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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-01-23 23:34:01瀏覽次數(shù):186次
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人抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
55543 TNFAIP1 腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白1抗體 0.1ml
55544 TNFSF13/CD256/APRIL 腫瘤壞死因子配體超家族成員13抗體 0.2ml
55545 TNFSF14 腫瘤壞死因子配體超家族成員14抗體 0.1ml
55546 TNFSF15/TL1A 腫瘤壞死因子配體超家族成員15抗體 0.2ml
55547 TNFAIP3 腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白3抗體 0.2ml
55548 Acetyl-p53(K382) 乙酰化P53(Lys382)抗體 0.1ml
55549 TNFSF18 腫瘤壞死因子配體超家族成員18抗體 0.1ml
55550 TNFRSF14/HVEM 腫瘤壞死因子受體超家族成員14抗體 0.2ml
55551 TNFRSF13B 腫瘤壞死因子受體超家族成員13B抗體 0.2ml
55552 TNK1 非受體型*蛋白激酶Tnk1抗體 0.1ml
55553 Phospho-TNK1 (Tyr277) 磷酸化非受體型*蛋白激酶Tnk1抗體 0.1ml
55554 TM9SF1 跨膜蛋白超家族9-1抗體 0.1ml
55555 TMEM166 跨膜蛋白166抗體 0.2ml
55556 *mt 線粒體DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗體 0.1ml
55557 TOP2 alpha DNA拓普西異構(gòu)酶ⅡA抗體 0.1ml
55558 TOPO II/TOPO II Alpha DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅱ抗體 0.1ml
55559 phospho-TOPO II Alpha (Ser1106) 磷酸化DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅱ抗體 0.1ml
55560 TPH/Trptophan Hydroxylase *羥化酶抗體 0.2ml
55561 phospho-TPH(Ser260) 磷酸化*羥化酶抗體 0.1ml
55562 phospho-TPH(Ser19) 磷酸化*羥化酶抗體 0.1ml
55563 TPO 甲狀腺過氧化物酶抗體 0.2ml
55564 TRA16 睪丸激素受體相關(guān)蛋白16抗體 0.1ml
55565 TRA16 睪丸激素孤兒受體相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
55566 TRADD 腫瘤壞死因子受體1相關(guān)死亡域蛋白抗體 0.1ml
55567 phospho-TRADD(Ser299) 磷酸化腫瘤壞死因子受體1相關(guān)死亡域蛋白抗體 0.1ml
55568 phospho-TRADD(Ser269) 磷酸化腫瘤壞死因子受體1相關(guān)死亡域蛋白抗體 0.1ml
55569 phospho-TRADD(Ser274) 磷酸化腫瘤壞死因子受體1相關(guān)死亡域蛋白抗體 0.1ml
55570 TRAF1 腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1抗體 0.2ml
55571 TNFR2/TRAF2/CD120b 腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子2抗體 0.1ml
55572 TRAF3/CD40bp 腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白3抗體 0.1ml
55573 TRAF4/CART 1 腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白4抗體 0.1ml
55574 TRAF6 腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6抗體 0.1ml
55575 TRAIL 腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體抗體 0.1ml
55576 Transthyretin 轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白抗體 0.1ml
55577 Transaldolase 1 轉(zhuǎn)醛醇酶抗體 0.2ml
55578 Triosephosphate isomerase 磷酸丙糖異構(gòu)酶抗體 0.2ml
55579 TRBF1/TRF1 端粒體復(fù)制結(jié)合因子1抗體 0.1ml
55580 TREM1 髓系細(xì)胞觸發(fā)受體1抗體 0.2ml
55581 TREM2 髓系細(xì)胞觸發(fā)受體2抗體 0.1ml
55582 TREML1/TLT1 髓系細(xì)胞觸發(fā)受體樣轉(zhuǎn)錄因子1抗體 0.2ml
55583 TREML2/TLT2 髓系細(xì)胞觸發(fā)受體樣轉(zhuǎn)錄因子2抗體 0.2ml
55584 Ferritin 鐵蛋白抗體 0.2ml
55585 Transferrin 轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體 0.1ml
55586 Transferrin(1F10) 轉(zhuǎn)鐵蛋白單克隆抗體 0.1ml
55587 TRF2 端粒結(jié)合蛋白2抗體 0.1ml
55588 omerase Binding Protein, P23 端粒酶結(jié)合蛋白P23抗體 0.1ml
55589 phospho-p23 (Ser113) 磷酸化端粒酶結(jié)合蛋白P23抗體 0.1ml
55590 TRIM32 TRIM32抗體 0.1ml
55591 TrK A/NTRK1 *激酶A抗體 0.1ml
55592 Phospho-TrkA (Tyr490)/TrkB (Tyr516) 磷酸化*激酶A抗體 0.1ml
55593 Phospho-TrkA (Tyr674/675)/TrkB (Tyr706/707) 磷酸化*激酶A抗體 0.1ml
55594 Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816) 磷酸化*激酶A抗體 0.1ml
55595 Trk A/B/C 人抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒*激酶A/B/C抗體 0.1ml
55596 Trk B/NTRK2 *激酶B抗體 0.1ml
55597 Trk B/NTRK2 *激酶B抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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