人EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成酶抗體(EJ/GlyRS)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成酶抗體(EJ/GlyRS)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

58360 營(yíng)養(yǎng)瓊脂（NA） Nutrient Agar 250 細(xì)菌計(jì)數(shù)(GB標(biāo)準(zhǔn)),不含糖,可作血瓊脂基礎(chǔ),傳代用.也可用于消毒效果測(cè)定
58361 0.5%*    0.5% Dextrose Broth 250 用于環(huán)氧乙烷消毒和電離輻射消毒過程監(jiān)測(cè)指示菌（枯草桿菌黑色變種芽孢及短小桿菌芽孢）的培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
58362 溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基  Glucase Peptone Water Medium 250 用于壓力蒸氣消毒過程監(jiān)測(cè)指示菌（嗜熱脂肪桿菌芽孢）的培養(yǎng)及消毒效果測(cè)定
58363 液體沙氏培養(yǎng)基   Liquid Sabourand Medium 250 用于真菌、酵母菌增菌
58364 匹克氏肉湯基礎(chǔ)B     Pick’s Broth Base B 250 用于一次性使用衛(wèi)生用品中溶血性鏈球菌的檢驗(yàn)
58365 改良番茄汁培養(yǎng)基    Tomato Juice Agar,Modified 250 用于食品中乳酸菌總數(shù)測(cè)定
58366 改良MC培養(yǎng)基     Chalmers Agar ,Modified 250 用于食品中乳酸菌總數(shù)測(cè)定
58367 MRS 瓊脂基礎(chǔ) MRS Agar Base  250 用于食品中乳酸菌總數(shù)測(cè)定
58368 LBS 瓊脂 LBS　agar
58369 M17瓊脂 M17 Agar 250 用于牛奶和乳制品中乳酸菌檢測(cè)和分離培養(yǎng)(Merck方法)
58370 M17肉湯 M17 Broth 250 用于牛奶和乳制品中乳酸菌檢測(cè)和分離培養(yǎng)(Merck方法)
58371 乳酸桿菌選擇性瓊脂 Lactobacillus Selective Agar 250 用于乳酸菌檢測(cè)和分離培養(yǎng)(ACUMEDIA)
58372 APT 瓊脂 APT Agar 250 用于乳酸菌分離培養(yǎng)
58373 雙歧桿菌BS培養(yǎng)基 250 用于雙歧桿菌分離培養(yǎng)
58374 BL瓊脂培養(yǎng)基 BL medium 250 用于雙歧桿菌分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
58375 BBL瓊脂培養(yǎng)基 BBL medium 250 用于雙歧桿菌分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
58376 TPY瓊脂培養(yǎng)基 TPY medium 250 用于雙歧桿菌分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
58377 PYG 液體培養(yǎng)基基礎(chǔ) PYG Broth Base 250 用于雙歧桿菌增菌培養(yǎng)，使用時(shí)需加入氯化血紅素和*1(GB標(biāo)準(zhǔn))
58378 胰酪胨大豆酵母浸膏肉湯(TSB-YE)    Trypticase Soy-Yeast Extract Broth 250 用于單增李氏菌增菌培養(yǎng)（SN、GB標(biāo)準(zhǔn)）
58379 萘啶酮酸 10mg/支*5 每支添加于225ml HB4150、HB4192中（SN、GB標(biāo)準(zhǔn)）
58380 4.5mg*5 添加于225ml HB4160中制成LB1
58381 4.0mg*5 添加于225ml HB4160中制成LB1
58382 吖啶黃素 3.75mg/支*5 每支添加于225ml HB4150、HB4192中（SN、GB標(biāo)準(zhǔn)）
58383 2.7mg*5 添加于225ml HB4160中制成LB1
58384 5mg*5 添加于200ml HB4160中制成LB2
58385 胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂(TSA-YE)    Trypticase Soy-Yeast Extract Agar 250 用于單增李氏菌的分純，培養(yǎng)，可用于做7%羊血瓊脂（SN標(biāo)準(zhǔn)）
