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人粘蛋白/粘液素5AC（MUC5AC）ELISA試劑盒

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人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA試劑盒，ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶(hù)帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

52831 Phospho-BMX/ETK (Tyr556)  磷酸化非受體性蛋白*激酶ETK抗體 0.1ml
52832 EMAP2  內(nèi)皮單核細(xì)胞激活肽2抗體 0.2ml
52833 Eukaryotic aspartyl protease  天冬氨酸蛋白酶家族蛋白抗體 1ml
52834 EV71 polyprotein VP4  腸道病毒71型/手足口病病毒抗體 0.2ml
52835 DeltaD/DLD  DeltaD抗體 0.2ml
52836 EV71 polyprotein 3D  腸道病毒71型/手足口病病毒抗體 0.2ml
52837 EXPB-2  植物延展素-β 1ml
52838 DHH  DHH蛋白抗體 0.2ml
52839 ATEXPA10  植物延長(zhǎng)蛋白（擬南芥） 1ml
52840 Ezrin  埃茲蛋白抗體 0.1ml
52841 Phospho-Ezrin (Tyr353)  磷酸化埃茲蛋白抗體 0.1ml
52842 Phospho-Ezrin (Thr567)  磷酸化埃茲蛋白抗體 0.1ml
52843 F1 operon positive regulatory protein(NT)  肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體（N端） 0.2ml
52844 F1 operon positive regulatory protein  肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體（C端） 0.2ml
52845 FAAH1  脂肪酸酰胺水解酶1抗體 0.2ml
52846 FAAH2  脂肪酸酰胺水解酶2抗體 0.1ml
52847 intestinal FABP/IFABP  腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
52848 FABP7/FABP(brain) CT  腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體(C端) 0.1ml
52849 FABP4  脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白 0.1ml
52850 FABP5  脂肪酸結(jié)合蛋白5抗體（上皮細(xì)胞型） 0.1ml
52851 FABPB  腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
52852 factor V  *5抗體 0.1ml
52853 CA III/Carbonic anhydrase 3  碳酸酐酶3抗體 0.2ml
52854 factor VIII(FVIII) human  第八因子相關(guān)抗原抗體 0.1ml
52855 factor VIII(FVIII)  第八因子相關(guān)抗原抗體 0.1ml
52856 YBX-1/YB1  核酸敏感元件結(jié)合蛋白1 0.1ml
52857 factor XIII  *13抗體(纖維蛋白穩(wěn)定因子) 0.2ml
52858 FADD  Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白 0.1ml
52859 PGRMC  孕激素受體膜相關(guān)元件抗體 0.2ml
52860 phospho-FADD(Ser194)  磷酸化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
52861 phospho-FADD(Ser194)  磷酸化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
52862 FADS1  脂肪酸去飽和酶1抗體 0.2ml
52863 FAK/PTK2  粘著斑激酶抗體 0.1ml
52864 Phospho-FAK/PTK2(Tyr397)  磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml
52865 Phospho-FAK(Tyr861)  磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml
52866 Phospho-FAK(Tyr576/577)  磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml
52867 Phospho-FAK(Tyr925)  磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml
52868 Phospho-FAK(Tyr407)  磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml
52869 phospho-FAK(Tyr577)  磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml
52870 phospho-FAK(Ser722)  磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml
52871 phospho-FAK(Tyr925)  磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml
52872 FAF1  Fas相關(guān)1因子抗體 0.1ml
52873 phospho-FAK(Ser732)  磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml
52874 FAK2/PYK2  富含*的*激酶2抗體 0.1ml
52875 phospho-Pyk2/PTK2B(Tyr402)  磷酸化富含*的*激酶2抗體 0.1ml
52876 phospho-Pyk2 (Tyr881)  磷酸化富含*的*激酶2抗體 0.1ml
52877 FAR2  脂肪酰*還原酶2抗體 0.2ml
52878 phospho-PTK2(Tyr576+Tyr577)  磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml
52879 FANCD2  FANCD2抗體 0.1ml
52880 phospho-FANCD2(Ser222)  磷酸化FANCD2抗體 0.1ml
52881 FANCF  范可尼貧血相關(guān)蛋白F抗體 0.2ml
52882 FAM3B/PANDER人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA試劑盒  胰腺衍生因子抗體 0.2ml
52883 IMPDH2  5'*磷酸脫氫酶2抗體 0.2ml
52884 FAS/Apo-1/CD95  載脂蛋白A1抗體 0.1ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法：
1) 保證洗液注滿(mǎn)各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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