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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-01-21 04:10:01瀏覽次數(shù):133次
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人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
54634 VIP receptor 2/VPAC2 腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體-II/血管活性腸肽受體-II抗體 0.1ml
54635 PACAP R1 腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體1抗體 0.1ml
54636 PACAP-27/38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27/38抗體 0.1ml
54637 PACAP-38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38抗體 0.1ml
54638 PABP 多聚腺苷酸結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
54639 PABP (Methyl Arg455/460) 甲基化多聚腺苷酸結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
54640 PADI4 關(guān)節(jié)炎相關(guān)基因抗體 0.2ml
54641 PAF 血小板活化因子抗體 0.1ml
54642 PALB2 乳腺癌易感基因相關(guān)蛋白2 0.1ml
54643 PAFAH2/Lp-PLA2 脂蛋白磷脂酶A2抗體 0.1ml
54644 PAFR/PTAFR 血小板活化因子受體抗體 0.1ml
54645 PAK1 p21激活激酶1抗體 0.1ml
54646 PAK1 p21激活激酶1抗體 0.1ml
54647 PAK2 p21激活激酶2抗體 0.1ml
54648 PAI-1 纖溶酶原激活物抑制因子抗體 0.1ml
54649 PAK4 p21激活激酶4抗體 0.1ml
54650 Phospho-PAK4(Ser474)/PAK5(Ser602)/PAK6(Ser560) 磷酸化p21激活激酶4/5/6抗體 0.1ml
54651 Phospho-PAK4(Ser99) 磷酸化p21激活激酶4抗體 0.1ml
54652 PAK4 小鼠抗p21激活激酶4抗體 0.2ml
54653 PAI-2/SerpinB2 纖溶酶原激活物抑制因子2抗體(血漿酶原激活酶抑制因子-2) 0.1ml
54654 phospho-PAK1+PAK2+PAK3 (Ser141) 磷酸化p21激活激酶1/2/3抗體 0.1ml
54655 Phospho-PAK1 (Ser199/204)/PAK2 (Ser192/197) 磷酸化p21激活激酶1/2抗體 0.1ml
54656 Phospho-PAK1(Thr423)/PAK2 (Thr402) 磷酸化p21激活激酶1/2抗體 0.1ml
54657 phospho-PAK1(Ser144) 磷酸化p21激活激酶1抗體 0.1ml
54658 phospho-PAK2(Ser141) 磷酸化p21激活激酶2抗體 0.1ml
54659 Phospho-PAK2 (Ser20) 磷酸化p21激活激酶2抗體 0.1ml
54660 phospho-PAK3(Ser139) 磷酸化p21激活激酶3抗體 0.1ml
54661 phospho-PAK1/2/3(Thr423) 磷酸化p21激活激酶1/2/3抗體 0.1ml
54662 PAK7/PAK5/MBT 激活激酶PAK7抗體 0.2ml
54663 phospho-PAK1(Thr212) 磷酸化p21激活激酶1抗體 0.1ml
54664 FAM3A 胰腺衍生因子抗體 0.1ml
54665 PAK6 P21蛋白激活的蛋白激酶6抗體 0.1ml
54666 phospho-PAK6(Ser165) 磷酸化P21蛋白激活的蛋白激酶6 0.1ml
54667 PAP2c/AP2-gamma 磷脂酸磷酸酶2C抗體 0.1ml
54668 PAPK/ALS2CR2 肌萎縮側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白2(2號(hào)染色體)抗體 0.2ml
54669 PPAP2A 磷酸脂磷酸水解酶1抗體 0.1ml
54670 PPAP2C 磷酸脂磷酸水解酶2抗體 0.1ml
54671 PAP2B 磷脂酸磷酸酶2b抗體 0.1ml
54672 PAR-1/Thrombin receptor 蛋白酶激活受體-1抗體 0.1ml
54673 PAR-2 蛋白酶激活受體-2抗體 0.1ml
54674 PAR4 蛋白酶活化受體4抗體 0.1ml
54675 Phospho-PAR4 (Thr163) 磷酸化蛋白酶活化受體4抗體 0.1ml
54676 Parkin protein/PARK2 帕金蛋白抗體 0.2ml
54677 phospho-PARK2(Ser101) 磷酸化帕金蛋白抗體 0.1ml
54678 phospho-PARK2(Ser378) 磷酸化帕金蛋白抗體 0.1ml
54679 PARP 多腺苷二磷酸多聚酶抗體/多聚ADP-核糖聚合酶1 0.1ml
54680 PARP (N-Terminus) 多腺苷二磷酸多聚酶抗體(N端) 0.1ml
54681 PAX1 配對(duì)盒基因1抗體 0.1ml
54682 PAX2 配對(duì)盒基因2抗體 0.1ml
54683 PAX3 配對(duì)盒基因3抗體 0.1ml
54684 PAX5 配對(duì)盒基因5抗體 0.1ml
54685 PAX7 配對(duì)盒基因7抗體 0.2ml
54686 PAX8 配對(duì)盒基因8抗體人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab)ELISA試劑盒 0.1ml
54687 PAX9 配對(duì)盒基因9抗體 0.1ml
54688 PBK/TOPK PDZ連接激酶/T-LAK細(xì)胞源蛋白激酶抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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