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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人抗組織轉谷氨酰銨酶抗體IgA(tTG-IgA)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人抗組織轉谷氨酰銨酶抗體IgA(tTG-IgA)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人抗組織轉谷氨酰銨酶抗體IgA(tTG-IgA)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質量。
53726 Integrin alpha 1/CD49a 整合素α1抗體 0.1ml
53727 Integrin beta 7 整合素β7抗體 0.1ml
53728 Integrin Alpha V + Beta1 整合素αVβ1抗體 0.1ml
53729 Integrin Alpha V + Beta 3 (CD51+CD61) 整合素αVβ3抗體 0.2ml
53730 Integrin Alpha V + Beta 5 整合素αVβ5抗體 0.1ml
53731 Integrin Alpha V + Beta 6 整合素αVβ6抗體 0.2ml
53732 Integrin alpha E/CD103 整合素αE抗體 0.1ml
53733 IQGAP1 支架蛋白抗體 0.2ml
53734 IRF-1/MAR1 干擾素調節(jié)因子1抗體 0.2ml
53735 IRAK2 白介素-1受體相關激酶2抗體 0.2ml
53736 Phospho-IRAK1 (Ser376) 磷酸化白介素-1受體相關激酶1抗體 0.1ml
53737 Phospho-IRAK1 (Thr209) 磷酸化白介素-1受體相關激酶1抗體 0.1ml
53738 Phospho-IRAK1 (Thr387) 磷酸化白介素-1受體相關激酶1抗體 0.1ml
53739 IRF3 干擾素調節(jié)因子3 0.1ml
53740 Phospho-IRF3 (Ser396) 磷酸化干擾素調節(jié)因子3 0.1ml
53741 IRAK4 白介素-1受體相關激酶4抗體 0.2ml
53742 phospho-IRAK4(Thr345) 磷酸化白介素-1受體相關激酶4抗體 0.1ml
53743 IL-1RA 白介素-1受體拮抗劑抗體 0.2ml
53744 IL-1R1/CD121a/IL1 Receptor I 白介素1受體1抗體 0.1ml
53745 phospho-IL-1R1(Tyr496) 磷酸化白介素1受體1抗體 0.1ml
53746 IL-1R2 /CD121b/IL1 Receptor II 白介素1受體2抗體 0.2ml
53747 ST2 白細胞介素1受體相關蛋白抗體 0.1ml
53748 IRF4 干擾素調節(jié)因子4抗體 0.2ml
53749 IRGM 免疫相關鳥苷三磷酸酶基因抗體 0.2ml
53750 ILT2/CD85j 細胞表面免疫球蛋白樣轉錄因子2抗體 0.2ml
53751 IRF7 干擾素調節(jié)因子7抗體 0.1ml
53752 Phospho-IRF7 (Ser471/472) 磷酸化干擾素調節(jié)因子7抗體 0.1ml
53753 IRS P53 胰島素受體底物p53蛋白抗體 0.1ml
53754 IRS1 胰島素受體底物-1抗體 0.2ml
53755 phospho-IRS-1(Ser307) 磷酸化胰島素受體底物p-IRS-1/2抗體 0.1ml
53756 phospho-IRS1(Ser1101) 磷酸化胰島素受體底物-1抗體 0.1ml
53757 phospho-IRS1(Ser302) 磷酸化胰島素受體底物-1抗體 0.1ml
53758 phospho-IRS1(Ser332/336) 磷酸化胰島素受體底物-1抗體 0.1ml
53759 phospho-IRS1(Ser612) 磷酸化胰島素受體底物-1抗體 0.1ml
53760 phospho-IRS1(Ser636/639) 磷酸化胰島素受體底物-1抗體 0.1ml
53761 phospho-IRS1(Ser789) 磷酸化胰島素受體底物-1抗體 0.1ml
53762 phospho-IRS1(Tyr1222) 磷酸化胰島素受體底物-1抗體 0.1ml
53763 phospho-IRS1(Tyr895) 磷酸化胰島素受體底物-1抗體 0.1ml
53764 phospho-IRS1(Ser312) 磷酸化胰島素受體底物-1抗體 0.1ml
53765 phospho-IRS1(Thr176) 磷酸化胰島素受體底物1抗體 0.1ml
53766 IRS-2 胰島素受體底物-2抗體 0.2ml
53767 phospho-IRS-2(Ser731) 磷酸化胰島素受體底物2抗體 0.1ml
53768 IRS-3 胰島素受體底物-3抗體 0.2ml
53769 IRS-4 胰島素受體底物-4抗體 0.2ml
53770 Integrin alpha 4/CD49d 整合素α4抗體 0.1ml
53771 Integrin alpha 4+Beta 7 整合素α4β7抗體 0.1ml
53772 Integrin alpha 7/ITGA7 整合素α7抗體 0.1ml
53773 Integrin β1/CD29 整合素β1抗體 0.1ml
53774 Integrin alpha 5/CD49e/ITGA5 整合素α5抗體 0.1ml
53775 Integrin alpha V/CD51 整合素αV抗體 0.2ml
53776 Integrin alpha 6 人抗組織轉谷氨酰銨酶抗體IgA(tTG-IgA)ELISA試劑盒 整合素α6抗體 0.2ml
53777 Integrin beta 3/CD61 整合素β3抗體 0.1ml
53778 phospho-ITGB3(Tyr773) 磷酸化整合素β3抗體 0.1ml
53779 phospho-ITGB3(Tyr785) 磷酸化整合素β3抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人抗組織轉谷氨酰銨酶抗體IgA(tTG-IgA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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