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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-01-13 21:30:27瀏覽次數(shù):286次
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人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體(MCV)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體(MCV)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體(MCV)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
54866 Plexin A2 神經(jīng)叢蛋白A2抗體 0.1ml
54867 Plexin B1 神經(jīng)叢蛋白B1抗體 0.1ml
54868 Plectin 網(wǎng)蛋白抗體 0.2ml
54869 PLGF/PIGF (human) 胎盤生長(zhǎng)相關(guān)抗體(人) 0.1ml
54870 PLGF/PIGF (mouse, rat, pig) 胎盤生長(zhǎng)因子抗體(小鼠、大鼠、豬) 0.1ml
54871 PLGF 胎盤生長(zhǎng)因子抗體 0.1ml
54872 PLK1 */*蛋白激酶Plk1抗體 0.1ml
54873 Phospho-PLK1(Thr210) 磷酸化絲/*蛋白激酶Plk1抗體 0.1ml
54874 Phospho-PLK1 (Ser137) 磷酸化絲/*蛋白激酶Plk1抗體 0.1ml
54875 Phospho-PLK1(Ser482+Ser486+Ser490) 磷酸化絲/*蛋白激酶Plk1抗體 0.1ml
54876 PML/TRIM19 早幼粒細(xì)胞白血病蛋白抗體 0.2ml
54877 PMP22 外周髓鞘蛋白-22抗體 0.1ml
54878 PMS2 腫瘤錯(cuò)配修復(fù)基因PMS2抗體 0.1ml
54879 PNAT/NAT2 N-乙酰基轉(zhuǎn)移酶2抗體 0.1ml
54880 PNK1/PNKP 多聚合苷酸激酶3磷酸化酶抗體 0.2ml
54881 Phospho-PNK1 (Ser114/Thr118) 磷酸化多聚合苷酸激酶3磷酸化酶抗體 0.1ml
54882 PNMT 苯乙醇胺甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 0.2ml
54883 PNPO 磷酸吡哆醇氧化酶抗體 0.2ml
54884 Podoplanin Protein/gp36 平足蛋白抗體(淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白) 0.1ml
54885 Pokemon 撲克蒙蛋白抗體 0.1ml
54886 Polycystin 1 多囊腎蛋白1抗體 0.2ml
54887 Polycystin 2 多囊腎蛋白2抗體 0.2ml
54888 PON1 芳香酯酶1(對(duì)氧磷酶)抗體 0.1ml
54889 PP-1B 蛋白磷酸酯酶-1B抗體 0.1ml
54890 PP1A/PP2CA/PPP1CA 蛋白磷酸酶2Cα抗體 0.2ml
54891 phospho-PP1A/PP2CA (Thr320) 磷酸化蛋白磷酸酶2Cα抗體 0.1ml
54892 PP1C gamma 蛋白磷酸酶γ1抗體 0.1ml
54893 PP2A alpha/beta 蛋白質(zhì)磷酸酶-2A抗體 0.1ml
54894 PP2CA/PPM1A 蛋白磷酸酶2C亞型α抗體 0.1ml
54895 phospho-PPM1A(Ser375) 磷酸化蛋白磷酸酶2C亞型α抗體 0.1ml
54896 PP2Ac/PP4C 磷酸酯酶-2Ac抗體 0.1ml
54897 PPAR-delta/beta D型-過氧化酶活化增生受體抗體 0.1ml
54898 PPAR alpha α型-過氧化酶活化增生受體抗體 0.1ml
54899 phospho-PPAR alpha(Ser12) 磷酸化α型-過氧化酶活化增生受體抗體 0.1ml
54900 PPAR gamma 過氧化酶活化增生受體γ抗體 0.2ml
54901 Phospho-PPAR Gamma (ser112) 磷酸化過氧化酶活化增生受體γ抗體 0.1ml
54902 PPIA/Cyclophilin A 親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIA抗體 0.1ml
54903 PPIB/Cyclophilin B 親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIB抗體 0.2ml
54904 PPIG 親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIG抗體 0.2ml
54905 Phospho-PPIG (Ser376) 磷酸化親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIG抗體 0.2ml
54906 PPIL1 親環(huán)素相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
54907 AKT/PKB 蛋白激酶B 0.1ml
54908 phospho-AKT/PKB(Ser473) 磷酸化蛋白激酶B抗體 0.1ml
54909 phospho-Akt(Thr308) 磷酸化蛋白激酶B抗體 0.1ml
54910 phospho-AKT1/AKT2(Thr308+Thr309) 磷酸化蛋白激酶B抗體 0.1ml
54911 phospho-AKT1(Ser129) 磷酸化蛋白激酶B抗體 0.1ml
54912 phospho-Akt(Thr450) 磷酸化蛋白激酶B抗體 0.1ml
54913 Phospho-HDAC4(Ser246)/HDAC5(Ser259)/HDAC7(Ser155) 磷酸化組蛋白去乙?;?/5/7抗體 0.1ml
54914 Phospho-HDAC4(Ser632)/HDAC5(Ser498)/HDAC7(Ser486) 磷酸化組蛋白去乙酰化酶4/5/7抗體 0.1ml
54915 hnRNP K 異質(zhì)核糖核蛋白K抗體 0.2ml
54916 phospho-AKT1(Thr34) 磷酸化蛋白激酶B抗體 0.1ml
54917 Seladin 1/DHCR24 24脫氫*還原酶抗體 0.2ml
54918 PKN2 蛋白激酶N2抗體人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體(MCV)ELISA試劑盒 0.1ml
54919 RKIP/PBP 磷脂酰乙醇胺結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml
54920 EIF2AK2/PKR 蛋白激酶R抗體 0.1ml
54921 Phospho-PKR (Thr446) 磷酸化蛋白激酶R抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體(MCV)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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