-Fe65 protein/APBB1 鐵蛋白Fe65抗體 0.1ml
60908 Anti-FGF1/AFGF 酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗體 0.1ml
60909 Anti-FGF3/Oncogene INT2 纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子3抗體 0.1ml
60910 Anti-FGF4 纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子4抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人前病毒整合位點(diǎn)1(Pim1)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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