人抗*(AT)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人抗*(AT)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

58918 檸檬酸鹽培養(yǎng)基 Citrate Agar 大腸桿菌和產(chǎn)氣桿菌的鑒別 250克
58919 尿素瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) Urease Agar Base 細(xì)菌脲酶檢測(cè)，腸桿菌鑒別 250克
58920 KCN培養(yǎng)基基礎(chǔ) Potassium Cyanide Medium Base 用于鑒別腸道細(xì)菌KCN抑制試驗(yàn) 100克
58921 MR-VP試驗(yàn)用培養(yǎng)基 MR VP Broth 腸桿菌科細(xì)菌的甲基紅和VP試驗(yàn) 250克
58922 緩沖葡萄糖蛋白胨水 Buffer Glucose Peptone Water 腸桿菌科細(xì)菌的甲基紅-VP試驗(yàn) 100克
58923 V-P半固體瓊脂 Voges-Proskauer Semisolid Agar 細(xì)菌V-P試驗(yàn) 250克
58924 胰蛋白胨水肉湯 Tryptone Broth 靛基質(zhì)試驗(yàn) 250克
58925 明膠培養(yǎng)基 Gelatin Medium 細(xì)菌明膠液化試驗(yàn) 250克
58926 靛基質(zhì)培養(yǎng)基 Indole Medium 細(xì)菌靛基質(zhì)試驗(yàn) 250克
58927 丙二酸鹽培養(yǎng)基 Malonate Broth 用于測(cè)定腸道細(xì)菌對(duì)丙二酸鹽的利用試驗(yàn) 10克
58928 脫氧核糖核酸酶瓊脂 Dnase Agar 用于細(xì)菌DNA酶檢測(cè) 100克
58929 賴氨酸脫羧酶培養(yǎng)基 Lysine Decarboxylase Medium 用于細(xì)菌賴氨酸脫羧酶試驗(yàn) 5克
58930 脫羧酶對(duì)照試驗(yàn)培養(yǎng)基 Decarboxylase Control Medium 脫羧酶試驗(yàn)陰性對(duì)照（無(wú)氨基酸） 5克
58931 *雙水解酶試驗(yàn)用培養(yǎng)基 AD 細(xì)菌*水解試驗(yàn)，用于假單胞菌屬鑒別；弧菌的*試驗(yàn) 5克
58932 *葡萄糖斜面瓊脂 Arginine Dextrose Agar 霍亂弧菌的復(fù)合生化試驗(yàn) 100克
58933 苯*瓊脂培養(yǎng)基 Phenylalanine Deaminase Medium 用于細(xì)菌苯*脫羧酶試驗(yàn) 100克
58934 假單胞P瓊脂 Pseudomonas Agar P 銅綠（綠膿）假單胞菌色素生成試驗(yàn) 250克
58935 假單胞F瓊脂 Pseudomonas Agar F 銅綠（綠膿）假單胞菌色素生成試驗(yàn) 250克
58936 衛(wèi)矛醇半固體瓊脂 Dulcitol Semisolid Agar 細(xì)菌衛(wèi)矛醇發(fā)酵試驗(yàn) 10克
58937 四號(hào)瓊脂 NO.4 Agar Base 霍亂弧菌選擇性分離培養(yǎng) 250克
58938 我妻氏*基礎(chǔ) Wagstsuma Agar Base 用于副溶血性弧菌的溶血試驗(yàn) 250克
58939 60%/L氯化鈉蛋白胨肉湯 L Nac1 Peptone Water 副溶血性弧菌的前增菌培養(yǎng) 250克
58940 42℃生長(zhǎng)培養(yǎng)基 42℃ Growth Medium 副溶血弧菌42℃生長(zhǎng)試驗(yàn) 250克
58941 水解酪蛋白瓊脂 Casein Agar Medium 用于鑒別蠟樣芽孢桿菌分解酪蛋白試驗(yàn) 250克
58942 葡萄糖銨培養(yǎng)基 Ammonium Dextrose Medium 志賀氏菌的葡萄糖銨試驗(yàn) 250克
58943 葡萄糖半固體發(fā)酵管 Dextrose Semisolid Medium 用于志賀氏菌的生化試驗(yàn) 250克
58944 克氏雙糖鐵瓊脂 Kilgler Iron Agar 細(xì)菌復(fù)合生化試驗(yàn) 250克
58945 磷酸鹽葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基 Phosphate Glucose Peptone Water 用于甲基紅試驗(yàn) 250克
58946 KORSER氏檸檬酸鹽肉湯 Korser Citrate Sodium Broth 用于細(xì)菌的枸櫞酸鹽試驗(yàn) 100克
58947 結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂 VRBA 用于大腸菌群的檢驗(yàn) 250克
58948 SA瓊脂 Salmonella Arizona Agar 亞利桑那沙門(mén)氏菌的選擇性分離 250克
58949 疊氮鈉葡萄糖肉湯 Azide Dextrose Broth 鏈球菌、腸球菌、糞鏈球菌的增菌培養(yǎng) 250克
58950 KF鏈球菌瓊脂 KF Streptococcus Agar 鏈球菌的選擇性分離和計(jì)數(shù) 100克
58951 EVA肉湯 EVA Broth 用于鏈球菌的增菌培養(yǎng) 250克
58952 賴氨酸吲哚動(dòng)力培養(yǎng)基 LIM Medium 用于鏈球菌的分離培養(yǎng)；細(xì)菌的賴氨酸、吲哚和動(dòng)力復(fù)合生化試驗(yàn) 250克
58953 BETA-SSA瓊脂 BETA-SSA Agar 鏈球菌的選擇性分離培養(yǎng) 250克
58954 胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎(chǔ) Trypticase Soy Sheep Blood Agar Base 蠟樣芽孢桿菌的溶血測(cè)試驗(yàn) 250克
58955 改良V-P培養(yǎng)基 V-P Medium Modified 蠟樣芽孢桿菌的溶血試驗(yàn) 250克
58956 R2A瓊脂 R-2A Agar 飲用水中導(dǎo)生細(xì)菌分離培養(yǎng) 250克
58957 A1培養(yǎng)基 A1 Medium 檢測(cè)水中的大腸菌群 250克
58958 酵母提取物瓊脂 Yeast Extract Agar 水中細(xì)菌總數(shù)的檢測(cè) 250克
58959 乳糖蛋白胨肉湯 Lactose Peptone Broth 飲用水中總大腸菌群多管發(fā)酵法檢驗(yàn) 250克
58960 Cary-Blair氏* Cary-Blair Transfort Medium 運(yùn)送腸道致病菌標(biāo)本 250克
58961 MFC培養(yǎng)基 MFC Medium 飲用水中大腸菌群濾膜法檢驗(yàn) 250克
58962 亮綠乳糖培養(yǎng)基 Brilliant Green Lactose Medium 飲用天然礦泉水中大腸桿菌檢驗(yàn) 250克
58963 *吐溫80營(yíng)養(yǎng)瓊脂人抗*(AT)ELISA試劑盒 Lecithin Tween 80 Nutrient Agar 化妝品檢驗(yàn)中細(xì)菌計(jì)數(shù) 250克
58964 乙酰胺瓊脂 Acetamide Agar 綠膿桿菌的選擇性分離培養(yǎng) 250克
58965 SCDLP液體培養(yǎng)基 SCDLP Broth Medium 化妝品檢驗(yàn)中樣品制備、增菌 250克
58966 假單胞菌屬選擇瓊脂 Cetrimide Agar 用于綠膿桿菌的分離培養(yǎng) 250克

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)y以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人抗*(AT)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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