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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-08 04:19:55瀏覽次數(shù):213次
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人癌基因蛋白質(zhì)p190/bcr-abl ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人癌基因蛋白質(zhì)p190/bcr-abl ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人癌基因蛋白質(zhì)p190/bcr-abl ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
51568 bFGF/FGF2 堿性成纖維細(xì)胞生長因子抗體 0.1ml
51569 Staphyloccocus aureus Rosenbach tropina *菌體蛋白抗體 1ml
51570 Shigella tropina 志賀氏菌菌體蛋白抗體 1ml
51571 BGP/Osteocalcin 骨保護(hù)蛋白/骨鈣素抗體 0.1ml
51572 Bid BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體 0.1ml
51573 phospho-Bid (Ser65) 磷酸化BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體 0.1ml
51574 phospho-Bid(Ser61) 磷酸化BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體 0.1ml
51575 BCL2L10 BCL2樣10促凋亡蛋白抗體 0.2ml
51576 BCL2L12 BCL2樣12含*蛋白抗體 0.2ml
51577 BIN1 橋連整合因子蛋白抗體 0.1ml
51578 Bim/BCL2L11 細(xì)胞死亡調(diào)解子抗體 0.1ml
51579 phospho-Smad3(Ser204) 磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體 0.1ml
51580 phospho-Bim(Ser87) 磷酸化細(xì)胞死亡調(diào)解子抗體 0.1ml
51581 phospho-Bim(Ser55) 磷酸化細(xì)胞死亡調(diào)解子抗體 0.1ml
51582 phospho-Bim(Ser69) 磷酸化細(xì)胞死亡調(diào)解子抗體 0.1ml
51583 Bile salt-activated lipase 膽鹽激活脂肪酶抗體 0.2ml
51584 Bik 促凋亡Bik蛋白抗體 0.1ml
51585 phospho-Bik(Thr33) 磷酸化促凋亡Bik蛋白抗體 0.1ml
51586 BIRC5/Survivin variant 細(xì)胞凋亡抑制因子5抗體 0.2ml
51587 BK channel BK通道蛋白抗體 0.1ml
51588 BMAL1 芳香烴受體核轉(zhuǎn)位蛋白樣1抗體 0.1ml
51589 BKCa channels/KCNMA 鈣激活鉀通道蛋白抗體 0.1ml
51590 BMI-1/PCGF4 組蛋白相關(guān)Bmi1抗體 0.2ml
51591 BLNK B淋巴細(xì)胞連接蛋白抗體 0.1ml
51592 Phospho-BLNK(Tyr96) 磷酸化T淋巴細(xì)胞連接蛋白抗體 0.1ml
51593 BMP2 骨形態(tài)發(fā)生蛋白2抗體 0.1ml
51594 BMPR2 骨形態(tài)發(fā)生蛋白2受體抗體 0.1ml
51595 BMP3 骨形態(tài)發(fā)生蛋白3抗體 0.1ml
51596 BMP4 骨形態(tài)發(fā)生蛋白4抗體 0.1ml
51597 BMP6 骨形態(tài)發(fā)生蛋白6抗體 0.1ml
51598 BMP7 骨形態(tài)發(fā)生蛋白7抗體 0.1ml
51599 BMP8 骨形態(tài)發(fā)生蛋白8抗體 0.1ml
51600 BMPR1A/CD292 骨成型蛋白受體1A抗體 0.1ml
51601 BNP 腦鈉素/利鈉肽抗體 0.2ml
51602 BNP 腦鈉素抗體 0.1ml
51603 BNP(H1G3) 人腦鈉素單克隆抗體 0.1ml
51604 BNP/proBNP 腦納素前體抗體 0.1ml
51605 BNP/proBNP 腦納素前體抗體 0.1ml
51606 BOb-1/POU2AF1 B細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體 0.1ml
51607 RPA32/RPA2 復(fù)制因子A蛋白2 0.2ml
51608 phospho-RPA32/RPA2(Thr21) 磷酸化復(fù)制因子A蛋白2抗體 0.1ml
51609 RAC1/MIG5 細(xì)胞遷移誘導(dǎo)因子5抗體 0.2ml
51610 phospho-RAC1(Ser71) 磷酸化細(xì)胞遷移誘導(dǎo)因子5抗體 0.1ml
51611 RAC2 G蛋白P21 RAC2抗體 0.2ml
51612 RAC1+RAC2 GTP結(jié)合蛋白RAC1+RAC2抗體 0.2ml
51613 PSME3/PA28 gamma 蛋白酶體激活因子PA28γ抗體 0.2ml
51614 Pancreatic Lipase 胰脂肪酶抗體 0.1ml
51615 RPH3AL Ras相關(guān)GTP結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
51616 phospho-RPH3AL(Ser234) 磷酸化Ras相關(guān)GTP結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
51617 Prostaglandin E Receptor EP2 前列腺素E2受體2抗體 0.2ml
51618 A Raf/ARAF A-Raf抗體 0.1ml
51619 phospho-A Raf(Ser214) 磷酸化A-Raf抗體 0.1ml
51620 Phospho-A Raf(Ser299) 磷酸化A-Raf抗體 0.1ml
51621 Phospho-A Raf(Tyr301/302) 磷酸化A-Raf抗體 0.1ml
51622 B-Raf B Raf抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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