人抗肝可溶性抗原抗體(SLA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人抗肝可溶性抗原抗體(SLA)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

58210 SS 瓊脂     Salmonella Shigella Agar 250 用于沙門(mén)氏菌，志賀氏菌的選擇性分離培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
58211 亞利桑那菌瓊脂（SA）   Salmonella Arizona Agar 100 用于亞利桑那沙門(mén)氏菌的選擇性分離（SN標(biāo)準(zhǔn)）
58212 氯化鎂孔雀綠肉湯（MM，RV Medium）   Rappaport-Vassiliadis Mdeium 250 用于沙門(mén)氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
58213 HE 瓊脂（HE）   Hektoen Enteric Agar 250 用于沙門(mén)氏菌的選擇性分離培養(yǎng)(FDA標(biāo)準(zhǔn))
58214 賴(lài)氨酸脫羧酶培養(yǎng)基    Lysine-decarboxylase Test Broth 5 生化培養(yǎng)基，賴(lài)氨酸脫羧酶試驗(yàn)（GB、SN標(biāo)準(zhǔn)）
58215 尿素酶瓊脂基礎(chǔ)   Urease Agar Base  250 生化培養(yǎng)基，用于細(xì)菌脲酶檢測(cè)（GB、SN標(biāo)準(zhǔn)）
58216 40%尿素水       40%Urea Water 5ml*10 加入尿素酶瓊脂基礎(chǔ)
58217 V-P 半固體瓊脂    Voges-Proskauer Semisolid Agar 250 生化培養(yǎng)基，用于細(xì)菌V-P試驗(yàn)（SN標(biāo)準(zhǔn)）
58218 吲哚培養(yǎng)基       Indole Medium 10 生化培養(yǎng)基，用于細(xì)菌靛基質(zhì)試驗(yàn)，亦稱(chēng)*肉湯（SN標(biāo)準(zhǔn)）
58219 Kovacs氏靛基質(zhì)試劑盒 10ml*1 吲哚（靛基質(zhì)）試驗(yàn)配套試劑
58220 丙二酸鈉培養(yǎng)基    Malonate Broth 10 生化培養(yǎng)基，用于細(xì)菌丙二酸鹽利用試驗(yàn)（GB、SN標(biāo)準(zhǔn)）
58221 衛(wèi)矛醇半固體瓊脂     Dulcitol Semisolid Agar 10 生化培養(yǎng)基，用于細(xì)菌衛(wèi)予醇發(fā)酵試驗(yàn)（SN標(biāo)準(zhǔn)）
58222 GN 增菌液     Gram Negative Enrichment Broth 250 主要用于志賀氏菌的增菌培養(yǎng)，亦可用于沙門(mén)氏菌增菌培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
58223 XLD 培養(yǎng)基       Xylose Lysine Desoxycholate Medium 250 選擇性培養(yǎng)基，主要用于分離志賀氏菌屬，亦可用于分離沙門(mén)氏菌(FDA標(biāo)準(zhǔn))
58224 WS 瓊脂     WS Salmonella Agar 250 用于沙門(mén)氏菌的選擇性分離（GB標(biāo)準(zhǔn)）
58225 葡萄糖銨培養(yǎng)基　  Ammonium Dextrose Medium 250 用于志賀氏菌的葡萄糖銨試驗(yàn)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
58226 葡萄糖半固體培養(yǎng)基    Dextrose Semisolid Medium 250 用于志賀氏菌的復(fù)合生化試驗(yàn)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
58227 動(dòng)力-吲哚-尿素培養(yǎng)基基礎(chǔ)(MIU)  Motility Indol Urea Medium Base 250 用于細(xì)菌的復(fù)合生化試驗(yàn)
58228 醋酸鉛培養(yǎng)基   Lead Acetate Medium 250 用于硫化氫試驗(yàn)
58229 SIM培養(yǎng)基   Hydrogen Sulfide Indole Motility Medium 250 用于硫化氫、動(dòng)力、吲哚試驗(yàn)
58230 乳糖肉湯    Lactose Broth 250 用于食品中沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)前增菌
58231 EF-18 瓊脂 EF-18 Agar 250 用于濾膜法檢測(cè)食品中沙門(mén)氏菌(SN/T1059.1)
58232 新生霉素 Novobiocin Sodium Salt 1.5mg/支*5 使用前，每支加入100mlHB4153中
