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人抗組蛋白抗體（AHA）ELISA試劑盒

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人抗組蛋白抗體(AHA)ELISA試劑盒，ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人抗組蛋白抗體(AHA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人抗組蛋白抗體(AHA)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

57312 anti-GABAB1   抗g-氨基丁酸B1受體抗體 0.2ml
57313 anti-GABAB2   抗g-氨基丁酸B2受體抗體 0.1ml
57314 Anti-GAD-65    *脫羧酶-65抗體 0.1ml
57315 Anti-GAD-67    *脫羧酶-67抗體 0.1ml
57316 Anti-Galanin   神經(jīng)節(jié)肽抗體“甘丙肽" 0.2ml
57317 Anti-Galectin-3   半乳糖凝集素-3抗體 0.1ml
57318 Anti-GAP-43    神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白-43 0.1ml
57319 Anti-GAPDH    3-磷酸甘油醛脫氫酶 0.1ml
57320 Anti-GASR   G蛋白偶聯(lián)受體-2抗體 0.1ml
57321 Anti-Gastrin   胃泌素/蛙皮素抗體 0.1ml
57322 Anti-Gax   生長(zhǎng)終止特異性同源盒基因抗體 0.2ml
57323 Anti-GCS    *半*γ合成酶抗體 0.1ml
57324 anti-G-CSF   粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子抗體 0.1ml
57325 anti-GDF-8   肌細(xì)胞生長(zhǎng)抑制素抗體 0.2ml
57326 Anti-GDNF    膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抗體 0.1ml
57327 Anti-Gelsolin   凝溶膠蛋白抗體 0.2ml
57328 Anti-GFAP   膠質(zhì)纖維酸性蛋白抗體 0.1ml
57329 Anti-GFP    綠色熒光蛋白 0.2ml
57330 Anti-GFRA4   GDNF家族受體α-4抗體 0.2ml
57331 Anti-GFRα-1/GDNF   GDNF家族受體α-1抗體 0.1ml
57332 Anti-GHR    生長(zhǎng)激素受體抗體 0.1ml
57333 Anti-Ghrelin   腦腸肽抗體 0.1ml
57334 Anti-GHRF/GHRH   生長(zhǎng)激素釋放激素因抗體 0.1ml
57335 Anti-GIP    胃泌素抑制肽抗體 0.2ml
57336 Anti-GITR    糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)腫瘤壞死因子受體抗體 0.1ml
57337 Anti-Glasses Snake poison Protein   抗眼鏡蛇蛇毒蛋白抗體 0.2ml
57338 Anti-GLI1   下游轉(zhuǎn)錄因子Gli1蛋白抗體 0.2ml
57339 Anti-GLP-1   胰高血糖素樣肽-1抗體 0.1ml
57340 Anti-GLP-2   胰高血糖素樣肽-2抗體 0.2ml
57341 Anti-GLUT1   葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 0.1ml
57342 Anti-GLUT2   葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 0.1ml
57343 Anti-GLUT3   葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3抗體 0.2ml
57344 Anti-GLUT4   葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4抗體 0.1ml
57345 Anti-Glycoprotein  [Rubella virus]   風(fēng)疹病毒糖蛋白抗體 0.2ml
57346 Anti-GPA33   結(jié)腸癌抗原糖蛋白A33抗體 0.2ml
57347 Anti-GPC3   磷脂?；嫉鞍拙厶?3抗體 0.1ml
57348 Anti-GR    糖皮質(zhì)激素受體抗體 0.1ml
57349 Anti-GRK1    G蛋白偶合受體激酶1抗體 0.2ml
57350 Anti-GRK2    G蛋白偶合受體激酶2抗體 0.2ml
57351 Anti-GRM2    代謝型*受體2 0.2ml
57352 Anti-GRM3    代謝型*受體3 0.2ml
57353 Anti-GRM5    代謝型*受體5 0.2ml
57354 Anti-GRP   促胃泌素釋放肽抗體 0.1ml
57355 Anti-GRP78   葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78抗體 0.2ml
57356 Anti-GRP94    葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白94抗體 0.1ml
57357 Anti-GSK-3β    糖原合酶激酶-3β抗體 0.1ml
57358 Anti-GTP-CH-1   三磷酸鳥(niǎo)苷環(huán)水解酶抗體 0.2ml
57359 Anti-H5N1-M2   H5N1流感病毒M2型抗體 0.2ml
57360 Anti-Haase   透明質(zhì)酸酶/*抗體 0.2ml
57361 anti-HA tag   HA tag標(biāo)簽抗體 0.1ml
57362 Anti-HAI-1    肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子激活物抑制因子抗體 0.2ml
57363 Anti-HBA1   人類血紅蛋白α1抗體 0.1ml
57364 Anti-HRCAg/HBV    鼠抗人乙型肝炎表面抗原抗體 0.1ml
57365 Anti-HBV/pre S1/S2 protein   抗乙肝病毒pre S1/乙肝病毒pre S2抗體 0.1ml
57366 Anti-β-HCG 鼠抗人β亞基人絨毛膜*單抗 0.1ml
57367 Anti-HCCR-1   人宮頸癌基因/bri3結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
57368 Anti-α -HCG α ）   鼠抗人α 亞基人絨毛膜*單抗 0.1ml
57369 Anti-HCV-Core   人抗組蛋白抗體(AHA)ELISA試劑盒丙型肝炎病毒-C區(qū)抗體 0.1ml
57370 Anti-HCV-HCBP1/ACY-3   丙型肝炎病毒核心蛋白結(jié)合蛋白-1抗體 0.1ml
57371 Anti-HCV-NS1   丙型肝炎病毒-NS1抗體 0.2ml
57372 Anti-HCV-NS3   丙型肝炎病毒-NS3抗體 0.2ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人抗組蛋白抗體(AHA)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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