人組織蛋白酶抗體(Cath Ab)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人組織蛋白酶抗體(Cath Ab)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。
59631 原偽金絲桃素 Protopseudohypericin ≥95%
59632 遠志山酮III Polygalaxanthone III ≥97%
59633 澤蘭黃酮 Nepetin >98%
59634 澤瀉醇B-23-醋酸酯 AlisolB-23-acetate ≥97%
59635 獐芽菜苷 Sweroside 98%
59636 知母皂苷BⅡ anemarsaponin B 97%
59637 竹葉香附素A Raddeanin(Anemodeanin) A 98%
59638 紫花前胡素 DECURSIN ≥97%
59639 紫杉葉素 (+)-Taxifolin ≥95%
59640 總銀杏酸(C13:0,C15:1,C17:1) Ginkgolic Acids
(C13:0,C15:1,C17:1) ≥95%
59641 總銀杏酸
(C13:0,C15:1,C17:2,C15:0,C17:1) Ginkgolic Acids
(C13:0,C15:1,C17:2,C15:0,C17:1) ≥99%
59642 睡茄素A WITHANOLIDE A >95%
59643 睡茄素B WITHANOLIDE B >95%
59644 2-羥基檸檬酸三鉀 HYDROXYCITRIC ACID CALCIUM SALT, (-)- /() Hydroxycitric acid (Casalt) >95%
59645 1,2-二羥基-1,2,3-丙烷*酸 HYDROXYCITRIC ACID CALCIUM SALT, (-)- /() Hydroxycitric acid (Casalt) >95%
59646 2-羥基檸檬酸 HYDROXYCITRIC ACID CALCIUM SALT, (-)- /() Hydroxycitric acid (Casalt) >95%
59647 3-乙酰基-BETA-乳香酸 βacetylboswellic acid >95%
59648 D,L-1'-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯 1'acetoxychavicol acetate >95%
59649 阿江欖仁酸 ARJUNIC ACID >95%
59650 倍酸甲酯 METHYLGALLATE >95%
59651 蠶豆苷 VICINE >95%
59652 巢菜堿苷 VICINE >95%
59653 匙羹藤新苷元 GYMNEMAGENIN >95%
59654 次葉下珠素 HYPOPHYLLANTHIN >95%
59655 刺蒺藜素 TRIBULOSIN >95%
59656 豆固醇 STIGMASTEROL >95%
59657 豆甾醇 STIGMASTEROL >95%
59658 恩貝酸 EMBELIN >95%
59659 恩貝靈 EMBELIN >95%
59660 芳姜黃酮 arTurmerone >95%
59661 福斯高林1,9-二脫氧 DIDEOXYFORSKOLIN, 1,9-
59662 谷甾醇-3-O-葡萄糖苷 βsitosterolDglucoside >95%
59663 胡蘿卜苷 βsitosterolDglucoside >95%
59664 哈馬靈 HARMALINE >95%
59665 訶黎勒鞣花酸 Chebulagic acid >90%
59666 訶子次酸 CHEBULIC ACID >90%
59667 訶子林鞣酸 CHEBULINIC ACID >90%
59668 黃芩新素I SKULLCAPFLAVONE I >95%
59669 黃細心酮 B BOERAVINONE B >90%
59670 甲基異茜草素 RUBIADIN >95%
59671 假馬齒莧皂苷C BACOPASAPONIN C >95%
59672 假馬齒莧皂苷I BACOPASIDE I >95%
59673 假馬齒莧皂苷II BACOPASIDE II >95%
59674 苦艾素 BACOSINE >95%
59675 苦艾素A BACOSIDE A >95%
59676 苦艾素A3 BACOSIDE A3 >95%
59677 苦艾素X BACOSIDE X >95%
59678 六氫姜黃素 Hexahydrocurcumin >95%
59679 駱駝蓬酚 HARMALOL HCL >95%
59680 駱駝蓬堿 HARMALINE HCL >95%
59681 木脂索 PHYLLANTHIN >95%
59682 去半乳糖替告皂甙 DEGALACTOTIGONIN >95%
59683 乳香酸 BOSWELLIC ACID, a- >95%
59684 四氫姜黃素 TETRAHYDROCURCUMIN >95%
59685 藤黃內(nèi)酯 HYDROXYCITRIC ACID LACTONE, (-)- >95%
59686 (-)-羥基檸檬酸內(nèi)酯 HYDROXYCITRIC ACID LACTONE, (-)- >95%
59687 天冬寧B SHATAVARIN IV ；Asparanin B >95%
59688 腺苷酸環(huán)化酶激活劑 FORSKOLIN >95%
59689 人組織蛋白酶抗體(Cath Ab)ELISA試劑盒新*內(nèi)酯苷元 ANDROGRAPANIN >95%
59690 鴨嘴花堿酮 VASICINONE >95%
59691 鴨嘴花堿鹽酸鹽 VASICINE HCL >95%
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法：
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時間人為延長，導致非特異性結(jié)合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人組織蛋白酶抗體(Cath Ab)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流；
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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