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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-03-14 13:31:49瀏覽次數(shù):169次
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人抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
60578 Anti-Phospho-CRMP-2 (Thr514) 磷酸化二氫嘧啶酶樣2抗體 0.1ml
60579 Anti-CRLR/CGRPR1 降鈣素基因相關(guān)肽1型受體抗體 0.1ml
60580 Anti-SLAMF7/CD319 SLAMF7抗體 0.2ml
60581 Anti-CRP C-反應(yīng)蛋白抗體 0.1ml
60582 Anti-CRP C-反應(yīng)蛋白單克隆抗體 0.2ml
60583 Anti-CREB-1 環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
60584 Anti-CREB-1 環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
60585 Anti-phospho-CREB-1(Ser133) 磷酸化CREB-1抗體 0.1ml
60586 Anti-CRF/CRH 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子抗體 0.1ml
60587 Anti-CRF/CRH 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子抗體 0.1ml
60588 Anti-CRHR1/CRFR1 促腎上腺皮質(zhì)釋放激素受體1抗體 0.2ml
60589 Anti-CRHR2/CRFR2 促腎上腺皮質(zhì)釋放激素受體2抗體 0.2ml
60590 Anti-CSIG 細(xì)胞衰老抑制基因抗體 0.2ml
60591 Anti-Cripto-1(NT) 畸胎瘤衍化生長因子抗體(N端) 0.2ml
60592 Anti-Cripto-1 畸胎瘤衍化生長因子抗體(C端) 0.2ml
60593 Anti-CSMD1 CSMD1抗體 0.2ml
60594 Anti-CRTAM CRTAM抗體 0.2ml
60595 Anti-CSP 環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗體 1ml
60596 Anti-C-SKI/v-SKI C-SKI抗體 0.1ml
60597 Anti-Calcitonin 降鈣素抗體 0.1ml
60598 Anti-Calcitonin 降鈣素抗體 0.1ml
60599 Anti-CTBP1 C端結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml
60600 Anti-CT DNA (calf thymus DNA) 小牛胸腺DNA 抗體 0.2ml
60601 Anti-CTGF 結(jié)締組織生長因子抗體 0.1ml
60602 Anti-CD150/SLAM 信號(hào)淋巴細(xì)胞活化分子CD150抗體 0.2ml
60603 Anti-CD151/MER2/PETA-3 CD151抗體 0.2ml
60604 Anti-CD155/PVR 脊髓灰質(zhì)炎病毒受體抗體 0.2ml
60605 Anti-CTLA-4/CD152 細(xì)胞毒性T細(xì)胞抗原-4抗體 0.1ml
60606 Anti-CTR1/Calcitonin receptor 降鈣素受體抗體 0.1ml
60607 Anti-Cullin/C10orf46 CULLIN抗體 0.2ml
60608 Anti-Cullin 4a Cullin 4a蛋白抗體 0.2ml
60609 Anti-Connexin-26 間隙連接蛋白26抗體 0.2ml
60610 Anti-Connexin-32 間隙連接蛋白32抗體 0.1ml
60611 Anti-Connexin-36 間隙連接蛋白36抗體 0.2ml
60612 Anti-Connexin-40 間隙連接蛋白40抗體 0.1ml
60613 Anti-Connexin 43 Cx-43蛋白抗體 0.1ml
60614 Anti-Phospho-Connexin 43 (Ser368) 磷酸化Connexin 43蛋白抗體 0.1ml
60615 Anti-Connexin-45 間隙連接蛋白45抗體 0.1ml
60616 Anti-CXCR1/IL-8RA 細(xì)胞表面趨化因子受體1抗體 0.1ml
60617 Anti-CXCR2/CD182 細(xì)胞表面趨化因子受體2抗體 0.1ml
60618 Anti-CX3CL1 CX3CL1抗體 0.1ml
60619 Anti-CX3CR1 趨化因子受體1抗體 0.2ml
60620 Anti-CXorf36 脫羧酶蛋白體36抗體 0.2ml
60621 Anti-CXorf36 脫羧酶蛋白體36抗體 0.2ml
60622 Anti-Cyclin A 周期素A抗體 0.1ml
60623 Anti-Cyclin B1 周期素B1抗體 0.1ml
60624 Anti-Phospho-Cyclin B1 (Ser147) 磷酸化周期素B1抗體 0.1ml
60625 Anti-Phospho-Cyclin B1 (Ser133) 磷酸化周期素B1抗體 0.1ml
60626 Anti-Cyclin C 周期素C抗體 0.1ml
60627 Anti-Cyclin D1 周期素D1抗體 0.1ml
60628 Anti-Phospho-Cyclin D1 (Thr286) 磷酸化cyclin D1抗體 0.1ml
60629 Anti-Cyclin D2 周期素D2抗體 0.1ml
60630 Anti-Cyclin D3 周期素D3抗體 0.2ml
60631 Anti-Cyclin E 周期素E抗體人抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒 0.1ml
60632 Anti-phospho-Cyclin E(Thr395) 磷酸化周期素E抗體 0.1ml
60633 Anti-phospho-Cyclin E(Thr62) 磷酸化周期素E抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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