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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-02-08 03:58:46瀏覽次數(shù):159次
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人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
58715 產(chǎn)毒培養(yǎng)基 Toxin-Producing Medium 青霉、曲霉的產(chǎn)毒培養(yǎng) 250克
58716 葡萄球菌增菌肉湯 Staphylococcus Enrichment Broth 凝固酶陽生葡萄球菌選擇性增菌 250克
58717 貝爾德-帕克瓊脂 Baird Parker Agar 凝固酶陽生葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng) 250克
58718 CHAPMAN瓊脂 Baird Parker Agar 10 用于*的分離培養(yǎng) 250克
58719 卵黃*高鹽瓊脂基礎(chǔ) Egg-Yolk Mannitol Salt Agar Base *的分離培養(yǎng) 250克
58720 改良Giolitti-Cantobi肉湯 Modified Giolitti-Cantobi Broth 用于*的增菌培養(yǎng) 250克
58721 *鹽瓊脂 Mannitol Salt Aga *的選擇性分離培養(yǎng) 250克
58722 卵黃氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基 Egg-Yolk Salt Agar *的選擇性分離 250克
58723 LES ENDO瓊脂 Membrane Endo Agar LES 膜過濾水中大腸桿菌計(jì)數(shù) 250克
58724 Endo培養(yǎng)基 Endo Agar 大腸菌群的檢測(cè) 250克
58725 RVS肉湯 RVS Broth 食品中沙門氏菌檢驗(yàn)選擇性增菌 250克
58726 MKTTN肉湯 MKTTN Broth 食品中沙門氏菌檢驗(yàn)選擇性增菌 250克
58727 LIA瓊脂 Lysine Iron Agar 食品中沙門氏菌生化試驗(yàn) 250克
58728 動(dòng)力吲哚*培養(yǎng)基 MIO Medium 動(dòng)力、吲哚和*試驗(yàn) 250克
58729 D-E中和肉湯 E Neutralizing Broth 經(jīng)防腐劑或消毒劑處理的樣品增菌培養(yǎng) 250克
58730 D-E中性瓊脂 E Neutralizing Agar 衛(wèi)生環(huán)境中微生物的分離培養(yǎng), 消毒效果測(cè)定 250克
58731 M肉湯 M-Broth 牛奶和乳制品中乳酸菌檢測(cè)和增菌培養(yǎng) 250克
58732 BGS瓊脂 BGS Agar 沙門氏菌分離培養(yǎng) 250克
58733 XLD瓊脂培養(yǎng)基 Xylose Lysine Desoxycholate Medium 分離志賀氏菌屬和沙門氏菌 100克
58734 脫氧膽酸鈉枸櫞酸鹽瓊脂 Desoxycholate Citrate Agar 細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定和分離培養(yǎng),沙門氏菌分離培養(yǎng) 250克
58735 DCLS瓊脂 DCLS Agar 致病性腸桿菌的分離 250克
58736 Vogel-Johnson瓊脂 VJ Agar 病源標(biāo)本和其他標(biāo)本中*陽性*的選擇性分離 250克
58737 NAC瓊脂培養(yǎng)基 NAC Agar Medium 假單胞菌屬分離培養(yǎng) 100克
58738 PDA瓊脂 Potato Dextrose Agar 霉菌分離培養(yǎng)和霉菌酵母菌計(jì)數(shù) 250克
58739 亮綠瓊脂培養(yǎng)基 Brilliant Green Agar 沙門氏菌分離培養(yǎng) 250克
58740 梭菌培養(yǎng)基 Clostridium Enrichment Medium 用于梭菌增菌培養(yǎng) 250克
58741 哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基 Columbia Agar Medium 營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)基及溶血試驗(yàn),梭菌的檢測(cè) 250克
58742 哥倫比亞4-甲基傘形酮葡糖苷酸培養(yǎng)基 Columbia-MUG Medium 大腸桿菌的熒光檢測(cè) 250克
58743 安德雷德氏糖類肉湯 Andrade,s Carbohydrate Broth 細(xì)菌的糖發(fā)酵試驗(yàn) 250克
58744 OF培養(yǎng)基 HLGB 細(xì)菌的氧化發(fā)酵試驗(yàn) 250克
58745 EYA培養(yǎng)基基礎(chǔ) Egg Yolk Agar Medium Base 肉毒梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離培養(yǎng) 250克
58746 蠟樣芽孢桿菌動(dòng)力試驗(yàn) 250克
58747 強(qiáng)化梭菌鑒別瓊脂 DRCA 食品和其他物質(zhì)中梭菌的計(jì)數(shù)和培養(yǎng) 250克
58748 強(qiáng)化梭菌培養(yǎng)基 RCM 梭菌的增菌培養(yǎng)和計(jì)數(shù) 250克
58749 TBB培養(yǎng)基 Tybobutyricum Broth Base 乳酪產(chǎn)品中梭菌的計(jì)數(shù) 250克
58750 SCHAEDLER厭氧菌瓊脂 SCHAEDLER Agar 厭氧菌的分離培養(yǎng) 250克
58751 WILKINS-CHALGREN厭氧菌瓊脂 WILKINS-CHALGREN Agar 厭氧菌的分離培養(yǎng) 250克
58752 產(chǎn)氣莢膜梭菌瓊脂 MCP Agar 產(chǎn)氣莢膜梭菌的計(jì)數(shù)和培養(yǎng) 250克
58753 GAM瓊脂 Anaerobic Agar 用于梭菌和其他厭氧菌的分離培養(yǎng) 250克
58754 GAM肉湯 Anaerobic Broth 用于專性厭氧菌培養(yǎng) 250克
58755 乳糖-明膠培養(yǎng)基 Lactose-Gelatin Medium 產(chǎn)氣莢膜梭菌明膠液化試驗(yàn) 250克
58756 TSC瓊脂 TSC Agar 產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù) 250克
58757 PY培養(yǎng)基 PY Medium 產(chǎn)氣莢膜梭菌的培養(yǎng) 250克
58758 產(chǎn)芽孢肉湯 Sporulation Broth 產(chǎn)氣莢膜梭菌的產(chǎn)芽孢培養(yǎng) 250克
58759 Hektoen瓊脂培養(yǎng)基 Hektoen Enteric Agar 用于沙門氏菌屬和志賀菌屬的分離培養(yǎng) 250克
58760 克氏鐵瓊脂人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒 KIA 腸桿菌科的初步鑒定 100克
58761 脫氧膽酸鈉瓊脂 DCLA 大腸菌群的平板測(cè)定以及腸道菌的選擇性培養(yǎng) 250克
58762 中國藍(lán)瓊脂 China Blue Lactose Agar 弱選擇性培養(yǎng)基,腸道致病菌選擇分離 250克
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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