人抗淋巴細(xì)胞毒抗體(ALA/LCA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人抗淋巴細(xì)胞毒抗體(ALA/LCA)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

55422 Phospho-TAK1(Ser192)  磷酸化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激酶1  0.1ml
55423 MAP3K7IP1/TAB1  轉(zhuǎn)化生長因子β活化激酶結(jié)合蛋白1抗體  0.1ml
55424 phospho-MAP3K7IP1(Ser423)  磷酸化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激酶結(jié)合蛋白1抗體  0.1ml
55425 phospho-MAP3K7IP1(Thr431)  磷酸化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激酶結(jié)合蛋白1抗體  0.1ml
55426 Tap1/ABCB2  ATP結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)因子1抗體  0.2ml
55427 TAP2/ABCB3  ATP結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)因子2抗體  0.2ml
55428 SELS  炎癥負(fù)調(diào)控因子蛋白抗體  0.1ml
55429 TANK  TANK抗體  0.1ml
55430 Phospho-TBK1/NAK (Ser172)  磷酸化NF-κB活化激酶抗體  0.1ml
55431 Tat  細(xì)胞*轉(zhuǎn)氨酶抗體  0.2ml
55432 Tau protein  微管相關(guān)蛋白抗體  0.1ml
55433 TRH  促甲狀腺素釋放激素抗體  0.1ml
55434 Tau protein  微管相關(guān)蛋白抗體  0.1ml
55435 phospho-Tau protein(Thr489)  磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體  0.1ml
55436 phospho-Tau protein(Ser396)  磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體  0.1ml
55437 phospho-Tau protein(Ser422)  磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體  0.1ml
55438 phospho-Tau protein(Ser262)  磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體  0.1ml
55439 phospho-Tau protein(Ser404)  磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體  0.1ml
55440 phospho-Tau protein(Thr231)  磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體  0.1ml
55441 phospho-Tau protein(Ser721)  磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體  0.1ml
55442 phospho-Tau protein(Ser214)  磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體  0.1ml
55443 phospho-Tau protein(Ser199)  磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體  0.1ml
55444 phospho-Tau protein(Ser235)  磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體  0.1ml
55445 phospho-Tau protein(Thr212)  磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體  0.1ml
55446 phospho-Tau protein(Thr205)  磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體  0.1ml
55447 phospho-Tau protein(Ser356)  磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體  0.1ml
55448 phospho-Tau protein(Ser416)  磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體  0.1ml
55449 MAP2/MAP-2a.b.c  微管相關(guān)蛋白2抗體  0.1ml
55450 Phospho-MAP2(Ser136)  磷酸化微管相關(guān)蛋白2抗體  0.1ml
55451 Phospho-MAP2 (Thr1620/1623)  磷酸化微管相關(guān)蛋白2抗體  0.1ml
55452 MAP1A  微管相關(guān)蛋白1A抗體  0.1ml
55453 Talin  踝蛋白抗體  0.1ml
55454 Phospho-Talin (Ser425)  磷酸化踝蛋白抗體  0.1ml
55455 TBX2/T-box2  新型抑癌基因抗體  0.2ml
55456 TBX3  轉(zhuǎn)錄因子Tbx3抗體  0.2ml
55457 Tbx21/T-bet  T細(xì)胞介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子Tbx21抗體  0.1ml
55458 TBX18  轉(zhuǎn)錄因子Tbx18抗體  0.2ml
55459 TCEB3/Elongin A  轉(zhuǎn)錄延伸因子3抗體  0.1m
55460 Elongin B/TCEB2  轉(zhuǎn)錄延伸因子B2抗體  0.1ml
55461 TCF7L2  轉(zhuǎn)錄因子7類似物2抗體  0.1ml
55462 TCTP  翻譯控制腫瘤蛋白抗體  0.1ml
55463 Phospho-TCTP(Ser46)  磷酸化翻譯控制腫瘤蛋白抗體  0.1ml
55464 TDP-43  Tar DNA 結(jié)合蛋白43抗體  0.1ml
55465 PHLDA1/TDAG51  T淋巴細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白TDAG51抗體  0.1ml
55466 TEM1/CD248  內(nèi)涎蛋白/內(nèi)皮唾液酸蛋白抗體  0.2ml
55467 ANTXR1/TEM8  腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)志物8抗體  0.1ml
55468 phospho-ANTXR1(Tyr382)  磷酸化腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)志物8抗體  0.1ml
55469 TERT  端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶抗體  0.1ml
55470 phospho-TERT(Ser1125)  磷酸化端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶抗體  0.1ml
55471 TTX(5E7)  河豚毒素抗體  1ml
55472 TTX(5E7)  河豚毒素單克隆抗體  1ml
55473 TEP1  端粒酶相關(guān)蛋白1抗體  0.2ml
55474 Tetraspan 5  四分子交聯(lián)體5抗體  0.1ml
55475 TFEB  T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子TFEB抗體  0.1ml
55476 TFF2  三葉肽因子2抗體  0.1ml
55477 TFF3  三葉肽因子3抗體  0.1ml
55478 TIF1 Alpha/TRIM24  轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1α抗體  0.2ml
55479 TIF1 beta/KAP1/TRIM28  轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β抗體  0.1ml
55480 Phospho-TIF1 beta(Ser824)  磷酸化轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β抗體  0.1ml
55481 TIF1 gamma/Trim33  轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1γ抗體  0.2ml
55482 TFPI/LACI  組織因子途徑抑制劑抗體人抗淋巴細(xì)胞毒抗體(ALA/LCA)ELISA試劑盒  0.1ml
55483 TFPI-2  組織因子途徑抑制劑-2抗體  0.1ml
55484 TGF alpha  轉(zhuǎn)移生長因子α抗體  0.1ml
55485 TGF Beta 1  轉(zhuǎn)化生長因子β1抗體  0.1ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。
5人抗淋巴細(xì)胞毒抗體(ALA/LCA)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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