小鼠白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒質(zhì)量保證
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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-10 17:57:44瀏覽次數(shù):266次
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人晶體蛋白β(Cryβ)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人晶體蛋白β(Cryβ)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人晶體蛋白β(Cryβ)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
57436 Anti-IL-17 白介素-17抗體 0.1ml
57437 Anti-IL-18/IGIF 白細胞介素-18/干擾素γ誘導(dǎo)因子抗體 0.1ml
57438 Anti-IL1RAPL1 白介素受體相關(guān)蛋白樣1前體蛋白抗體 0.2ml
57439 Anti-IL-1α 白介素1α抗體 0.2ml
57440 Anti-IL-1β 白介素1β抗體 0.1ml
57441 Anti-IL-2 白介素2抗體 0.1ml
57442 Anti-IL-2 鼠抗人白細胞介素-2抗體 0.2ml
57443 Anti-IL-23 白介素-23抗體 0.1ml
57444 Anti-IL-4 白介素4抗體 0.1ml
57445 Anti-IL-6 Human 白介素6 0.1ml
57446 Anti-IL-6 mouse、rat 白介素6抗體 0.1ml
57447 Anti-IL-8rat mouse 白介素8抗體 0.1ml
57448 Anti-ILK-1 整合素連接激酶-1抗體 0.1ml
57449 anti-ING1/p33 生長抑制因子基因1抗體 0.2ml
57450 Anti-Inhibin α 抑制素α抗體 0.1ml
57451 Anti-Insulin Receptor-α 胰島素受體-α抗體 0.1ml
57452 Anti-Insulin 胰島素1-51蛋白抗體 0.1ml
57453 Anti-Integrin α3β1 整合素α3β1抗體 0.1ml
57454 Anti-Integrin α4β7/LPAM-1 整合素α4β7抗體 0.1ml
57455 anti-Integrin avb3 整合素avb3抗體 0.1ml
57456 Anti-Integrin αE2/CD103 整合素αE2抗體 0.1ml
57457 Anti-IQGAP1 支架蛋白抗體 1mg
57458 Anti-IRS P53 胰島素受體底物p53蛋白抗體 0.1ml
57459 Anti-IRS-1 胰島素受體底物-1抗體 0.2ml
57460 Anti-IRS-2 胰島素受體底物-2抗體 0.1ml
57461 Anti-IRS-3 胰島素受體底物-3抗體 0.2ml
57462 Anti-IRS-4 胰島素受體底物-4抗體 0.2ml
57463 Anti-ISR 胰島素受體抗體 0.1ml
57464 Anti-ISR-β 胰島素受體-β抗體 0.2ml
57465 Anti-ITG-α/ CD49d 整合素α4抗體 0.1ml
57466 Anti-ITG-β1/CD29 粘附分子整合素β1抗體 0.1ml
57467 Anti-ITG-α5/CD49e 粘附分子整合素α5抗體 0.2ml
57468 Anti-ITG-β3/CD61 整合素-β3抗體 0.1ml
57469 Anti-JNK1/3 c-Jun氨基末端激酶1/3抗體 0.2ml
57470 Anti-KATPC ATP敏感性鉀通道蛋白抗體 0.2ml
57471 Anti-Ki-67 Ki-67 Antigen抗體 0.1ml
57472 Anti-Kiss-1 腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因抗體 0.1ml
57473 Anti-Klf4 腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白抗體 0.1ml
57474 Anti-KLH 血藍蛋白抗體 0.1ml
57475 Anti-κOR kappa型阿片受體抗體 1ml
57476 Anti-K-ras 原癌基因K-ras抗體 0.1ml
57477 Anti-Laminin alpha5 層粘蛋白α5抗體 0.1ml
57478 Anti-L-Citrulline 抗L-瓜氨酸抗體 0.5ml
57479 Anti-LDL-R 低密度脂蛋白受體抗體 0.1ml
57480 Anti-Leptin 瘦素抗體 0.2ml
57481 Anti-Leptin receptor 瘦素受體抗體 0.2ml
57482 Anti-Lgr5/GPR49 腸上皮干細胞蛋白抗體 0.1ml
57483 Anti-LH 鼠抗人促黃體生成素抗體 0.1ml
57484 Anti-L-HDC L-*脫羧酶抗體 hu, mo, rat, bov, dog, pig, chi 0.1ml
57485 Anti-LHRH/GNRH 黃體激素釋放激素抗體/*釋放激素抗體 0.1ml
57486 Anti-LIF 白血病抑制因子抗體 0.1ml
57487 Anti-Lingo-1 Nogo受體作用蛋白抗體 0.2ml
57488 Anti-Livin 一種新的凋亡抑制蛋白抗體 0.1ml
57489 anti-LFABP/FABP-1 肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
57490 Anti-LN 層粘連蛋白抗體 0.2ml
57491 Anti-Lpin1 protein Lpin1 抗體 0.1ml
57492 Anti-LRP/MVP 人晶體蛋白β(Cryβ)ELISA試劑盒 肺耐藥相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
57493 Anti-LRRK2 帕金森氏病致病基因/神經(jīng)系統(tǒng)新功能基因抗體 0.2ml
57494 Anti-Lumbrokinase 抗蚯蚓纖溶酶抗體/抗*抗體 0.1ml
57495 Anti-Lysozyme *抗體 0.1ml
57496 anti-LYVE-1 淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)酸受體抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人晶體蛋白β(Cryβ)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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