人低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

58412 UVM 添加劑1 UVM Supplement1 1ml*10支 添加到HB4195中，用于李氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)
58413 LM-137瓊脂 LM-137 Agar 250 用于膜濾法單增李氏菌選擇性分離（NEOGEN標(biāo)準(zhǔn)）
58414 UBA　培養(yǎng)基 UBA　Medium 250 用于啤酒中厭氧菌檢測
58415 NBB　培養(yǎng)基 NBB　Agar 250 用于啤酒中厭氧菌檢測
58416 Raka-Ray 培養(yǎng)基 Raka-Ray Medium 250 用于啤酒中乳酸菌檢測和分離培養(yǎng)
58417 SCDLP液體培養(yǎng)基   Soya Casein Digest Lecithin Polysorbate Broth 250 用于化妝品樣品制備，前增菌培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
58418 *吐溫80營養(yǎng)瓊脂   Lecithin Tween 80 Nutrient Agar 250 用于化妝品細(xì)菌總數(shù)測定（GB標(biāo)準(zhǔn)）
58419 乙酰胺瓊脂    Acetamide Agar 250 用于綠膿桿菌的選擇性分離培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
58420 十六烷*基*瓊脂   Cetrimide Agar 250 用于綠膿桿菌的選擇性分離培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
58421 *發(fā)酵培養(yǎng)基   Mannitol Medium 250 生化試驗(yàn)培養(yǎng)基，用于細(xì)菌（如*）*發(fā)酵試驗(yàn)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
58422 明膠培養(yǎng)基基礎(chǔ)   Gelatin Medium Base 250 生化試驗(yàn)培養(yǎng)基，用于細(xì)菌明膠液化試驗(yàn)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
58423 綠膿菌素測定培養(yǎng)基(PDP)    King Medium A  250 用于綠膿桿菌的綠膿菌素測定試驗(yàn)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
58424 乳糖膽鹽培養(yǎng)基    Lactose Bile Medium 250 用于化妝品中糞大腸菌群的測定（GB標(biāo)準(zhǔn)）
58425 TTC*-吐溫80-營養(yǎng)瓊脂    TTC Lecithin Tween80 Nutrient Agar 250 用于化妝品中細(xì)菌總數(shù)測定（GB標(biāo)準(zhǔn)）
58426 HC瓊脂基礎(chǔ) HC Agar Base 250 用于化妝品中霉菌總數(shù)測定(Acumedia 方法)
58427 改良LETHEEN瓊脂基礎(chǔ) LETHEEN AGAR BASE, MODIFIED 250 用于化妝品中微生物檢測(Acumedia 方法)
58428 TAT肉湯 TAT Broth 250 用于化妝品和微生物檢測(Acumedia方法)
58429 真菌培養(yǎng)基  Fungi Medium 250 用于生物制品霉菌無菌試驗(yàn)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
58430 YPD瓊脂   Yeast Peptone Dextrose Agar 250 用于測定酵母菌總數(shù)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
58431 抗生素檢定培養(yǎng)基1號(hào)（高PH）   Antibiotic Agar  250 用于*，*，*，*等效價(jià)測定
58432 抗生素檢定培養(yǎng)基1號(hào)（低PH）   Antibiotic Agar  250 用于磺芐*效價(jià)測定
58433 抗生素檢定培養(yǎng)基2號(hào)（高PH）   Antibiotic Agar No.2 250 用于*，*等效價(jià)測定
58434 玫瑰紅鈉瓊脂    Rose Bengal Medium 250 用于霉菌、酵母菌計(jì)數(shù)
58435 5%*    Broth Medium 250 細(xì)菌培養(yǎng)，滴眼劑*培養(yǎng)等
58436 肉湯瓊脂培養(yǎng)基    Broth Agar Medium 250 衛(wèi)生檢驗(yàn)，細(xì)菌數(shù)測定，無菌試驗(yàn)
58437 普通瓊脂斜面培養(yǎng)基(PH8.0-8.2)   250 分離培養(yǎng)霍亂弧菌，*檢定用
58438 酪胨瓊脂     Peptone from Casein Agar 250 用于生物制品無菌試驗(yàn)
58439 葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基   Dextrose Peptone Medium 250 用于生物制品無菌試驗(yàn)
58440 抗生素檢定培養(yǎng)基4號(hào)     Antibiotic Agar No.4 250 用于*等的效價(jià)測定
58441 抗生素檢定培養(yǎng)基6號(hào)     Antibiotic Agar No.6 250 用于粘菌素等的效價(jià)測定
58442 抗生素檢定培養(yǎng)基7號(hào)      Antibiotic Agar No.7 250 用于*鈉等的效價(jià)測定
58443 抗生素檢定培養(yǎng)基8號(hào)      Antibiotic Agar No.8 250 用于去甲*等的效價(jià)測定
58444 卵黃高鹽瓊脂基礎(chǔ)    Egg-Yolk Salt Agar Base 250 用于生物制品*選擇性分離
58445 抗生素5號(hào)   Antibiotic No.5 250 用于*檢定菌種培養(yǎng)
58446 MUG培養(yǎng)基    MUG Medium 100 用于大腸桿菌測定
58447 真菌瓊脂培養(yǎng)基    Fungi Agar Medium 250 用于無菌生長試驗(yàn)
58448 磷酸鹽葡萄糖胨水培養(yǎng)基   Phosphate Glucose Peptone Water Medium 250 用于甲基紅試驗(yàn)
58449 甲基紅指示劑盒 10ml*1 用于甲基紅試驗(yàn)配套試劑
58450 胰蛋白胨水培養(yǎng)基    Peptone Water Medium 250 用于靛基質(zhì)試驗(yàn)
58451 Kovacs氏靛基質(zhì)試劑盒    10ml*2 用于吲哚（靛基質(zhì)）試驗(yàn)配套試劑
58452 ASS 瓊脂 Antibiotic sulfonamide sensitivity-test agar 250 用于磺胺類靈敏度試驗(yàn)(WHO方法)
58453 AC肉湯 AC Broth 250 用于常見微生物增菌培養(yǎng)和不含防腐劑樣品的無菌試驗(yàn)(Alpha Biosciences方法)
58454 改良馬丁液體培養(yǎng)基    Martin Broth ,Modified 250 用于菌苗制造及生物制品霉菌無菌檢驗(yàn)
58455 改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基    Martin Agar Medium ,Modified 250 用于生物制品霉菌無菌檢驗(yàn)
58456 霉菌培養(yǎng)基 Mould Medium 250 用于生物制品霉菌無菌試驗(yàn)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
58457 營養(yǎng)瓊脂（NA）   Nutrient Agar 250 細(xì)菌總數(shù)測定，細(xì)菌傳代培養(yǎng)
58458 四號(hào)瓊脂基礎(chǔ)     人低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)ELISA試劑盒 No.4 Agar Base 250 用于霍亂弧菌的選擇性分離，后加亞碲酸鉀
58459 SS 瓊脂      Salmonella-Shigella Agar 250 選擇性培養(yǎng)基，用于沙門氏菌，志賀氏菌的選擇性分離
58460 伊紅美藍(lán)瓊脂（EMB）    Eosin-Methylene Blue Agar 250 弱選擇性培養(yǎng)基，用于腸道菌的選擇性分離

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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