人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTF Ab-Ig)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTF Ab-Ig)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

59693 鹽酸奧克巴胺V WITHANOSIDE V                                                                                     >95%
59694 鹽酸胡蘆巴堿 TRIGONELLINE HYDROCHLORIDE                                                                        >95%
59695 異佛斯可林 ISOFORSKOLIN                                                                                      >95%
59696 豬毛蒿 EUPALITIN                                                                                         >95%
59697 多巴 L­Dopa  >95%
59698 1,3,6-三-O-3,4,5-三羥基苯甲酰-BETA-D-葡萄糖 1,3,6­Trigalloyl ­β­D­glucose  >90%
59699 1,9-二脫氧福斯高林 1,9­dideoxyforskolin  >95%
59700 11-酮基-beta-乳香酸 11­Keto­β­boswellic acid  >95%
59701 14-去氧-11,12-二去氫*內(nèi)酯 14­deoxy­11,12 ­didehydro andrographolide  >95%
59702 18­α­甘草次酸 18­α­Glycyrrhetinic acid  >95%
59703 18β­甘草次酸 18β ­Glycyrrhetinic acid  >95%
59704 蒙旦醇 1­Octacosanol  >95%
59705 普利醇 1­Octacosanol  >95%
59706 3,3'-二甲氧基鞣花酸-4-O-β-D-吡喃木
糖苷 3­3'­di­O­methyl ellagic acid­4' ­O­β­D­xylopyranoside  >95%
59707 乙?；?alpha+beta-乳香酸 3­O­Acetylboswellic acid (α+β)  >95%
59708 3-甲基鞣花酸 3­O­Methylellagic acid  >95%
59709 5-羥基-7,8-二甲氧基黃酮 7­O­Methylwogonin  >95%
59710 黃樟素 Allylpyrocatechol  >95%
59711 3，4-烯丙基焦兒茶酚雙醋酸酯 Allylpyrocatechol ­3,4­diacetate  >95%
59712 反-茴香腦 Anethole  >95%
59713 2alpha,19alpha,23-三羥基*  ARJUNGENIN                                                                                        >95%
59714 苦艾素混合物 Bacoside­A (Mixture of Bacoside­A3, Bacopaside­II, Jujubogenin isomer of bacopasaponin C & Bacopasaponin C)  >95%
59715 白芷素 ANGELICIN (BAKUCHICIN)                                                                            >95%
59716 (α+β)乳香酸 Boswellic acid (α+β)  >95%
59717 石竹烯 Caryophyllene  >95%
59718 兒茶素沒食子酸酯 CATECHIN-5-O-GALLATE                                                                              >95%
59719 甲基條葉薊素 Cirsilineol  >95%
59720 香茅醇 Citronellol  >95%
59721 3,7-二甲基-6-辛烯-1-醇 Citronellol  >95%
59722 *二十二酯 Docosyl caffeate  >95%
59723 墨旱蓮皂苷II Eclalbasaponin II  >95%
59724 墨旱蓮皂苷I Eclalbosaponin I  >95%
59725 (α+β) -嵐香酮酸 Elemolic acid (α+β)  >95%
59726 β-嵐香酮酸 Elemonic acid (β)  >95%
59727 4-烯丙基苯甲醚  Estragole  >95%
59728 醋酸香葉酯 Geranyl acetate  >95%
59729 * Glycyrrhizin ammonical hydrate  >90% 
59730 去甲駱駝蓬堿 Harmalol  >95%
59731 N-(2-甲基丙基)-4,5-癸二烯酰胺 ISOBUTYLDECADIENAMIDE, N-(2E,4E)-                                                                 >95%
59732 異丁子香酚 Isoeugenol  >95%
59733 異* Isoeugenol  >95%
59734 (-)-假馬齒莧皂苷C Jujubogenin isomer of bacopasaponin C  >95%
59735 對甲氧基肉桂酸乙酯 PARAMETHOXYETHYLCINNAMATE                                                                         >95%
59736 二水槲皮素 Quercetin dihydrate  >95%
59737 3,3',4',5,7-五羥基黃酮二水合物 Quercetin dihydrate  >95%
59738 4,8,12-*基-1-異丙基-3,7,11-環(huán)十四三烯-1-醇 Serratol  >95%
59739 蒲公英賽醇 Taraxerol  >95%
59740 反式-2,4,5-*氧基-1-丙烯苯 α­asarone  >95%
59741 BETA-* β­asarone  >95%
59742 Beta-乳香酸 β­boswellic acid  >95%
59743 Beta-葡糖倍苷 β­Glucogallin  >95%
59744 beta-谷甾醇 β­sitosterol  >95%
59745 植物甾醇 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTF Ab-Ig)ELISA試劑盒β­sitosterol  >95%
59746 花青素3-阿拉伯糖苷 Cyanidin 3-arabinoside chloride
59747 矢車菊素半乳糖苷 Cyanidin 3-galactoside chloride >97%
59748 氯化花青素-3-槐糖苷 Cyanidin 3-O-sophoroside chloride >98%
59749 花青素鼠李葡糖苷  Cyanidin 3-rutinoside chloride >98%

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。
5人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTF Ab-Ig)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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