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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-24 00:15:57瀏覽次數(shù):190次
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人抗腮腺管抗體(anti-parotid duct Ab)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人抗腮腺管抗體(anti-parotid duct Ab)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人抗腮腺管抗體(anti-parotid duct Ab)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
54976 PGF2 α 前列腺素F2a抗體 0.2ml
54977 PSD93 突觸后密度蛋白93抗體 0.2ml
54978 Phospho-PSD93 (Tyr340) 磷酸化突觸后密度蛋白93抗體 0.1ml
54979 PSD95 突觸后密度蛋白95抗體 0.1ml
54980 Phospho-PSD95 (Tyr236/Tyr240) 磷酸化突觸后密度蛋白95抗體 0.1ml
54981 PSGL-1/CD162 P選擇素糖蛋白配體1抗體 0.1ml
54982 PSMD9 蛋白酶調(diào)解因子9抗體 0.2ml
54983 PSMD10/Proteasome 26S S10 蛋白酶調(diào)解因子10抗體 0.2ml
54984 LMP2 低分子質(zhì)量蛋白2抗體 0.1ml
54985 LMP7 低分子量蛋白酶體7抗體 0.2ml
54986 P-selectin/CD62p P選擇素抗體 0.1ml
54987 L-Selectin/CD62L L選擇素抗體 0.1ml
54988 E-Selectin/CD62E E選擇素抗體 0.1ml
54989 Patched/PTCH Patched/PTCH抗體 0.1ml
54990 CD63/MLA1 黑色素瘤相關(guān)抗原抗體 0.1ml
54991 CD64/IGFR1 免疫球蛋白G Fc段受體I 0.1ml
54992 CD66a/CEACAM1 癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子1抗體 0.2ml
54993 Contactin 3 腦源性免疫球蛋白超家族蛋白3抗體 0.1ml
54994 PTEN/MMAC1(NT) 一種腫瘤抑制基因抗體(N端) 0.1ml
54995 PTEN/MMAC1(CT) 一種腫瘤抑制基因抗體(C端) 0.1ml
54996 Phospho-PTEN(Ser380) 磷酸化腫瘤抑制基因PTEN抗體 0.1ml
54997 Phospho-PTEN(Ser380/Thr382/Thr383) 磷酸化腫瘤抑制基因PTEN抗體 0.1ml
54998 PGE2 前列腺素E2抗體 0.1ml
54999 Phospho-PTEN(Ser385) 磷酸化腫瘤抑制基因PTEN抗體 0.1ml
55000 PTGEs 前列腺素E合成酶抗體 0.1ml
55001 PTHrP/PTHLH 甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
55002 PTN/Pleiotrophin 多效生長因子抗體 0.1ml
55003 PTP/PTPase/CD148 蛋白*磷酸酶CD148抗體 0.2ml
55004 PTPRA *磷酸酶α抗體 0.2ml
55005 PTP1B 蛋白*磷酸酶-1B 0.1ml
55006 MOSP/PTPMT1 線粒體蛋白*磷酸酶1抗體 0.1ml
55007 Parvalbumin 細(xì)小清蛋白抗體 0.2ml
55008 Securin/PTTG 垂體腫瘤轉(zhuǎn)化基因抗體 0.1ml
55009 PXR 孤兒核受體PAR1抗體 0.2ml
55010 PITX3 炎癥因子3抗體(穿透素) 0.2ml
55011 PYGL 肝糖原磷酸化酶抗體 0.2ml
55012 PYGM 肌肉糖原磷酸化酶抗體 0.2ml
55013 Peptide YY/PYY 酪酪肽抗體 0.2ml
55014 Rad17/RFC 細(xì)胞周期檢控Rad17蛋白抗體(復(fù)制因子C) 0.1ml
55015 Phospho-Rad17 (Ser645) 磷酸化細(xì)胞周期檢控Rad17蛋白抗體 0.1ml
55016 Rab24 ras基因相關(guān)蛋白Rab24抗體 0.2ml
55017 phospho-Rab24(Ser95) 磷酸化ras基因相關(guān)蛋白Rab24抗體 0.1ml
55018 phospho-Rab24(Tyr17) 磷酸化ras基因相關(guān)蛋白Rab24抗體 0.1ml
55019 Rad51 Rad51抗體 0.1ml
55020 Rad52 Rad52抗體 0.1ml
55021 phospho-RAD51(Tyr315) 磷酸化Rad51抗體 0.1ml
55022 RAD51C 乳腺癌和卵巢癌易感基因RAD51C抗體 0.2ml
55023 RAE1 mRNA結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
55024 Radixin 根蛋白抗體 0.1ml
55025 Raptor mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體 0.2ml
55026 Phospho-Raptor (Ser792) 磷酸化mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體 0.1ml
55027 RAP1A 抗Rap1A抗體 人抗腮腺管抗體(anti-parotid duct Ab)ELISA試劑盒 0.1ml
55028 ALDH1 乙醛脫氫酶1型抗體 0.2ml
55029 ALDH2/ALDHI 乙醛脫氫酶2抗體 0.2ml
55030 RALDH2 *脫氫酶2型抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人抗腮腺管抗體(anti-parotid duct Ab)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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