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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-16 04:52:56瀏覽次數(shù):150次
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人*脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人*脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人*脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
58764 *瓊脂 Gentamycin Agar 用于霍亂弧菌的分離培養(yǎng) 250克
58765 MH瓊脂 MHA 抗菌素藥物敏感性試驗 250克
58766 MH肉湯 MHB 用于抗菌素藥物敏感性試驗 250克
58767 抗生素1號培養(yǎng)基(PH6.5-6.6) Antibiotic Agar 磺卞*等的效價測定 250克
58768 抗生素1號培養(yǎng)基(PH7.8-8.0) Antibiotic Agar *、*、*、*、*、**、*等效價測定 250克
58769 抗生素2號培養(yǎng)基(PH6.5-6.6) Antibiotic Agar NO.2 四環(huán)素、*等的效價測定 250克
58770 抗生素2號培養(yǎng)基(PH7.8-8.0) Antibiotic Agar NO.2 *、*等的效價測定 250克
58771 抗生素3號培養(yǎng)基 Antibiotic Agar NO.3 藤黃八疊球菌懸液的制備 250克
58772 抗生素4號培養(yǎng)基 Antibiotic Agar NO.4 *等的效價測定 250克
58773 抗生素5號培養(yǎng)基 Antibiotic Agar NO.5 抗生素微生物的效價測定 250克
58774 抗生素6號培養(yǎng)基 Antibiotic Agar NO.6 黏菌素等的效價測定 250克
58775 抗生素7號培養(yǎng)基 Antibiotic Agar NO.7 頭孢噻圬鈉等的效價測定 250克
58776 抗生素8號培養(yǎng)基 Antibiotic Agar NO.8 去甲*的效價測定 250克
58777 標準平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基 SPCA 用于細菌總數(shù)的計數(shù) 250克
58778 平板計數(shù)瓊脂 PCA 食品細菌總數(shù)測定和平板計數(shù) 250克
58779 MIU培養(yǎng)基基礎(chǔ) MIU Medium Base 細菌的復(fù)合生化試驗 250克
58780 乙酸鉛培養(yǎng)基 Lead Acetate Medium 用于細菌的硫化氫試驗 250克
58781 EF-18瓊脂 EF-18 Agar 濾膜法檢測食品中沙門氏菌 250克
58782 LST肉湯 LST Broth 各種食品中大腸菌群zui近似值(MPN)測定 250克
58783 大腸桿菌檢驗肉湯 E.Coli Broth 糞大腸菌群、大腸桿菌的檢驗 250克
58784 mEC肉湯 mE.Coli Broth 用于大腸桿菌O157選擇性增菌 250克
58785 改良胰蛋白胨大豆肉湯 Modified Tryptic Soy Broth 大腸桿菌O157選擇性增菌 250克
58786 乳糖肉湯培養(yǎng)基 Lactose Broth Medium 用于食品中沙門氏菌檢驗前增菌;大腸菌群的增菌培養(yǎng) 250克
58787 BGLB肉湯 BGLB Broth 用于水樣中大腸菌的檢測 250克
58788 TSP肉湯基礎(chǔ) Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base 蠟樣芽孢桿菌的MPN值測定 250克
58789 溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基 BCP Glucase Peptone Water Medium 用于壓力蒸汽滅菌效果評價 250克
58790 胰酪胨大豆肉湯 TSB 一種通用的微生物營養(yǎng)增菌肉湯,也可用于*的MPN測定和生產(chǎn)線無菌灌裝試驗 250克
58791 *大豆瓊脂 TSA 用于生物制品的無菌試驗 250克
58792 胰胨大豆瓊脂斜面 Tryptic Soy Agar 培養(yǎng)副溶血性弧菌,做細胞色素氧化酶實驗 250克
58793 堿性蛋白胨水 AP 增殖霍亂弧菌及付霍亂弧菌 250克
58794 孟加拉紅培養(yǎng)基 Rose Bengal Agar 霉菌和酵母菌的總數(shù)測定 250克
58795 BiGGY瓊脂 BiGGY Agar 用于念珠菌的分離培養(yǎng) 250克
58796 氯硝胺孟加拉紅瓊脂 DRBC Agar 食品中霉菌及酵母菌的分離培養(yǎng) 250克
58797 WORT瓊脂 WORT Agar 用于真菌,特別是酵母菌的計數(shù)和增菌培養(yǎng) 250克
58798 WORT肉湯 WORT Broth 真菌和酵母菌的培養(yǎng) 250克
58799 Littman瓊脂 Littman Agar 真菌的分離培養(yǎng) 250克
58800 YM肉湯 YM Broth BR 250克
58801 *葡萄糖酵母粉瓊脂基礎(chǔ) OGY Agar 霉菌、酵母菌分離培養(yǎng)和計數(shù) 250克
58802 華倫斯坦實驗室營養(yǎng)瓊脂 WL Nutrient Agar 啤酒和發(fā)酵產(chǎn)品中酵母菌和細菌的計數(shù) 250克
58803 沙氏腦心浸液瓊脂 Sabouraud BHI Agar 真菌檢測 250克
58804 菌種培養(yǎng)基 Strain Medium(For B.Cerus) 四環(huán)素檢測中蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng) 250克
58805 四環(huán)素檢定瓊脂 Tetracyline Examination Agar 副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng) 250克
58806 葡萄糖胰酪胨瓊脂 Dextrose Tryptone Agar 嗜熱菌芽孢(需氧芽孢總數(shù)、平酸芽孢和厭氧芽孢)分離培養(yǎng) 250克
58807 MYP瓊脂基礎(chǔ) MYP agar base 蠟樣芽孢桿菌的固體平板計數(shù) 250克
58808 SPS瓊脂 SPS Agar 人*脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計數(shù) 250克
58809 改良MC乳酸菌瓊脂培養(yǎng)基 Chalmers Agar Modified 用于食品中乳酸菌總數(shù)的測定 250克
58810 MRS瓊脂 MRSA 用于食品中乳酸菌的培養(yǎng) 250克
58811 改良MRS瓊脂培養(yǎng)基 MRS Lactotacillus Agar Modified 乳酸菌的測定,雙歧桿菌和嗜酸乳酸菌的計數(shù) 250克
58812 UBA培養(yǎng)基 UBA Medium 啤酒中厭氧菌檢測 250克
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人*脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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