補(bǔ)體成分4a(C4a)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)
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人粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶(hù)帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
52775 ERK1/2(p44/42 MAPK) 絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體 0.1ml
52776 phospho-ERK1/2(Thr202/Tyr204)( p44/42 MAPK) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體 0.2ml
52777 phospho-ERK1(Thr202/Tyr204)+ERK2(Thr183/Tyr185) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體 0.1ml
52778 phospho-ERK1(Thr197/Thr202) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體 0.1ml
52779 phospho-MAPK3(Tyr204) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶3抗體 0.1ml
52780 EphB2/Eph receptor B2 *蛋白激酶受體B2抗體 0.1ml
52781 EPHB4 *蛋白激酶受體B4抗體 0.1ml
52782 ST14/MTSP1 *蛋白酶14/膜型*蛋白酶1抗體 0.2ml
52783 ERK1/MAPK3 絲裂原活化蛋白激酶3抗體 0.1ml
52784 phospho-ERK1+ERK2(Thr185+Tyr187+Thr202+Tyr204) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶ERK抗體 0.1ml
52785 ERK4 細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶4抗體 0.1ml
52786 MAPK4 絲裂原活化蛋白激酶4抗體 0.1ml
52787 phospho-ERK5(Ser496) 磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶5抗體 0.1ml
52788 phospho-ERK5( Ser731+Thr733) 磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶5抗體 0.1ml
52789 DUSP1/MKP1 絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體 0.1ml
52790 Phospho-MKP1 (Ser359) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體 0.1ml
52791 Phospho-MKP1 (Ser296 + Ser318) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體 0.1ml
52792 MKP-2/DUSP4 絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-2抗體 0.1ml
52793 ER-α 雌激素受體α抗體 0.1ml
52794 ER/PR/c-erbB-2 Kit ER/PR/c-erbB-2檢測(cè)試劑盒(鼠單抗) 30人份
52795 Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser167) 磷酸化雌激素受體ER alpha 抗體 0.1ml
52796 Phospho-Estrogen Receptor alpha (Tyr537) 磷酸化雌激素受體α抗體 0.1ml
52797 Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser118) 磷酸化雌激素受體α抗體 0.1ml
52798 Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser104/106) 磷酸化雌激素受體α抗體 0.1ml
52799 Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser305) 磷酸化雌激素受體α抗體 0.1ml
52800 ER-Alpha 雌激素受體α抗體(用于western blot) 0.1ml
52801 WASF1/WAVE 1 WAVE1蛋白抗體 0.2ml
52802 WASF2 WASF2抗體 0.2ml
52803 ER-Alpha 雌激素受體α抗體 0.1ml
52804 ER-alpha/beta 雌激素受體α/β抗體 0.1ml
52805 WFDC5 P53應(yīng)答基因蛋白5抗體 0.2ml
52806 HIFPH4 缺氧誘導(dǎo)因子脯氨酰4羥化酶抗體 0.2ml
52807 ADORA2B 腺苷A2b受體抗體(神經(jīng)生長(zhǎng)因子1受體) 0.2ml
52808 OXSR1 氧化應(yīng)激反應(yīng)蛋白1抗體 0.2ml
52809 ER-beta 雌激素受體β 抗體 0.1ml
52810 ER β 雌激素受體β抗體 0.1ml
52811 OS9 OS-9蛋白抗體 0.2ml
52812 Calreticulin 鈣網(wǎng)蛋白抗體 0.2ml
52813 RBM3 RNA結(jié)合基因蛋白3抗體 0.2ml
52814 EpCAM/CD326 上皮特異性抗原抗體 0.1ml
52815 ESM1 內(nèi)皮細(xì)胞特異性分子1抗體 0.1ml
52816 ESPL1 外紡錘體極樣蛋白1抗體 0.1ml
52817 phospho-ESPL1 (Ser1073) 磷酸化外紡錘體極樣蛋白1抗體 0.1ml
52818 ERp29 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白29抗體 0.1ml
52819 PDLIM3/ALP 輔肌動(dòng)蛋白相關(guān)LIM蛋白抗體 0.2ml
52820 FLT3L FMS樣*激酶3配體抗體 0.2ml
52821 ET-1 內(nèi)皮素-1抗體 0.2ml
52822 ET-1 內(nèi)皮素-1抗體 0.1ml
52823 ET-1 內(nèi)皮素-1抗體 0.2ml
52824 ET-1(2C4) 內(nèi)皮素-1單克隆抗體 0.2ml
52825 ETBR/Endothelin B Receptor 內(nèi)皮素B受體抗體 0.2ml
52826 ETFB 電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽/黃素蛋白抗體 0.2ml
52827 ET-3 內(nèi)皮素3抗體人粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA試劑盒 0.2ml
52828 Ets1/ETS-1 Ets轉(zhuǎn)錄因子家族e(cuò)ts1抗體 0.1ml
52829 ETK/BMX 非受體性蛋白*激酶ETK抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)y以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿(mǎn)各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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