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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-23 15:49:29瀏覽次數:262次
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人抗角蛋白抗體(AKA)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人抗角蛋白抗體(AKA)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人抗角蛋白抗體(AKA)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質量。
59250 大豆皂苷BB Soyasaponin Bb ≥97%
59251 大薊苷 Pectolinarin ≥98%
59252 大葉茜草素 Mollugin ≥98%
59253 丹參酚酸A Salvianolic acid A ≥96%
59254 丹參酮Ⅰ Tanshinone I ≥99%
59255 丹參酮ⅡA Tanshinone II A ≥98%
59256 丹酚酸C Salvianolic acid C 98%
59257 * Indirubin ≥98%
59258 * Eugenol ≥98%
59259 丁香樹脂醇雙葡萄糖苷 Syringaresinol-di-O-glucoside 95%
59260 丁香酸 Syringic acid 98%
59261 3,5-二甲氧基-4-羥基苯甲酸 Syringic acid 98%
59262 *堿 Scopolamine butylbromide ≥98%
59263 東莨菪堿 Hyoscin ≥98%
59264 東莨菪內酯 Scopoletin ≥98%
59265 冬綠苷 Gaultherin ≥98%
59266 * Hiliedum 97%
59267 豆腐果新苷A Helicianeoide A ≥95%
59268 豆腐果新苷B Helicianeoide B ≥95%
59269 豆蔻明 Cardamonin ≥98%
59270 杜鵑素 Farrerol ≥98%
59271 *皂苷A Clinodiside A 98%
59272 醉魚草皂苷Ⅳb Clinodiside A 98%
59273 對葉百部堿 tuberostemonine ≥97%
59274 多烯* Docetaxel ≥99%
59275 莪二酮 Curdione ≥98%
59276 莪術二酮 Curdione ≥98%
59277 姜黃二酮 Curdione ≥98%
59278 二氫辣椒素 Dihydrocapsaicin ≥98%
59279 二氫麻醉椒苦素 Dihidromethysticin ≥98%
59280 二氫石蒜堿 Dihydrolycorine ≥98%
59281 二氫醉椒素 Dihydrokavain ≥99%
59282 番茄紅素 Lycopene ≥95%
59283 蜂斗菜內酯 Bakkenolide ≥98%
59284 * Glycine ≥98%
59285 甘草苷元-7-O-D-芹糖-4’-O-D-葡萄糖苷 Liguiritigenin-7-O-D-apiosyl-4’-O-D-glucoside 95%
59286 高車前苷 Homoplantaginin ≥95%
59287 高車前素 Hispidulin ≥98%
59288 藁本內酯 Ligustilide ≥98%
59289 鉤吻素子 Koumine ≥98%
59290 枸橘苷 Poncirin ≥98%
59291 枸櫞酸血根堿 Sanguinarine citrate ≥98%
59292 桂皮醛 Cinnamic aldehyde ≥98%
59293 桂皮酸,肉桂酸 Cinnamic acid ≥98%
59294 * d-Tetrandrine ≥97%
59295 漢防己乙素 Hanfangchin B ≥98%
59296 何首烏苷 2,3,5,4'-Tetrahydroxy stilbene-2-Ο-β-D-glucoside ≥98%
59297 黑介子苷 Sinigrin ≥98%
59298 衡州*靈 PICROTOXIN ≥98%
59299 *A Erythromycin A ≥98%
59300 紅盞花素 Breviscapine 95%
59301 胡黃連苷-Ⅲ Picroside-Ⅲ ≥97%
59302 * Cucurbitacin ≥98%
59303 華蟾毒精 Cinobufagin ≥98%
59304 華蟾酥毒基 Cinobufagin ≥98%
59305 樺木醇 Betulin ≥95%
59306 槐角苷 Sophoricoside ≥98%
59307 環(huán)孢菌素A Cyclosporin A ≥98%
59308 環(huán)孢菌素C人抗角蛋白抗體(AKA)ELISA試劑盒 Cyclosporin C ≥95%
59309 環(huán)孢菌素D Cyclosporin D ≥95%
59310 環(huán)孢菌素H Cyclosporin H ≥98%
59311 環(huán)氧長春堿 Vinleurosine ≥98%
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人抗角蛋白抗體(AKA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現(xiàn)在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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