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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-01-27 22:58:49瀏覽次數(shù):464次
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人抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
60520 Anti-CLEC2/CLEC1B C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族1成員B抗體 0.2ml
60521 Anti-C-Mer/MERTK c-mer原癌基因*激酶抗體 0.1ml
60522 Anti-CLEC13D/CD206 巨噬細(xì)胞甘露糖受體抗體 0.2ml
60523 Anti-C-Met/Met/HGFR 肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體抗體 0.1ml
60524 Anti-Phospho-Met (Tyr1003) 磷酸化肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(原癌基因)抗體 0.1ml
60525 Anti-Phospho-Met (Tyr1234/1235) 磷酸化肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(原癌基因)抗體 0.1ml
60526 Anti-Phospho-Met (Tyr1349) 磷酸化肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(原癌基因)抗體 0.1ml
60527 Anti-CMKLR1/CHEMR23 趨化樣因子受體1抗體 0.2ml
60528 Anti-MTLC/C-myc 致癌基因抗體 0.1ml
60529 Anti-phospho C-Myc(Thr58/pSer62) 磷酸化致癌基因C-Myc抗體 0.1ml
60530 Anti-phospho C-Met/HGFR(Tyr1365) 磷酸化原癌基因c-Met抗體 0.1ml
60531 Anti-c-Myc tag c-Myc tag標(biāo)簽抗體 0.1ml
60532 Anti-AU5 tag AU5 tag標(biāo)簽抗體 0.1ml
60533 Anti-AU1 tag AU1 tag標(biāo)簽抗體 0.1ml
60534 Anti- Glu-Glu tag抗體 0.1ml
60535 Anti-E Tag E Tag標(biāo)簽抗體 0.1ml
60536 Anti-CNGA2 環(huán)核苷酸陽離子通道蛋白α2抗體 0.2ml
60537 Anti-CANX 鈣連蛋白抗體 0.2ml
60538 Anti-CNP/CNPase C型鈉尿肽抗體 0.1ml
60539 Anti-CNR-1 鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1抗體 0.2ml
60540 Anti-CNTFR Alpha 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α抗體 0.2ml
60541 Anti-CNR-2/PCDHA 6 鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體2抗體 0.2ml
60542 Anti-CNTF 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體 0.1ml
60543 Anti-cofilin 絲切蛋白抗體 0.2ml
60544 Anti-Phospho-Cofilin (Ser3) 磷酸化絲切蛋白抗體 0.1ml
60545 Anti-COLEC12 凝集胎盤蛋白1抗體 0.2ml
60546 Anti-Collagen I Ⅰ型膠原抗體 0.1ml
60547 Anti-Collagen II Ⅱ型膠原抗體 0.1ml
60548 Anti-Collagen III 抗Ⅲ型膠原抗體 0.1ml
60549 Anti-Collagen III 抗Ⅲ型膠原抗體 0.1ml
60550 Anti-Collagen IV 抗IV型膠原抗體 0.1ml
60551 Anti-Collagen VI 抗Ⅵ型膠原抗體 0.2ml
60552 Anti-Collagen VII Ⅶ膠原抗體 0.2ml
60553 Anti-Collagen V Ⅴ型膠原抗體 0.1ml
60554 Anti-Collagen X Ⅹ型膠原抗體 0.1ml
60555 Anti-Contactin-6 NB-3神經(jīng)粘附蛋白抗體 0.2ml
60556 Anti-Claudin 1 緊密連接蛋白1抗體 0.2ml
60557 Anti-Claudin 3 緊密連接蛋白3抗體 0.2ml
60558 Anti-Claudin 4 緊密連接蛋白4抗體 0.2ml
60559 Anti-Cortactin 皮層肌動(dòng)蛋白抗體 0.2ml
60560 Anti-phospho-Cortactin (Tyr466) 磷酸化皮層肌動(dòng)蛋白抗體 0.1ml
60561 Anti-Claudin 5 緊密連接蛋白5抗體 0.2ml
60562 Anti-Claudin-11 少突膠質(zhì)細(xì)胞跨膜蛋白抗體 0.1ml
60563 Anti-Claudin 1 緊密連接蛋白1抗體(C端) 0.2ml
60564 Anti-COMP/EPD1 軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗體 0.2ml
60565 Anti-COX1 前列腺素氧化環(huán)化酶1抗體 0.2ml
60566 Anti-Cyclooxygenase 2/COX2 前列腺素過氧化物合成酶2抗體 0.1ml
60567 Anti-CDX2 尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子2抗體 0.2ml
60568 Anti-COX IV-1 *氧化酶IV亞型1抗體 0.2ml
60569 Anti(c-phycocyanin C-藻藍(lán)素/藻藍(lán)蛋白抗體 0.1ml
60570 Anti-C Peptide C-肽抗體人抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA試劑盒 0.2ml
60571 Anti-CPT1A 肉毒堿棕櫚?;D(zhuǎn)移酶1A抗體 1ml
60572 Anti-CPSF4/CPSF30 剪切和多聚腺苷酸化特異性因子4抗體 0.2ml
60573 Anti-Calretinin 鈣結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
60574 Anti-Crk p38 /CrkII Crk p38抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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