58233 RVS 肉湯 RVS Broth 250 用于食品中沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)選擇性增菌(ISO標(biāo)準(zhǔn))
58234 MKTTn 肉湯 MKTTn Broth 250 用于食品中沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)選擇性增菌(ISO標(biāo)準(zhǔn))
58235 賴(lài)氨酸鐵瓊脂(LIA) Lysine Iron Agar 250 用于食品中沙門(mén)氏菌生化試驗(yàn)(FDA標(biāo)準(zhǔn))
58236 改良MSRV培養(yǎng)基 MSRV Medium，Modified 250 用于沙門(mén)氏的分離培養(yǎng)(MERCK方法)
58237 SCCRAM肉湯 SCCRAM Broth 250 濾膜法食品中沙門(mén)氏菌前增菌(SN/T1059.1)
58238 BPL瓊脂 BPL Agar 250 用于食品中沙門(mén)氏菌選擇性分離培養(yǎng)(Merck方法)
58239 BPLS瓊脂 BPLS Agar 250 用于各種標(biāo)本中沙門(mén)氏菌選擇性分離培養(yǎng)(Merck方法)
58240 用于多種標(biāo)本中沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)選擇性分離培養(yǎng)(美國(guó)和歐洲檢測(cè)*方法)
58241 改良BPLS瓊脂 BPLS Agar，Modified 250 用于各種標(biāo)本中沙門(mén)氏菌選擇性分離培養(yǎng)(ISO標(biāo)準(zhǔn))
58242 MIO培養(yǎng)基 MIO Medium 250 用于動(dòng)力、吲哚和*試驗(yàn)(FDA方法)
58243 XLT4瓊脂 XLT4 Agar 250 用于食品中致病菌，特別是沙門(mén)氏菌分離培養(yǎng)(Merck方法)
58244 Ｄ/E中和肉湯 D/E Ｎeutralizing Broth 250 用于衛(wèi)生環(huán)境中微生物的分離培養(yǎng)(ACUMEDIA方法)
58245 Ｄ/E中和瓊脂 D/E Ｎeutralizing Agar 250 用于衛(wèi)生環(huán)境中微生物的分離培養(yǎng)(ACUMEDIA方法)
58246 M –肉湯 M-Broth 250 用于干燥食品和種子中沙門(mén)氏菌增菌培養(yǎng)(MERCK方法)
58247 煌綠瓊脂 Brilliant Green Agar 250 用于沙門(mén)氏菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法)
58248 煌綠黃胺嘧啶瓊脂 Brilliant Green Agar w/Sulfadiazine 250 用于沙門(mén)氏菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法)
58249 BGS 瓊脂 BGS Agar 250 用于沙門(mén)氏菌的分離培養(yǎng)(USDA-FSIS方法)
58250 堿性蛋白胨水     Alkaline Peptone Water 250 用于霍亂弧菌選擇性增菌培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn))
58251 TCBS瓊脂     Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose Agar 250 用于致病性弧菌的選擇性分離（GB、SN標(biāo)準(zhǔn)）
58252 氯化鈉*肉湯基礎(chǔ)(SCPB)     Sodium Chloride Polymyxin Broth Base 250 用于副溶血性弧菌選擇性增菌培養(yǎng)，用前應(yīng)無(wú)菌加入*（SN標(biāo)準(zhǔn)）
58253 *    2.5萬(wàn)單位/支*5 添加于100mlHB4131中
58254 *雙水解酶試驗(yàn)用培養(yǎng)基(AD) 5 生化培養(yǎng)基，用于弧菌的*試驗(yàn)
58255 *瓊脂      Gentamycin Agar 250 用于霍亂弧菌選擇性分離培養(yǎng)
58256 四號(hào)瓊脂基礎(chǔ) 人抗肝可溶性抗原抗體(SLA)ELISA試劑盒No.4 Agar Base 250 用于霍亂弧菌選擇性分離培養(yǎng)，滅菌冷至50℃加入亞碲酸鉀，倒平板
58257 我妻氏培養(yǎng)基基礎(chǔ)      Wagstsuma Agar Base 250 用于神奈川現(xiàn)象試驗(yàn)（SN標(biāo)準(zhǔn)）
58258 60%/L氯化鈉蛋白胨肉湯     60%/L NaCl Peptone Water 250 用于副溶血性弧菌的前增菌培養(yǎng)

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人抗肝可溶性抗原抗體(SLA)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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