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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-24 19:33:16瀏覽次數(shù):128次
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人血管緊張素Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人血管緊張素Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人血管緊張素Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
54005 MAdCAM-1 粘膜血管定居因子抗體 0.2ml
54006 MAGP2 纖微絲相關(guān)糖蛋白2抗體 0.1ml
54007 DAXX 死亡相關(guān)蛋白6抗體(Fas死亡區(qū)相關(guān)蛋白) 0.1ml
54008 Phospho-FADD(Ser191) 磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 0.1ml
54009 phospho-DAXX (Ser213) 磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 0.1ml
54010 phospho-DAXX (Ser495) 磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 0.1ml
54011 phospho-DAXX (Ser517) 磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 0.1ml
54012 phospho-DAXX (Ser671) 磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 0.1ml
54013 Mafa v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗體 0.1ml
54014 MAFbx/Fbx32 泛素蛋白連接酶抗體 0.2ml
54015 MAG-a/b 髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b抗體 0.1ml
54016 MAG-a/L-MAG 髓鞘相關(guān)糖蛋白-a抗體 0.1ml
54017 MAGE-1 黑色素瘤相關(guān)抗原抗體 0.1ml
54018 MAGE-A4 黑色素瘤相關(guān)抗原4抗體 0.1ml
54019 Mammaglobin A 乳腺珠蛋白1抗體 0.1ml
54020 Mammaglobin B 乳腺珠蛋白2抗體 0.1ml
54021 Mammaglobin A 乳腺珠蛋白1抗體 0.2ml
54022 MAVS 線粒體抗病毒信號MAVS蛋白抗體 0.2ml
54023 14-3-3E/YWHAE 14-3-3E蛋白抗體 0.2ml
54024 MATR3/Matrin 3 核基質(zhì)蛋白3抗體 0.1ml
54025 MO25 alpha/CAB39 鈣結(jié)合蛋白39抗體 0.1ml
54026 Methionine adenosyltransferase 蛋氨酸腺苷轉(zhuǎn)移酶抗體 0.2ml
54027 phospho-YWHAE(Thr232) 磷酸化14-3-3E蛋白抗體 0.1ml
54028 Mesothelioma 間質(zhì)細(xì)胞蛋白抗體 0.2ml
54029 ME1 胞漿蘋果酸酶1抗體 0.2ml
54030 MAP3K7IP3 NFKB激活蛋白1抗體 0.1ml
54031 TORC1/CRTC1 環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體 0.2ml
54032 Phospho-Torc1/Crtc1 (Ser151) 磷酸化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體 0.1ml
54033 MAP3K8/TPL2 絲裂原活化蛋白激酶激酶8抗體 0.2ml
54034 Phospho-MAP3K8/Tpl2 (Ser400) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶8抗體 0.1ml
54035 Phospho-MAP3K8/Tpl2 (Thr290) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶8抗體 0.1ml
54036 MATH1 腸道分化干細(xì)胞MATH-1蛋白抗體 0.1ml
54037 Morphine(C1F3) *單克隆抗體 0.2ml
54038 Morphine *抗體 0.2ml
54039 Morphine *抗體 0.2ml
54040 Monoacylglycerol Lipase 單酰甘油脂肪酶抗體 0.2ml
54041 Torc2/Crtc2 CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體 0.1ml
54042 Phospho-Torc2/Crtc2(Ser171) 磷酸化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體 0.1ml
54043 Morphine(2F11) *單克隆抗體 0.2ml
54044 MAP4 微管相關(guān)蛋白4抗體 0.1ml
54045 MAP4K1 造血祖細(xì)胞激酶1抗體 0.1ml
54046 phospho-MAP4K1(Ser171) 磷酸化造血祖細(xì)胞激酶抗體 0.1ml
54047 Amphetamine(2A3F6) 苯丙胺單克隆抗體(安非他明) 0.1ml
54048 phospho-MAP4(Ser941) 磷酸化微管相關(guān)蛋白4抗體 0.1ml
54049 phospho-MAP4(Ser1046) 磷酸化微管相關(guān)蛋白4抗體 0.1ml
54050 phospho-MAP4(Ser1073) 磷酸化微管相關(guān)蛋白4抗體 0.1ml
54051 MAP4K4 絲裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗體 0.1ml
54052 phospho-MAP4K4(Ser629) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗體 0.1ml
54053 phospho-MAP4K4(Ser631) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗體 0.1ml
54054 phospho-MAP4K4(Ser801) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗體 0.1ml
54055 MEK1/2(MAPKK1) 絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗體 0.1ml
54056 MEK2/MAPKK2 人血管緊張素Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)ELISA試劑盒 絲裂原活化蛋白激酶激酶2抗體 0.1ml
54057 MAPKAP Kinase 2 絲裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗體 0.2ml
54058 Phospho-MAPKAPK2 (Thr222) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗體 0.1ml
54059 Phospho-MAPKAPK2(Thr334) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人血管緊張素Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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