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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-07 02:23:43瀏覽次數(shù):216次
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人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
60182 Anti-CAS/CSE1 細胞凋亡敏感性基因 0.1ml
60183 Anti-Phospho-Cas (Tyr165) 磷酸化細胞凋亡敏感性基因 0.1ml
60184 Anti-Caspase-1(actived) 天冬氨酸-*特異性蛋白酶家族抗體 0.1ml
60185 Anti-Caspase-10 半胱胺酸蛋白酶-10抗體 0.2ml
60186 Anti-Caspase-12 半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體 0.2ml
60187 Anti-Caspase-12 半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體 0.1ml
60188 Anti-Caspase-13/4 半胱胺酸蛋白酶蛋白-13抗體 0.2ml
60189 Anti-Caspase-3(Active) 活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗體 0.1ml
60190 Anti-caspase-3 p12 subunit 活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗體 0.2ml
60191 Anti-procaspase 3 半胱天冬酶-3酶原抗體 0.2ml
60192 Anti-Caspase 4 半胱胺酸蛋白酶蛋白-4抗體 0.2ml
60193 Anti-Caspase-6 (CT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體(C端) 0.1ml
60194 Anti-Caspase-6 (NT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體(N端) 0.1ml
60195 Anti-Caspase-6 (NT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體(N端) 0.1ml
60196 Anti-Caspase-7 半胱胺酸蛋白酶蛋白-7抗體 0.1ml
60197 Anti-Caspase-8 半*蛋白酶8抗體 0.1ml
60198 Anti-Caspase-9 白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體 0.1ml
60199 Anti-Caspase-9 白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體 0.1ml
60200 Anti-Phospho-Caspase-9 (Thr125) 磷酸化半*蛋白酶9抗體 0.1ml
60201 Anti-Phospho-Caspase-9 (Try153) 磷酸化半*蛋白酶9抗體 0.1ml
60202 Anti-Caveolin-1 細胞質(zhì)膜微囊蛋白-1抗體 0.2ml
60203 Anti-Phospho-Caveolin-1 (Tyr14) 磷酸化細胞質(zhì)膜微囊蛋白-1抗體 0.1ml
60204 Anti-Caveolin-3 細胞質(zhì)膜微囊蛋白-3抗體 0.2ml
60205 Anti-Alpha-Catenin α-連環(huán)蛋白抗體 0.1ml
60206 Anti-Beta catenin β-連環(huán)蛋白抗體(β鏈接素) 0.1ml
60207 anti-phospho-Beta-catenin(Tyr142) 磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體 0.1ml
60208 Anti-Phospho-Beta-Catenin (Ser33/37) 磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體 0.1ml
60209 Anti-Phospho-Beta-Catenin (Ser45) 磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體 0.1ml
60210 Anti-Phospho-Beta-Catenin (Ser552) 磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體 0.1ml
60211 Anti-Phospho-Beta-Catenin (Ser675) 磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體 0.1ml
60212 Anti-Phospho-Beta-Catenin (Thr41/Ser45) 磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體 0.1ml
60213 Anti-Cateninma gamma gamma連環(huán)蛋白抗體 0.1ml
60214 anti-Cathepsin B 組織蛋白酶B抗體 0.1ml
60215 Anti-DPP-I 組織蛋白酶C抗體 0.2ml
60216 anti-Cathepsin E 組織蛋白酶E抗體 0.1ml
60217 Anti-Cathepsin D 組織蛋白酶D抗體 0.1ml
60218 anti-Cathepsin L 組織蛋白酶L抗體 0.2ml
60219 Anti-CTSG/CG 組織蛋白酶G抗體 0.2ml
60220 Anti-Cathepsin K 組織蛋白酶K抗體 0.2ml
60221 Anti-Cathepsin H 組織蛋白酶H抗體 0.2ml
60222 Anti-CBL2 原癌蛋白CBL2抗體 0.2ml
60223 Anti-phospho-CBL2(Tyr731) 磷酸化原癌蛋白CBL2抗體 0.1ml
60224 Anti-phospho-CBL2(Tyr774) 磷酸化原癌蛋白CBL2抗體 0.1ml
60225 Anti-RUNX2 (Runt-related Transcription Factor 2)CBFA1/ 成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體 0.1ml
60226 Anti-CBP/CREBBP CREB結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
60227 Anti-HP1 gamma 異染色質(zhì)蛋白1-γ抗體 0.2ml
60228 Anti-Phospho-HP1 gamma (Ser83) 磷酸化染色質(zhì)相關(guān)蛋白1-γ抗體 0.1ml
60229 Anti-CBX5 CBX5抗體 0.2ml
60230 Anti-Cbx8 染色質(zhì)結(jié)合蛋白Cbx8抗體 0.2ml
60231 Anti-CCK8 膽囊收縮素抗體人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)ELISA試劑盒 0.1ml
60232 Anti-CC16 克拉拉細胞蛋白抗體 0.2ml
60233 Anti-CCP 瓜氨酸環(huán)肽抗體 0.2ml
60234 Anti-CCL1/TCA3/I-309 嗜酸粒細胞趨化蛋白CCL1抗體 0.2ml
60235 Anti-CCL3/MIP-1 Alpha 巨噬細胞炎性蛋白1α抗體 0.2ml
60236 Anti-CCL4/MIP-1 Beta 巨噬細胞炎性蛋白1β抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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