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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-03-05 18:08:27瀏覽次數(shù):263次
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人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
58868 LB營(yíng)養(yǎng)瓊脂 LB Nutrient Agar 用于發(fā)酵工程、基因工程和分子生物學(xué)中大腸桿菌的培養(yǎng) 250克
58869 LB Lennox肉湯 LB Lennox Broth 大腸桿菌增殖 250克
58870 LB Lennox瓊脂 LB Lennox Agar BR 250克
58871 匹克氏肉湯基礎(chǔ)A Pick,s Broth Base A 溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng) 250克
58872 匹克氏肉湯基礎(chǔ)B Pick,s Broth Base B 一次性使用衛(wèi)生用品中溶血性鏈球菌的檢驗(yàn) 250克
58873 改良番茄汁瓊脂 Tomato Juice Agar Modified 食品中乳酸菌總數(shù)測(cè)定 250克
58874 葡萄糖肉浸液肉湯 Dextrose Meat Infusion Broth 用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng) 250克
58875 馬鈴薯瓊脂 Potato Agar 霉菌、酵母菌的培養(yǎng)、鑒定 250克
58876 玉米粉瓊脂 Corn Meat Medium 真菌檢測(cè);霉菌產(chǎn)毒培養(yǎng) 250克
58877 TCBS瓊脂 TCBS Agar 用于霍亂、副溶弧菌的分離培養(yǎng) 250克
58878 SCPB基礎(chǔ) Sodium Chloride Polymyxin Broth Base 副溶血弧菌的選擇性增菌培養(yǎng) 250克
58879 半固體動(dòng)力培養(yǎng)基 Semi-Solid Agar 細(xì)菌動(dòng)力觀察,菌種保存,H抗原位相變異試驗(yàn)等 250克
58880 氯化鈉結(jié)晶紫增菌液 Sodium Chloride Violet Purple Enrichment Broth 副溶血弧菌的選擇性增菌培養(yǎng) 250克
58881 氯化鈉蔗糖瓊脂 Sodium Chloride Sucrose Agar 副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng) 250克
58882 嗜鹽菌選擇性瓊脂 Halophilic Bacteria Selective Agar 副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng) 250克
58883 3.5%氯化鈉三糖鐵瓊脂 3.5% NaC1 TSI Agar 副溶血弧菌生化試驗(yàn)鑒別 250克
58884 氯化鈉血瓊脂基礎(chǔ) Sodium Chloride Blood Agar Base 副溶血性弧菌的溶血試驗(yàn) 250克
58885 霍亂雙糖鐵瓊脂 Kligler Iron Agar 用于霍亂、副溶弧菌的分離培養(yǎng) 250克
58886 T1N1瓊脂 T1N1 Agar 霍亂弧菌的培養(yǎng) 250克
58887 T1N0肉湯 T1N0 Broth 霍亂弧菌的培養(yǎng) 250克
58888 T1N3肉湯 T1N3 Broth 霍亂弧菌的生長(zhǎng)試驗(yàn) 250克
58889 MCPC培養(yǎng)基 MCPC Medium 弧菌的分離培養(yǎng) 250克
58890 改良磷酸鹽緩沖液 PSB 用于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌冷增菌培養(yǎng) 250克
58891 耶爾森氏菌選擇性瓊脂 CIN Agar 分離小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌 250克
58892 改良Y培養(yǎng)基 Y Medium Modified 分離小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌 250克
58893 TTC肉湯 ITC Broth 分離培養(yǎng)耶爾森氏菌 250克
58894 麥芽汁培養(yǎng)基 Malt Extract Agar 用于啤酒酵母等真菌分離傳代 250克
58895 氯化鎂孔雀綠肉湯 MM,RV Medium 沙門氏菌的選擇性增菌培養(yǎng) 250克
58896 麥芽浸膏湯 Malt Extract Broth 酸性罐頭食品無菌試驗(yàn) 200克
58897 錳營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基 Manganese(II) Nutrient Agar 用于嗜熱需氧芽孢桿菌的檢驗(yàn) 250克
58898 結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡聚糖瓊脂 VRBDA 腸道菌計(jì)數(shù)和腸桿菌科鑒別 250克
58899 腸道菌增菌液 Enterobacteria Enrichment Broth 腸道菌的增菌培養(yǎng) 250克
58900 察氏培養(yǎng)基 Czapek Dox Agar 用于酵母菌的培養(yǎng) 250克
58901 高鹽察氏培養(yǎng)基 Salt Czapek Dox Agar 用于霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù) 250克
58902 察氏蛋白胨培養(yǎng)基 Czapek Dox Peptone Agar 酵母菌的培養(yǎng) 250克
58903 BS瓊脂 Bismuth Sulfite Agar 用于食品中沙門氏菌的檢驗(yàn) 250克
58904 膽鹽七葉苷疊氮鈉瓊脂 Bile Esculin Azide Agar 用于腸球菌的快速選擇性分離培養(yǎng)和計(jì)數(shù) 250克
58905 M-腸球菌瓊脂 M-Enerococcus Agar 用于濾膜法或直接平板法,從自來水、食品或其他標(biāo)本中分離腸球菌 250克
58906 緩沖蛋白胨水增菌液 BPW 沙門氏菌前增菌培養(yǎng)和李氏菌前增菌培養(yǎng) 250克
58907 *大豆酵母浸膏肉湯 TSYEB 用于單核細(xì)胞和李斯特菌增菌培養(yǎng) 250克
58908 *大豆酵母浸膏瓊脂 TSYEA 用于單核細(xì)胞和李斯特氏菌的分離培養(yǎng) 250克
58909 李氏菌增菌肉湯(LB1,LB2)基礎(chǔ) Listeria Enrichment Broth Base 李氏菌二步增菌 250克
58910 PALCAM瓊脂 PALCAM Agar 單增李氏菌的選擇性分離 250克
58911 OXA基礎(chǔ) Oxford Agar Base 單增李氏菌的選擇性分離 250克
58912 李氏LPM瓊脂 LPM Agar 單增李氏菌的選擇性分離 250克
58913 Half Fraser培養(yǎng)基 Half Fraser Medium 李氏菌的增菌培養(yǎng) 250克
58914 SIM培養(yǎng)基 Motility Test Medium(Semisolid) 李氏菌動(dòng)力觀察,H抗原位相變異試驗(yàn);硫化氫、動(dòng)力、吲哚試驗(yàn)人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA試劑盒 250克
58915 改良McBride瓊脂培養(yǎng)基 Modified Mcbride Agar Base 單增李氏菌選擇性分離 250克
58916 Fraser培養(yǎng)基 Fraser Medium 李氏菌的增菌培養(yǎng) 250克
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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