人抗眼肌抗體(EMAb)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人抗眼肌抗體(EMAb)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

57056 Anti-BTG2/TIS21   B細(xì)胞遷移基因2抗體  0.1ml
57057 Anti-BTK   鼠抗人非受體型*激酶BTK單克隆抗體  0.1ml
57058 Anti-C5a   過(guò)敏毒素C5a抗體  0.2ml
57059 Anti-CA125   卵巢癌抗原抗體  0.1ml
57060 Anti-CA15-3   乳腺癌相關(guān)抗原抗體  0.1ml
57061 Anti-CAD/CPAN  Caspase  激活的脫氧核糖核酸酶抗體  0.2ml
57062 Anti-Calcineurin α /PP-2B alpha 1   蛋白磷酸酯酶-2B催化亞單位抗體  0.1ml
57063 Anti-Calpain 1   鈣蛋白酶抗體  0.1ml
57064 Anti-Calponin 1   鈣調(diào)節(jié)蛋白-1抗體  0.2ml
57065 Anti-CaMK2a   鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗體  0.2ml
57066 Anti-CaMK2b  鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2b抗體  0.2ml
57067 Anti-CAS    細(xì)胞凋亡敏感性基因  0.1ml
57068 Anti-Caspase-1    天冬氨酸-*特異性蛋白酶家族抗體  0.2ml
57069 Anti-Caspase-10   半胱胺酸蛋白酶-10抗體  0.1ml
57070 Anti-Caspase-12   半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體  0.1ml
57071 Anti-Caspase-13   半胱胺酸蛋白酶蛋白-13抗體  0.1ml
57072 Anti-Caspase-3/CPP32/SCA-1   半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗體  0.1ml
57073 Anti-Caspase-6    半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體  0.1ml
57074 Anti-Caspase-8    半*蛋白酶8抗體  0.1ml
57075 Anti-Caspase-9   白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體  0.1ml
57076 Anti-β-catenin/β-cats   β-連環(huán)蛋白抗體  0.1ml
57077 Anti-NAIF1 protein   核凋亡誘導(dǎo)因子蛋白1  0.2ml
57078 Anti-CBFA1/RUNX2    成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體  0.1ml
57079 Anti-CCK8   膽囊收縮素抗體/縮膽囊素抗體  0.1ml
57080 Anti-CCP    兔抗瓜氨酸環(huán)肽抗體  0.1ml
57081 Anti-CCR-1   CC趨化因子受體1抗體  0.2ml
57082 Anti-CCR-2/5   CC趨化因子受體2/5抗體  0.2ml
57083 anti-CCR5/RANTES   CC趨化因子受體5/依賴激活T細(xì)胞分泌調(diào)節(jié)蛋白  0.2ml
57084 Anti-CCR-3   CC趨化因子受體3抗體  0.2ml
57085 Anti-CCR-4   CC趨化因子受體4抗體  0.2ml
57086 Anti-CCR-7    CC趨化因子受體7抗體  0.1ml
57087 Anti-CD10   鼠抗人CD10單克隆抗體  0.1ml
57088 Anti-CD10/CALLA    CD10抗體  0.1ml
57089 Anti-CD105/Endoglin/TGF-β receptor   CD105/轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體抗體  0.1ml
57090 Anti-CD117/c-kit/SCFR  干細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體/細(xì)胞表面分化抗原抗體  0.1ml
57091 Anti-CD133 antigen  造血干細(xì)胞抗原CD133抗體  0.1ml
57092 anti-Syndecan-1/CD138  多配體聚糖抗體  0.1ml
57093 Anti-CD14   CD14抗體  0.1ml
57094 anti-CD28   CD28抗體  0.1ml
57095 Anti-CD144/VECD    上皮型鈣粘附分子/血管內(nèi)皮鈣粘蛋白抗體  0.1ml
57096 Anti-CD147/EMMPRIN   單核-巨噬細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶抗體  0.1ml
57097 anti-CD166/ALCAM   活化白細(xì)胞粘附分子抗體  0.2ml
57098 anti-ED-1   單核/巨噬細(xì)胞表面特異性標(biāo)志抗原抗體  0.1ml
57099 Anti-CD167a/DDR1   CD167a抗體  0.1ml
57100 Anti-CD169/Siglec-1/sialoadhesin   CD169抗體  0.1ml
57101 Anti-CD17   CD17抗體  0.1ml
57102 Anti-CD18/LFA-1   白細(xì)胞粘附蛋白抗體  0.2ml
57103 Anti-CD184/CXC-R4   細(xì)胞表面趨化因子受體4抗體  0.1ml
57104 Anti-CD19    CD19抗體  0.2ml
57105 Anti-CD20   CD20抗體  0.1ml
57106 Anti-CD24   CD24抗體  0.1ml
57107 Anti-CD25/IL-2RA   CD25/白介素2-受體抗體  0.1ml
57108 Anti-CD272/BTLA   B和T淋巴細(xì)胞衰減蛋白抗體  0.1ml
57109 Anti-CD2AP    白細(xì)胞分化抗原CD2AP抗體  0.1ml
57110 Anti-CD3   鼠抗人CD3單克隆抗體  0.1ml
57111 Anti-CD31   血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1抗體  0.1ml
57112 Anti-CD34   CD34抗體  0.1ml
57113 Anti-CD36   CD36抗體 人抗眼肌抗體(EMAb)ELISA試劑盒 0.1ml
57114 Anti-CD4   鼠抗人CD4單克隆抗體  0.2ml
57115 anti-CD40L   抗CD40L抗體  0.1ml
57116 Anti-CD44   CD44抗體  0.1ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人抗眼肌抗體(EMAb)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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