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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人抗細胞膜DNA抗體(cmDNA)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人抗細胞膜DNA抗體(cmDNA)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人抗細胞膜DNA抗體(cmDNA)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質量。
54414 Nm23-H2 腫瘤抑制基因抗體 0.1ml
54415 NNT *核苷酸轉氫酶抗體 0.2ml
54416 Nociceptin 孤菲肽/痛敏肽抗體 0.1ml
54417 Nociceptin receptor 孤菲肽受體/痛敏肽受體抗體 0.2ml
54418 Nogo R 軸索過度生長抑制因子受體/Nogo受體抗體 0.1ml
54419 Nogo-A 軸索過度生長抑制因子-A抗體 0.1ml
54420 Nogo-B/A 軸索過度生長抑制因子-B/A抗體 0.1ml
54421 nNos/NOS-1 一氧化氮合成酶-1抗體(神經型) 0.1ml
54422 NOS-2/iNOS 一氧化氮合成酶-2抗體(誘導型) 0.1ml
54423 NOS-2/iNOS 一氧化氮合成酶-2抗體(誘導型) 0.1ml
54424 NOS-3/eNOS 一氧化氮合成酶-3抗體(內皮型) 0.1ml
54425 Phospho-eNOS(Ser1177) 磷酸化一氧化氮合成酶3抗體(內皮型) 0.1ml
54426 Phospho-eNOS (Thr113) 磷酸化一氧化氮合成酶3抗體(內皮型) 0.1ml
54427 Phospho-eNOS(Thr495) 磷酸化一氧化氮合成酶3抗體(內皮型) 0.1ml
54428 Notch1/MOTC 跨膜受體蛋白Notch-1抗體 0.1ml
54429 Notch 2 跨膜受體蛋白Notch-2抗體 0.1ml
54430 Notch3/4 跨膜受體蛋白Notch-3抗體 0.1ml
54431 NOX2/gp91phox NADPH氧化酶2抗體 0.1ml
54432 NOXA2/p67phox NADPH氧化酶活化蛋白1抗體 0.1ml
54433 Nox4/NADH NADPH氧化酶4抗體 0.1ml
54434 NADPH 還原型輔酶Ⅱ抗體 0.1ml
54435 proCNP/NPPC 促尿鈉排泄肽前體C抗體 0.1ml
54436 Nonylphenol 壬基酚抗體 1ml
54437 Phospho-NPM (Ser4) 磷酸化核仁磷酸蛋白抗體 0.1ml
54438 Phospho-NPM (Thr95) 磷酸化核仁磷酸蛋白抗體 0.1ml
54439 Phospho-NPM (Thr199) 磷酸化核仁磷酸蛋白抗體 0.1ml
54440 NPRB 利鈉肽受體B抗體 0.2ml
54441 NPRC/Natriuretic Peptide Receptor C 利鈉肽受體C抗體 0.2ml
54442 NPY/Neuropeptide Y 神經肽Y抗體 0.1ml
54443 NPY2R 神經肽Y受體2抗體 0.1ml
54444 HLA DM 組織相容性復合體α抗體 0.2ml
54445 NPY1R 神經肽Y1受體抗體 0.1ml
54446 NQO1 醌氧化還原酶抗體 0.1ml
54447 GluR1/AMPA *受體1抗體 0.1ml
54448 Phospho-NMDAR1(Ser890) 磷酸化*受體1抗體 0.1ml
54449 Phospho-NMDAR1(Ser896) 磷酸化*受體1抗體 0.1ml
54450 Phospho-NMDAR1(Ser897) 磷酸化*受體1抗體 0.1ml
54451 PMVK 磷酸甲羥戊酸激酶抗體 0.1ml
54452 PNPLA1 含patatin樣磷脂酶1抗體 0.2ml
54453 NMDA-NR1/NR1/NMDAR1 天冬氨酸受體抗體 0.1ml
54454 NR1/NMDAR1 *受體1抗體 0.1ml
54455 GLUR2 *受體2抗體 0.1ml
54456 phospho-Gria2 (Ser880) 磷酸化*受體2抗體 0.1ml
54457 GLUR3/GRIA 3 *受體3抗體 0.1ml
54458 GLUR4 *受體4抗體 0.1ml
54459 NR2C/NMDAR2C *受體2C抗體(N端) 0.1ml
54460 NR2A/NMDAR2A *受體2A抗體 0.1ml
54461 Phospho-NMDAR2A/NR2A (Tyr1246) 磷酸化*受體2A抗體 0.1ml
54462 Phospho-NMDAR2A (Tyr1325) 磷酸化*受體2A抗體 0.1ml
54463 NR2B/NMDAR2B *受體2B抗體 0.1ml
54464 Phospho-NMDAR2B (Tyr1070) 磷酸化*受體2B抗體 0.1ml
54465 NMDAR2B *受體2B抗體人抗細胞膜DNA抗體(cmDNA)ELISA試劑盒 0.1ml
54466 Phospho-NMDAR2B (Tyr1252) 磷酸化*受體2B抗體 0.1ml
54467 Phospho-NMDAR2B (Tyr1336) 磷酸化*受體2B抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人抗細胞膜DNA抗體(cmDNA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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