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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-15 11:06:51瀏覽次數(shù):242次
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人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
60746 Anti-E2F5 轉(zhuǎn)錄因子E2F-5抗體 0.2ml
60747 Anti-E2F6 轉(zhuǎn)錄因子E2F6抗體 0.1ml
60748 Anti-E2 tag E2 tag標簽抗體 0.1ml
60749 Anti-HPV16 E7 protein 人乳頭瘤病毒16型E7抗體 0.2ml
60750 Anti-EAAT1/Glast 膠質(zhì)細胞*運載蛋白1抗體 0.1ml
60751 Anti-EAAT2 膠質(zhì)細胞*運載蛋白2抗體 0.2ml
60752 Anti-EAAT3 膠質(zhì)細胞*運載蛋白3抗體 0.1ml
60753 Anti-EBNA 3A EB病毒核抗原-3A抗體 0.2ml
60754 Anti-ECE1 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1抗體 0.1ml
60755 Anti-ECE2 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶2抗體 0.2ml
60756 Anti-ECG2 食道癌相關(guān)基因抗體 0.1ml
60757 Anti-ECM1 細胞外基質(zhì)蛋白1抗體 0.2ml
60758 Anti-ECP 嗜酸性粒細胞陽離子蛋白抗體 0.2ml
60759 Anti-ED-1 外胚層發(fā)育不良抗體 0.1ml
60760 Anti-EDNRA 內(nèi)皮素受體A抗體 0.2ml
60761 Anti-EEF2 真核翻譯延長因子2抗體 0.2ml
60762 Anti-Phospho-EEF2 (Thr56) 磷酸化真核翻譯延長因子2抗體 0.1ml
60763 Anti-EEF2k 真核延伸因子激酶2抗體 0.2ml
60764 Anti-Phospho-EEF2k (Ser366) 磷酸化真核延伸因子激酶2抗體 0.1ml
60765 Anti-EGFR 表皮生長因子受體抗體 0.1ml
60766 Anti-Phospho-EGFR(Ser1046/1047) 磷酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml
60767 Anti-Phospho-EGFR(Thr669) 磷酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml
60768 Anti-Phospho-EGFR(Tyr1045) 磷酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml
60769 Anti-Phospho-EGFR(Tyr1086) 磷酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml
60770 Anti-Phospho-EGFR(Tyr1148) 磷酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml
60771 Anti-Phospho-EGFR(Tyr1173) 磷酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml
60772 Anti-Phospho-EGFR(Tyr845) 磷酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml
60773 Anti-Phospho-EGFR(Tyr998) 磷酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml
60774 Anti-EGF 表皮生長因子抗體 0.1ml
60775 Anti-phospho-EGFR(Tyr1068) 磷酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml
60776 Anti-EGF 表皮生長因子抗體 0.1ml
60777 Anti-VEGFR3 表皮生長因子受體3抗體 0.2ml
60778 Anti-EGF 表皮生長因子抗體(大鼠) 0.1ml
60779 Anti-EGFL7 類表皮生長因子域7抗體 0.2ml
60780 Anti-EGFR 表皮生長因子受體抗體 0.1ml
60781 Anti-EF1 Alpha 延伸因子EF-1a抗體 0.2ml
60782 Anti-EGFRvIII 表皮生長因子受體III型突變體抗體 0.2ml
60783 Anti-Egr-1 早期生長應(yīng)答蛋白1抗體 0.2ml
60784 Anti-eIF2 alpha 真核啟動因子2α抗體 0.2ml
60785 Anti-Phospho-eIF2 alpha (Ser51) 磷酸化真核啟動因子2α抗體 0.1ml
60786 Anti-eIF4E 真核翻譯起始因子4E抗體 0.2ml
60787 Anti-phospho-eIF4E(Ser209) 磷酸化真核翻譯起始因子4E抗體 0.1ml
60788 Anti-ELK1 細胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體 0.2ml
60789 Anti-Phospho-ELk1 (Ser383) 磷酸化細胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體 0.1ml
60790 Anti-Elastin 彈性蛋白抗體 0.2ml
60791 Anti-ELAVL1/HuR ELAVL1抗體 0.2ml
60792 Anti-Emp1 表皮膜蛋白1抗體 0.1ml
60793 Anti-sFRP-4 子宮內(nèi)膜抗體 0.2ml
60794 Anti-Endostatin 內(nèi)皮抑素/內(nèi)皮他丁抗體 0.1ml
60795 Anti-Endo G人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)ELISA試劑盒 核酸內(nèi)切酶G抗體 0.1ml
60796 Anti-beta endorphin β-內(nèi)啡肽抗體 0.1ml
60797 Anti-envelope glycoprotein (Yellow fever virus) 黃熱病毒包膜糖蛋白抗體 0.2ml
60798 Anti-ENPP1/PC-1 核苷酸內(nèi)焦磷酸酶/磷酸二酯酶1抗體 0.2ml
60799 Anti-ENPP3/CD203c ENPP3抗體IgG 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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