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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-16 05:32:41瀏覽次數(shù):211次
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人抗Sc1-70抗體(Sc1-70-Ab)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人抗Sc1-70抗體(Sc1-70-Ab)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人抗Sc1-70抗體(Sc1-70-Ab)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
57806 Anti-TLR5/CD285 Toll樣受體5抗體 0.1ml
57807 Anti-TM 血栓調(diào)節(jié)蛋白抗體 0.2ml
57808 Anti-TmR2 膠質(zhì)細胞系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子受體β抗體 0.2ml
57809 anti-Tn-C 腱糖蛋白-C抗體 0.2ml
57810 Anti-TNF-α 鼠抗人腫瘤壞死因子-α單克隆抗體 0.2ml
57811 Anti-TNF-α 腫瘤壞死因子-α抗體 0.1ml
57812 Anti-TNF-β 腫瘤壞死因子-β抗體 0.1ml
57813 Anti-TPⅠ 拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗體 0.2ml
57814 Anti-DNA TPⅡα DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅱ抗體 0.2ml
57815 Anti-TPH *羥化酶抗體 0.2ml
57816 Anti-TPO 抗甲狀腺過氧化物酶抗體 0.1ml
57817 Anti-TRA16 睪丸激素受體相關(guān)蛋白16抗體 0.2ml
57818 Anti-TRADD 有死亡區(qū)的腫瘤壞死因子受體1相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
57819 Anti-TRAF1 腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1抗體 0.2ml
57820 Anti-TRAF2 腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子2抗體 0.2ml
57821 Anti-TRAF3/CD40bp CD40結(jié)合蛋白/CD40受體相關(guān)因子1抗體 0.1ml
57822 Anti-TRAF6 腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6抗體 0.2ml
57823 Anti-TRAIL/Apo2L 腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體/凋亡素2配體抗體 0.1ml
57824 Anti-Transthyretin 轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白抗體 0.2ml
57825 Anti-TRBF1 端粒體復(fù)制結(jié)合因子1抗體 1ml
57826 Anti-TRF1 端粒結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml
57827 Anti-TrK A *激酶A抗體 0.1ml
57828 Anti-TrK A.B.C *激酶A.B.C抗體 0.2ml
57829 Anti-Trk B *激酶B抗體 0.1ml
57830 Anti-Trk C *激酶C抗體 0.2ml
57831 Anti-Trop-2 Trop-2抗體 0.1ml
57832 Anti-TSARG3 生精細胞凋亡相關(guān)基因3抗體 0.2ml
57833 Anti-TSARG4 生精細胞凋亡相關(guān)基因4抗體 0.2ml
57834 Anti-TSGF 惡性腫瘤特異性生長因子抗體 0.1ml
57835 Anti-TSH 鼠抗人促甲狀腺素單克隆抗體 0.1ml
57836 Anti-TSHR 促甲狀腺素受體抗體 0.1ml
57837 Anti-TSLC1 肺癌腫瘤阻抑基因1抗體 0.2ml
57838 Anti-TSLP 淋巴細胞生成素-1抗體 0.1ml
57839 Anti-TTF-1 甲狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1/甲狀腺特異增強子結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
57840 Anti-TTF-2 甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-2抗體 0.1ml
57841 Anti-Tubulin-α 微管蛋白抗體 0.1ml
57842 Anti-Tubulin-γ 微管蛋白-γ抗體 0.1ml
57843 Anti-TY3H/TH *羥化酶抗體 0.1ml
57844 Anti-Tyrosinase *酶抗體 0.1ml
57845 Anti-Tβ10 *β10抗體 0.1ml
57846 Anti-UAT 尿酸鹽轉(zhuǎn)運子抗體 0.1ml
57847 Anti-VAP1 血管粘附蛋白1抗體 0.1ml
57848 Anti-VCAM-1/CD106 血管內(nèi)皮細胞粘附分子抗體 0.1ml
57849 Anti-VEGF 血管內(nèi)皮生長因子抗體 0.1ml
57850 Anti-VEGFR1/VEGF-R1/Flt-1 血管內(nèi)皮生長因子受體1抗體 0.1ml
57851 Anti-VEGFR2/VEGF-R2/Flk1 血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體 0.1ml
57852 Anti-VEGFR-3 血管內(nèi)皮細胞生長因子受體-3 0.1ml
57853 Anti-Vimentin 波形蛋白抗體 0.1ml
57854 Anti-VIP 血管活性腸肽抗體 0.1ml
57855 Anti-Visfatin-1/PBEF1 內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素/腹脂素/內(nèi)肥素 0.2ml
57856 Anti-Visfatin-1/PBEF1 hu、 mo、 rat、MK 內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素 0.1ml
57857 Anti-VSIG4 Antibody T淋巴細胞負調(diào)節(jié)蛋白之一抗體 0.2ml
57858 Anti-VTG 卵黃蛋白原抗體 0.2ml
57859 Anti-VWF 血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體 0.1ml
57860 Anti-WNK4 一種新的*/*激酶家族成員的基因WNK4抗體 0.2ml
57861 Anti-WWOX 包含氧化還原酶的WW域抗體 0.1ml
57862 Mouse Anti-YERSINIA PESTIS Monoclonal Antibody 鼠抗鼠疫F1蛋白/鼠疫耶爾森氏菌莢膜抗原F1單克隆抗體人抗Sc1-70抗體(Sc1-70-Ab)ELISA試劑盒 0.1ml
57863 anti-XIAP X-連鎖凋亡蛋白/性連鎖凋亡抑制蛋白抗體 0.2ml
57864 anti-XAF1 XIAP相關(guān)因子1抗體 0.2ml
57865 Anti-XRCC1 X射線修復(fù)交叉互補蛋白/細胞堿基切除修復(fù)基因抗體 0.1ml
57866 Anti-ZCWCC1 ZCWCC1抗體 0.2ml
57867 Anti-Z-DEVD-FMK CASPASE3凋亡抑制劑 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人抗Sc1-70抗體(Sc1-70-Ab)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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