人抗胃壁細(xì)胞抗體(AGPA/PCA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人抗胃壁細(xì)胞抗體(AGPA/PCA)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

54746 Phospho-PDPK1(Tyr9)  磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體  0.1ml
54747 Phospho-PDPK1(Ser396)  磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體  0.1ml
54748 Phospho-PDPK1(Ser410)  磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體  0.1ml
54749 Pdk4  丙酮酸脫氫酶激酶4抗體  0.1ml
54750 PDLIM1  細(xì)胞骨架蛋白C端PDLIM1抗體  0.2ml
54751 PDX1  胰島素促進(jìn)因子抗體（胰十二指腸同源異型盒蛋白）  0.1ml
54752 PEA3  瘤促活化因子3抗體  0.2ml
54753 Pectinesterase  果膠酶抗體  1ml
54754 PEA15  星形膠質(zhì)細(xì)胞PEA15抗體  0.2ml
54755 Phospho-PEA15 (Ser104)  磷酸化星形膠質(zhì)細(xì)胞PEA15抗體  0.1ml
54756 Phospho-PEA15(Ser116)  磷酸化星形膠質(zhì)細(xì)胞PEA15抗體  0.1ml
54757 PEDF/SERPINF1  色素上皮源性因子抗體  0.1ml
54758 PEG10  肝癌高表達(dá)基因抗體  0.1ml
54759 PEG3  PEG3蛋白抗體  0.1ml
54760 Enkephalin/P-ENK  腦啡肽抗體  0.1ml
54761 recPEP  重組豬乙腦病毒結(jié)構(gòu)蛋白抗體  0.1ml
54762 VP2  重組豬細(xì)小病毒VP2蛋白抗體  0.2ml
54763 PEPT1  腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1/小肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體  0.1ml
54764 PEPT2/SLC15A2  腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體  0.1ml
54765 peripherin  外周蛋白抗體  0.1ml
54766 PERK  蛋白激酶樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶抗體  0.2ml
54767 Phospho-PERK(Thr980)  磷酸化蛋白激酶樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶抗體  0.1ml
54768 Perilipin A  脂滴包被蛋白Perilipin-A抗體  0.1ml
54769 PER1 protein  節(jié)律抑制蛋白PER1抗體  0.2ml
54770 PER2/Period circadian protein 2  節(jié)律蛋白2抗體  0.2ml
54771 PFK2/PFKFB3  6磷酸果糖激酶2抗體  0.2ml
54772 Phospho-PFK2 (Ser467)  磷酸化6磷酸果糖激酶2抗體  0.1ml
54773 PFKL/Fructose 6 Phosphate Kinase  6磷酸果糖激酶抗體  0.1ml
54774 phospho-PFKL (Ser775)  磷酸化6磷酸果糖激酶抗體  0.1ml
54775 PFKFB1  果糖-2,6-二磷酸酶1抗體  0.2ml
54776 PFKFB2  果糖-2,6-二磷酸酶心肌酶抗體  0.2ml
54777 Fascin1  纖維束1抗體  0.1ml
54778 phospho-FSCN1(Ser39)  磷酸化纖維束蛋白同源物1抗體  0.1ml
54779 PIK3C3/PI3 kinase type 3  磷脂酰肌醇激酶3催化亞單位3抗體  0.1ml
54780 phospho-PIK3C3(Ser282)  磷酸化磷脂酰肌醇激酶3催化亞單位3抗體  0.1ml
54781 PGAM1/PGAM2  磷酸變位酶1抗體  0.1ml
54782 PGK1  磷酸激酶1抗體  0.1ml
54783 phospho-PIK3C3(Ser676)  磷酸化磷脂酰肌醇激酶3催化亞單位3抗體  0.1ml
54784 PG-C/Pepsinogen 2  *原C抗體  0.1ml
54785 PGLS  磷酸葡萄糖酸內(nèi)酯酶抗體  0.2ml
54786 phospho-PIK3C3(Ser164)  磷酸化磷脂酰肌醇激酶3催化亞單位3抗體  0.1ml
54787 PHKG1  磷酸化酶激酶γ1  0.2ml
54788 PHKG2  磷酸化酶激酶γ2  0.2ml
54789 PHKA1  磷酸激酶α1抗體  0.2ml
54790 PHKB  磷酸化酶β抗體  0.2ml
54791 PPARGC1A/PGC1 α  過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1α抗體  0.2ml
54792 PHYH  植烷酸氧化酶抗體  0.2ml
54793 PGRN/Granulin  顆粒蛋白前體抗體  0.1ml
54794 UCHL1/PGP9.5  神經(jīng)細(xì)胞胞漿蛋白9.5抗體（蛋白基因產(chǎn)物9.5）  0.1ml
54795 Prohibitin  抑制素/腫瘤抑制因子抗體  0.1ml
54796 PI3K/PI3 kinase p85 alpha subunit  磷脂酰肌醇激酶抗體  0.1ml
54797 phospho-PI3K p85(Tyr458)/p55(Tyr199)  磷酸化磷脂酰肌醇激酶抗體  0.1ml
54798 phospho-PI3K p85/PIK3R1(Tyr368)  磷酸化磷脂酰肌醇激酶抗體  0.1ml
54799 phospho-PIK3R1(Tyr467)  磷酸化磷脂酰肌醇激酶抗體  0.1ml
54800 PIK3CA  磷脂酰肌醇激酶催化亞單位A抗體  0.2ml
54801 PI3 Kinase p110 delta  磷脂酰肌醇激酶催化亞單位D抗體  0.1ml
54802 phospho-PIK3R1(Tyr556)  磷酸化磷脂酰肌醇激酶抗體  0.1ml
54803 phospho-PI3KCA(Tyr317)  磷酸化磷脂酰肌醇激酶催化亞單位A抗體  0.1ml
54804 phospho-PI3K/PIK3CD(Tyr524)  磷酸化磷脂酰肌醇激酶催化亞單位D抗體  0.1ml
54805 PIBF  孕激素誘導(dǎo)阻斷因子抗體 人抗胃壁細(xì)胞抗體(AGPA/PCA)ELISA試劑盒 0.2ml
54806 PILR beta  細(xì)胞表面受體PILRβ抗體  0.2ml
54807 PILR beta  細(xì)胞表面受體PILRβ抗體  0.2ml
54808 PIM1  */*激酶蛋白Pim1抗體  0.2ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人抗胃壁細(xì)胞抗體(AGPA/PCA)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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