人抗IgA抗體(anti-IgA-Ab)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人抗IgA抗體(anti-IgA-Ab)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

56600 Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Cy7  Cy7標記的兔抗人IgG F(ab')2   0.1ml
56601 Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/PE  PE標記的兔抗人IgG F(ab')2   0.1ml
56602 Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/PE-Cy3  PE-Cy3標記的兔抗人IgG F(ab')2   0.1ml
56603 Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/PE-CY5  PE-CY5標記的兔抗人IgG F(ab')2   0.1ml
56604 Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/APC  APC標記的兔抗人IgG F(ab')2   0.1ml
56605 Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的兔抗人IgG F(ab')2   0.1ml
56606 Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的兔抗人IgG F(ab')2   0.1ml
56607 Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的兔抗人IgG F(ab')2   0.1ml
56608 Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標記的兔抗人IgG F(ab')2   0.1ml
56609 Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的兔抗人IgG F(ab')2   0.1ml
56610 Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/PE-Cy7  PE-Cy7標記的兔抗人IgG F(ab')2   0.1ml
56611 Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Bio  *標記的兔抗人IgG F(ab')2   0.1ml
56612 Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/HRP  辣根過氧化物酶標記的兔抗人IgG F(ab')2   0.1ml
56613 Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/HRP  辣根過氧化物酶標記的兔抗小鼠IgG-Fc  0.1ml
56614 Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/PE-Cy3  PE-Cy3標記的兔抗小鼠IgG-Fc  0.1ml
56615 Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/PE-CY5  PE-CY5標記的兔抗小鼠IgG-Fc  0.1ml
56616 Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/APC  APC標記的兔抗小鼠IgG-Fc  0.1ml
56617 Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的兔抗小鼠IgG-Fc  0.1ml
56618 Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的兔抗小鼠IgG-Fc  0.1ml
56619 Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的兔抗小鼠IgG-Fc  0.1ml
56620 Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標記的兔抗小鼠IgG-Fc  0.1ml
56621 Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的兔抗小鼠IgG-Fc  0.1ml
56622 Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/PE-Cy7  PE-Cy7標記的兔抗小鼠IgG-Fc  0.1ml
56623 Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/AP  堿性磷酸酶（AP）標記的兔抗小鼠IgG-Fc  0.1ml
56624 Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Gold  膠體金標記的兔抗小鼠IgG-Fc  0.5ml
56625 Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Cy3  Cy3標記的兔抗小鼠IgG-Fc  0.1ml
56626 Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Cy5  Cy5標記的兔抗小鼠IgG-Fc  0.1ml
56627 Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Cy5.5  Cy5.5標記的兔抗小鼠IgG-Fc  0.1ml
56628 Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Cy7  Cy7標記的兔抗小鼠IgG-Fc  0.1ml
56629 Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/PE  PE標記的兔抗小鼠IgG-Fc  0.1ml
56630 Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/FITC  FITC標記的兔抗小鼠IgG-Fc  0.1ml
56631 Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/RBITC  羅丹明標記的兔抗小鼠IgG-Fc  0.1ml
56632 Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Bio  *標記的兔抗小鼠IgG-Fc  0.1ml
56633 Rabbit Anti-Monkey IgG/RBITC  羅丹明標記的兔抗猴IgG  0.3ml
56634 Rabbit Anti-Monkey IgG/FITC  FITC標記的兔抗猴IgG  0.3ml
56635 Rabbit Anti-Monkey IgG/HRP  辣根過氧化物酶標記的兔抗猴IgG  0.1ml
56636 Rabbit Anti-Monkey IgG/Gold  膠體金標記的兔抗猴IgG  2ml
56637 Rabbit Anti-Monkey IgG/AP  堿性磷酸酶（AP）標記的兔抗猴IgG  0.1ml
56638 Rabbit Anti-Monkey IgG/Bio  *標記的兔抗猴IgG  0.1ml
56639 Rabbit Anti-Monkey IgG/Cy3  Cy3標記的兔抗猴IgG  0.1ml
56640 Rabbit Anti-Monkey IgG/Cy5  Cy5標記的兔抗猴IgG  0.1ml
56641 Rabbit Anti-Monkey IgG/Cy5.5  Cy5.5標記的兔抗猴IgG  0.1ml
56642 Rabbit Anti-Monkey IgG/Cy7  Cy7標記的兔抗猴IgG  0.1ml
56643 Rabbit Anti-Monkey IgG/PE  PE標記的兔抗猴IgG  0.1ml
56644 Rabbit Anti-Monkey IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標記的兔抗猴IgG  0.1ml
56645 Rabbit Anti-Monkey IgG/PE-CY5  PE-CY5標記的兔抗猴IgG  0.1ml
56646 Rabbit Anti-Monkey IgG/APC  APC標記的兔抗猴IgG  0.1ml
56647 Rabbit Anti-Monkey IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的兔抗猴IgG  0.1ml
56648 Rabbit Anti-Monkey IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的兔抗猴IgG  0.1ml
56649 Rabbit Anti-Monkey IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的兔抗猴IgG  0.1ml
56650 Rabbit Anti-Monkey IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標記的兔抗猴IgG  0.1ml
56651 Rabbit Anti-Monkey IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的兔抗猴IgG  0.1ml
56652 Rabbit Anti-Monkey IgG/PE-Cy7  PE-Cy7標記的兔抗猴IgG  0.1ml
56653 Rabbit Anti-Monkey IgM/Cy3人抗IgA抗體(anti-IgA-Ab)ELISA試劑盒  Cy3標記的兔抗猴IgM  0.1ml
56654 Rabbit Anti-MK IgM/Cy5  Cy5標記的兔抗猴IgM  0.1ml
56655 Rabbit Anti-MK IgM/Cy5.5  Cy5.5標記的兔抗猴IgM  0.1ml

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導致非特異性結(jié)合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。 
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人抗IgA抗體(anti-IgA-Ab)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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