人β乳糖蛋白抗體IgG ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人β乳糖蛋白抗體IgG ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

58260 胰胨大豆瓊脂斜面（TSA）    Tryptic Soy Agar 250 培養(yǎng)副溶血性弧菌，做細(xì)胞色素氧化酶實(shí)驗(yàn)（SN標(biāo)準(zhǔn)）
58261 42℃生長(zhǎng)培養(yǎng)基        42℃growth Medium 250 用于副溶血性弧菌42℃生長(zhǎng)試驗(yàn)
58262 O/F培養(yǎng)基(HLGB)     O/F Medium 250 用于鑒別弧菌葡萄糖代謝類型（發(fā)酵型或氧化型）（SN標(biāo)準(zhǔn)）
58263 氯化鈉結(jié)晶紫增菌液     Sodium Chloride Violet purple Enrichment Broth 250 用于副溶血性弧菌的選擇性增菌培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
58264 氯化鈉蔗糖瓊脂     Sodium Chloride Sucrose Agar  250 用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
58265 嗜鹽菌選擇性瓊脂   Halophilic Bacteria Selective Agar 250 用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
58266 氯化鈉血瓊脂基礎(chǔ)    Sodium Chloride Blood Agar Base 250 用于副溶血性弧菌的溶血試驗(yàn)
58267 霍亂雙糖鐵瓊脂(KIA) 250 用于霍亂弧菌的生化試驗(yàn)（SN標(biāo)準(zhǔn)）
58268 T1N1 瓊脂        T1N1  Agar 250 用于霍亂弧菌的培養(yǎng)（SN標(biāo)準(zhǔn)）
58269 T1N0 肉湯         T1N0  Broth 250 用于霍亂弧菌的生長(zhǎng)試驗(yàn)（SN標(biāo)準(zhǔn)）
58270 T1N3 肉湯         T1N3  Broth 250 用于霍亂弧菌的生長(zhǎng)試驗(yàn)（SN標(biāo)準(zhǔn)）
58271 *葡萄糖斜面瓊脂     Arginine Dextrose Agar 100 用于霍亂弧菌的復(fù)合生化試驗(yàn)（SN標(biāo)準(zhǔn)）
58272 mCPC 培養(yǎng)基 mCPC Medium 250 用于弧菌分離培養(yǎng)(FDA標(biāo)準(zhǔn))
58273 mCPC培養(yǎng)基添加劑 mCPC Medium Supplement 1ml*5 每瓶添加于100ml mCPC培養(yǎng)基中
58274 副溶血性弧菌瓊脂 250 用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)
58275 副溶血性弧菌增菌液 250 用于副溶血性弧菌的增菌培養(yǎng)
58276 察氏瓊脂     Czapek Dox Agar 250 用于青霉、曲霉鑒定及保存菌種用
58277 產(chǎn)毒培養(yǎng)基     Toxin-Producing Medium 250 用于青霉、曲霉的產(chǎn)毒培養(yǎng)
58278 馬鈴薯葡萄糖瓊脂 (PDA)   Potato Dextrose Agar 250 用于霉菌、酵母菌計(jì)數(shù)(GB標(biāo)準(zhǔn))
58279 高鹽察氏瓊脂   Salt Czapek Dox Agar 250 用于霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)(GB標(biāo)準(zhǔn))
58280 沙氏瓊脂培養(yǎng)基    Sabouraud’s Agar 250 用于真菌檢測(cè)(GB標(biāo)準(zhǔn))
58281 玉米粉瓊脂   Corn Meat Medium 250 用于真菌培養(yǎng)
58282 孟加拉紅培養(yǎng)基    Rose Bengal Medium 250 用于食品中霉菌及酵母菌總數(shù)測(cè)定
58283 酵母粉葡萄糖*瓊脂 Yeast Extract Dextrose Chloramphenicol  Agar 250 用于食品中霉菌及酵母菌總數(shù)測(cè)定
58284 Candida Elective 瓊脂 Candida Elective Agar to Nickerson 250 用于食品中Candida及酵母菌總數(shù)測(cè)定(Merck方法)
