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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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人抗染色體抗體(anti-chromosome Ab)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人抗染色體抗體(anti-chromosome Ab)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人抗染色體抗體(anti-chromosome Ab)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
55144 S100-A9/MRP14/CFAG/Calgranulin B S100A9抗體 0.1ml
55145 S100A11 S100鈣結(jié)合蛋白A11抗體 0.1ml
55146 Shrimp tropomyosin 南美白對(duì)蝦過敏原蛋白(蝦原肌球蛋白)抗體 0.1ml
55147 S100P S100鈣結(jié)合蛋白P抗體 0.1ml
55148 SYP p38/Synaptophysin/SAP-1 突觸素抗體/突觸相關(guān)蛋白-1 0.1ml
55149 SARS putative orflab polyprotein 冠狀病毒抗體 0.2ml
55150 SARS S-protein 抗冠狀病毒表面S蛋白抗體 0.1ml
55151 SAHH S腺苷L-同型半*水解酶 0.2ml
55152 SATB1 核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml
55153 Phospho-SATB1 (Ser47) 磷酸化核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml
55154 Sca1/Ly6A/E T淋巴細(xì)胞激活蛋白抗體 0.2ml
55155 SCD1 固醇酰*脫氫酶1抗體 0.1ml
55156 SCF 干細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗體 0.1ml
55157 SCG3/SgIII 分泌粒蛋白3抗體 0.1ml
55158 SCN1A SCN1A抗體 0.1ml
55159 SPINK1/SPINK3 腫瘤相關(guān)*抑制劑1抗體 0.1ml
55160 SPINK1/SPINK3 腫瘤相關(guān)*抑制劑1抗體 0.2ml
55161 SCN2A SCN2A抗體 0.1ml
55162 SCN9A/NAV1.7 電壓開啟的鈉離子通道SCN9A抗體 0.1ml
55163 SCP2/NLTP 固醇攜帶蛋白2抗體 0.2ml
55164 SCP3 聯(lián)會(huì)復(fù)合體蛋白3抗體 0.1ml
55165 SCYLV 甘蔗SCYLV抗體 1ml
55166 SDF-1/CXCL12 基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1抗體 0.1ml
55167 CXCL14 CXC趨化因子14抗體 0.2ml
55168 Phospho-Aurora B(Thr232)/Aurora C(Thr198) 磷酸化有絲分裂激酶B/C抗體 0.1ml
55169 Phospho-Aurora A(Thr288) 磷酸化有絲分裂激酶A抗體 0.1ml
55170 CXCL16 CXC趨化因子16抗體 0.1ml
55171 Secretin 分泌素抗體 0.1ml
55172 SCAP/SREBF chaperone protein 固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白裂解激活蛋白抗體 0.2ml
55173 Secretin receptor 分泌素受體抗體 0.2ml
55174 SEL1L SEL1L抗體 0.1ml
55175 Selenoprotein W 硒蛋白W抗體 0.1ml
55176 Sema3A 臂板蛋白3A抗體 0.1ml
55177 Semaphorin 3B 導(dǎo)向蛋白3B抗體 0.2ml
55178 Sema3F 臂板蛋白3F抗體 0.1ml
55179 Sema4C/SEMA5A 臂板蛋白4C抗體 0.1ml
55180 Sema6A Sema6A抗體 0.1ml
55181 Sema7A/CD108 軸突生長(zhǎng)因子CD108抗體 0.2ml
55182 SENP3 類泛素蛋白3抗體 0.2ml
55183 SFRP1 分泌型卷曲相關(guān)蛋白1抗體 0.1ml
55184 CD109 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
55185 SGCB/SGC 肌聚多糖-β抗體 0.1ml
55186 SGLT1/GLT 1 鈉-糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1抗體 0.1ml
55187 Phospho-SGK1 (Ser78) 磷酸化糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶1抗體 0.1ml
55188 Phospho-SGK1 (Ser422) 磷酸化糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶1抗體 0.1ml
55189 Phospho-SGK1 (Thr256) 磷酸化糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶1抗體 0.1ml
55190 SH2D2A 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
55191 SHANK 1 富含*突觸相關(guān)蛋白SHANK1抗體 0.1ml
55192 Shadow/shadow of prion protein 新朊蛋白抗體 0.2ml
55193 Shadow/shadow of prion protein(CT) 新朊蛋白抗體(C端) 0.2ml
55194 SHBG 性激素結(jié)合球蛋白抗體 0.1ml
55195 SHC SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體人抗染色體抗體(anti-chromosome Ab)ELISA試劑盒 0.2ml
55196 phospho-SHC(Ser36) 磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體 0.1ml
55197 phospho-SHC(Tyr349) 磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人抗染色體抗體(anti-chromosome Ab)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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