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人細(xì)胞周期素D3（Cyclin-D3）ELISA試劑盒

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人細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒，ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

51971 CD59  CD59抗體 0.2ml
51972 CD56/NCAM1  神經(jīng)細(xì)胞粘附分子1抗體 0.1ml
51973 Ensconsin  上皮細(xì)胞微管相關(guān)蛋白7抗體 0.2ml
51974 CD56/NCAM1  神經(jīng)細(xì)胞粘附分子1抗體 0.1ml
51975 CD171/NCAM-L1  神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1抗體 0.1ml
51976 CD172a/SIRP Alpha  信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白α抗體 0.2ml
51977 CD57/HNK1  髓鞘相關(guān)糖蛋白CD57抗體 0.1ml
51978 PTPIP51/FAM82A2  蛋白*磷酸酶相互作用蛋白51抗體 0.2ml
51979 GDF10  生長(zhǎng)分化因子10抗體（TGF-β超家族10） 0.1ml
51980 CD68  CD68抗體 0.1ml
51981 CD68  CD68抗體 0.1ml
51982 CD69/CLEC2C/AIM  活化誘導(dǎo)分子CD69抗體 0.1ml
51983 CD72/Ly-32  CD72蛋白抗體 0.2ml
51984 CD74/MHC II  CD74抗體 0.1ml
51985 CLEC2D/OCIL  CLEC2D蛋白抗體 0.2ml
51986 CD80/B7-1  刺激分子B7-1蛋白抗體 0.1ml
51987 Transferrin receptor  轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體 0.1ml
51988 B7-1/CD80  刺激分子B7-1蛋白抗體 0.1ml
51989 MBNL3  毒蕈堿樣蛋白3抗體 0.2ml
51990 NT5C2  胞漿-5′-核苷酸酶-Ⅱ抗體 0.1ml
51991 CD79A/IGBP-1  免疫球蛋白結(jié)合蛋白-1抗體 0.1ml
51992 RASL/RASL10A  Ras樣蛋白家族10A抗體 0.2ml
51993 CD82/KAI1  腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白1抗體 0.1ml
51994 CD83/HB15  CD83抗體 0.2ml
51995 CD84/SLAMF5  CD84抗體 0.1ml
51996 OSGIN1  氧化應(yīng)激誘導(dǎo)生長(zhǎng)抑制因子1抗體 0.2ml
51997 STK36  */*激酶36融合同源蛋白抗體 0.2ml
51998 TPO/Thrombopoietin  血小板生成素抗體(巨核細(xì)胞集落刺激因子) 0.1ml
51999 Bub1  紡錘體檢查點(diǎn)蛋白抗體 0.2ml
52000 CD86/B7-2  CD86抗體 0.1ml
52001 CD244  CD244抗體 0.2ml
52002 phospho-CD244(Tyr271)  磷酸化CD244抗體 0.1ml
52003 BLAME/SLAMF8  BLAME抗體 0.1ml
52004 Cdc2/CDK1  周期素依賴激酶1抗體 0.1ml
52005 Phospho-cdc2 (Thr14)  磷酸化周期素依賴激酶2抗體 0.1ml
52006 Phospho-cdc2 (Tyr15)  磷酸化周期素依賴激酶2抗體 0.1ml
52007 Phospho-cdc2 (Thr161)  磷酸化周期素依賴激酶2抗體 0.1ml
52008 Phospho-cdc2 (Ser39)  磷酸化周期素依賴激酶2抗體 0.1ml
52009 Cdc25A  細(xì)胞分裂周期蛋白25抗體 0.1ml
52010 Phospho-cdc25A (Thr506)  磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25抗體 0.1ml
52011 Phospho-cdc25A (Ser76)  磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25抗體 0.1ml
52012 Phospho-cdc25A (Ser178)  磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25抗體 0.1ml
52013 Phospho-cdc25C (Ser216)  磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25C抗體 0.1ml
52014 Phospho-cdc25C (Thr48)  磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25C抗體 0.1ml
52015 Phospho-cdc25A (Ser124)  磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25抗體 0.1ml
52016 Phospho-cdc25A (Ser177)  磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25抗體 0.1ml
52017 Phospho-cdc25A (Ser292)  磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25抗體 0.1ml
52018 CD335/NKp46/NCR1  細(xì)胞毒性受體NK-p46抗體 0.2ml
52019 CD336/NKp44/NCR2  細(xì)胞毒性受體NK-p44抗體 0.2ml
52020 CD337/NKp30/NCR3  細(xì)胞毒性受體NK-p30抗體 0.1ml
52021 CD328/Siglec-7  唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素7抗體 0.2ml
52022 Cdc25B  細(xì)胞分裂周期蛋白25B抗體 0.1ml
52023 CD329/SIGLEC8  CD329抗體人細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒 0.2ml
52024 phospho-Cdc25B (Ser323)  磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25B抗體 0.1ml
52025 phospho-Cdc25B (Ser186)  磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25B抗體 0.1ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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