58285 DTM培養(yǎng)基 DTM Medium 250 用于食品中真菌的培養(yǎng)(Merck方法)
58286 DRBC瓊脂 DRBC Agar 250 用于食品中霉菌及酵母菌分離培養(yǎng)
58287 WORT 瓊脂 Wort Agar 250 用于真菌,特別是酵母菌的計(jì)數(shù)和增菌培養(yǎng)(Merck方法)
58288 WORT 肉湯 Wort Broth 250 用于真菌,特別是酵母菌的培養(yǎng)(Merck方法)
58289 YGC瓊脂 YGC Agar 250 用于奶和奶制品中霉菌及酵母菌分離培養(yǎng)(ISO方法)
58290 改良綠色酵母菌和真菌肉湯 m-GREEN YEAST and FUNGI BROTH 250 用于飲料中真菌及酵母菌檢測(cè)(Acumedia方法)
58291 Littman 瓊脂 Littman Agar 250 用于真菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法)
58292 DG-18瓊脂 DICHLORANGLYCEROL (DG-18) AGAR  250 用于食品中霉菌和酵母菌分離培養(yǎng)(Acumedia方法)
58293 YM瓊脂 YM Agar 250 用于霉菌、酵母菌及耐酸菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法)
58294 YM11瓊脂 YM11 Agar 250 濾膜法用于霉菌、酵母菌的分離培養(yǎng)(NEOGEN方法)
58295 OGY瓊脂 OGY Agar 250 用于霉菌和酵母菌分離培養(yǎng)和計(jì)數(shù)(Merck方法)
58296 WL營(yíng)養(yǎng)瓊脂 WL Nutrient Agar 250 用于啤酒和發(fā)酵產(chǎn)品中酵母菌和細(xì)菌的計(jì)數(shù)
58297 改良沙氏瓊脂培養(yǎng)基    Sabouraud’s Agar，Modified 250 用于真菌檢測(cè)
58298 沙氏BHI瓊脂 Sabouraud BHI Agar 250 用于真菌檢測(cè)(Acumedia 方法)
58299 菌種培養(yǎng)基       Strain Medium(for B.Cereus) 250 用于四環(huán)素檢定中蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn))
58300 四環(huán)素檢定瓊脂     Tetracyline Examination Agar 250 用于四環(huán)素殘留的微生物學(xué)檢定(SN標(biāo)準(zhǔn))
58301 葡萄糖胰蛋白胨瓊脂 Glucose Tryptone Agar 250 用于嗜熱菌芽孢(需氧芽孢總數(shù)、平酸芽孢和厭氧芽孢)分離培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn))
58302 布氏瓊脂    Brucella Agar 250 用于彎曲桿菌分離(SN標(biāo)準(zhǔn))
58303 布氏肉湯    Brucella Broth 250 用于彎曲桿菌增菌肉湯和布氏瓊脂制備(SN標(biāo)準(zhǔn))
58304 改良Skirrow氏瓊脂基礎(chǔ)     Skirrow Agar Base,Modified 250 用于空腸彎曲菌的分離培養(yǎng)(SN 、GB標(biāo)準(zhǔn))
58305 改良Camp-BAP氏瓊脂基礎(chǔ) Camp-BAP Agar Base,Modified 250 用于彎曲桿菌選擇性分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
58306 TTC 瓊脂基礎(chǔ)          TTC Agar Base 250 用于彎曲桿菌的TTC試驗(yàn)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
58307 *培養(yǎng)基         Glycine Medium 250 用于彎曲桿菌*耐受性試驗(yàn)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
58308 快速硫化氫試驗(yàn)瓊脂     H2S Test Medium 250 用于彎曲桿菌的硫化氫試驗(yàn)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
58309 DNA酶甲基綠瓊脂基礎(chǔ)    Dnase Agar Base with Methyl Green 100 用于彎曲桿菌的DNA酶水解試驗(yàn)（GB標(biāo)準(zhǔn)）

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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