58386 李氏菌選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)(MMA)   Modified Mcbride Agar Base 250 用于單增李氏菌選擇性分離（SN標(biāo)準(zhǔn)）
58387 *  3mg/支*5 每支添加于 100ml HB4155
58388 糖發(fā)酵基礎(chǔ)肉湯    Bromcresol Purple Broth Base 250 適用于微生物檢驗(yàn)中各種糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)，無菌加入各種糖醇類物質(zhì)（SN標(biāo)準(zhǔn)）
58389 李氏菌增菌肉湯(LB1,LB2)基礎(chǔ)     Listeria Enrichment Broth Base 250 添加奈啶酮酸，吖啶黃素，即為L(zhǎng)B1，LB2，用于李氏菌二步增菌（GB標(biāo)準(zhǔn)）
58390 七葉苷培養(yǎng)基    Esculin Medium 10 生化試驗(yàn)培養(yǎng)基，用于細(xì)菌七葉苷利用試驗(yàn)（SN標(biāo)準(zhǔn)）
58391 半固體動(dòng)力培養(yǎng)基   Motility Test Medium(Semisolid) 250 用于動(dòng)力觀察，菌種保存，H抗原位相變異試驗(yàn)等（SN標(biāo)準(zhǔn)）
58392 牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)    Oxford Agar Base 250 用于單增李氏菌的選擇性分離
58393 * 2mg/支*5 添于100ml HB4171中
58394 溴甲酚紫葡萄糖肉湯    Bromcresol Purple Dextrose Broth 250 用于低酸性罐頭食品商業(yè)無菌檢驗(yàn)
58395 酸性肉湯  Acid Borth 250 用于酸性罐頭食品商業(yè)無菌檢驗(yàn)
58396 麥芽浸膏湯    Malt Extract Broth 200 用于酸性罐頭食品商業(yè)無菌檢驗(yàn)
58397 錳鹽營(yíng)養(yǎng)瓊脂   Mn2+Nutrient Agar 250 用于嗜熱需氧芽孢桿菌的檢驗(yàn)
58398 卵黃瓊脂基礎(chǔ)    Egg Yolk Agar Base 250 加入卵黃，用于厭氧梭狀芽孢桿菌的分離培養(yǎng)
58399 皰肉牛肉粒   Dried Meat Particle 100 加入皰肉基礎(chǔ)，配成皰肉培養(yǎng)基
58400 緩沖李氏菌增菌肉湯基礎(chǔ) Buffered Listeria Enrichment Broth 250 用于李氏菌的增菌培養(yǎng)(MercK標(biāo)準(zhǔn))
58401 緩沖李氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)添加劑 Buffered Listeria Enrichment Broth Supplement 1ml*5支 每支加入225ml緩沖李氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)中
58402 PALCAM 瓊脂 PALCAM Agar 250 用于單增李氏菌選擇性分離
58403 PALCAM添加劑 PALCAM Supplement 1mg/支*10 添加到HB4188中，用于李氏菌的選擇性分離培養(yǎng)
58404 LPM瓊脂 LPM Agar 250 用于單增李氏菌選擇性分離(加入七葉苷和檸檬酸鐵銨)（FDA標(biāo)準(zhǔn)）
58405 Half –Fraser 培養(yǎng)基 Half-Fraser Medium 250 用于李氏菌的增菌培養(yǎng)（MERCK標(biāo)準(zhǔn)）
58406 Half –Fraser 添加劑人EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成酶抗體(EJ/GlyRS)ELISA試劑盒 Half-Fraser Supplement 5ml*2 添加到HB4190中，用于李氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)
58407 改良緩沖蛋白胨水(MBP) Modified Buffered Peptone Water 250 用于單增李氏菌前增菌培養(yǎng)
58408 EB增菌液 EB Enrichment Broth 250 用于單增李氏菌選擇性增菌培養(yǎng)（SN標(biāo)準(zhǔn)）

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成酶抗體(EJ/GlyRS)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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