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人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3（eNOS-3）ELISA試劑盒

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人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒，ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

53499 Phospho-HSL (Ser660)  磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體 0.1ml
53500 HRASLS2  HRAS樣抑制因子2抗體 0.2ml
53501 Hrasls3/HREV107  HRAS樣抑制因子3抗體 0.2ml
53502 HSD11B1/HSD1  羥基類固醇脫氫酶11β1抗體 0.1ml
53503 HSD11B2  羥基類固醇脫氫酶11β2抗體 0.1ml
53504 HSD17B1  羥類固醇脫氫酶17β-HSD抗體 0.1ml
53505 HSD17B2  羥類固醇脫氫酶17β2抗體 0.2ml
53506 HSD17B3  羥類固醇脫氫酶17β3抗體 0.2ml
53507 HSD3a  羥基類固醇脫氫酶3α抗體 0.2ml
53508 HSD3B1  滋養(yǎng)層細(xì)胞抗原3β-HSD抗體 0.1ml
53509 HSD3B7  滋養(yǎng)層細(xì)胞抗原3β7抗體 0.2ml
53510 HSP20  熱休克蛋白-20抗體 0.2ml
53511 HSP22  熱休克蛋白-22抗體 0.1ml
53512 HSP27/HspB1/HSP25  熱休克蛋白27抗體 0.1ml
53513 Phospho-HSP27(Ser78)  磷酸化熱休克蛋白27抗體 0.1ml
53514 Phospho-HSP27 (Ser82)  磷酸化熱休克蛋白27抗體 0.1ml
53515 Phospho-HSP27 (Ser15)  磷酸化熱休克蛋白27抗體 0.1ml
53516 Phospho-HSP27 (Ser254)  磷酸化熱休克蛋白27抗體 0.1ml
53517 HSP58/Cornulin  熱休克蛋白58抗體 0.2ml
53518 HSP60  熱休克蛋白-60抗體 0.1ml
53519 HSP47  熱休克蛋白-47抗體 0.1ml
53520 HSP70/HSPA1A  熱休克蛋白-70抗體 0.1ml
53521 HSP71  熱休克蛋白71抗體 0.1ml
53522 phospho-HSP70(Tyr41)  磷酸化熱休克蛋白70抗體 0.1ml
53523 phospho-HSP70(Tyr525)   磷酸化熱休克蛋白70抗體 0.1ml
53524 HSP75/TRAP1  熱休克蛋白75抗體 0.2ml
53525 HSP90 α  熱休克蛋白90α抗體 0.2ml
53526 HSP90 alpha  熱休克蛋白90α/HSP90 α抗體 0.2ml
53527 Phospho-HSP90 alpha (Thr5/7)  磷酸化熱休克蛋白90α抗體 0.1ml
53528 HSP90 β  熱休克蛋白90β 抗體 0.2ml
53529 Hsp93  植物熱休克蛋白93抗體 1ml
53530 HSP105  熱休克蛋白105抗體 0.1ml
53531 Syndecan 2/heparin sulphate protoglycans 1  硫酸肝素糖蛋白1抗體抗體 0.2ml
53532 Perlecan/Heparan Sulfate Proteoglycan 2  硫酸乙酰肝素蛋白多糖2 0.1ml
53533 HtrA2/Omi  線粒體*蛋白酶抗體 0.2ml
53534 TRT/TERT  端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶抗體 0.1ml
53535 human serum  人血清抗體 0.2ml
53536 COX10  *氧化酶10抗體 0.1ml
53537 Cytochrome B/MT-CYB  細(xì)胞色素B抗體 0.2ml
53538 Cytochrome b5/CYB5A  細(xì)胞色素b5抗體 0.1ml
53539 IAA (Indole-3-Acetic Acid)  吲哚乙酸抗體/植物生長(zhǎng)素抗體 0.2ml
53540 IAA  吲哚乙酸/植物生長(zhǎng)素單克隆抗體 0.2ml
53541 API5  凋亡抑制因子5抗體 0.1ml
53542 IASPP  腫瘤細(xì)胞凋亡ASPP家族的另一個(gè)成員抗體 0.1ml
53543 AIF1/IBa-1  離子鈣接頭蛋白抗體 0.1ml
53544 ICAD/DFF-45 Beta  Caspase激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑抗體 0.1ml
53545 ICOS/CD278  誘導(dǎo)協(xié)同刺激分子CD278抗體 0.2ml
53546 IDE  胰島素降解酶抗體 0.2ml
53547 IDE  胰島素降解酶抗體 0.1ml
53548 IDH2  草酰琥珀酸脫羧酶抗體 0.1ml
53549 IDH3A  草酰琥珀酸脫羧酶α抗體 0.2ml
53550 IDI1  人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒異戊烯焦磷酸1抗體 0.2ml
53551 IFABP  小腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
53552 IFABP  小腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
53553 FABP6  回腸脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 0.1ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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