人葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)ELISA試劑盒
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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-29 20:53:11瀏覽次數(shù):152次
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人鼻咽癌(NPC)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人鼻咽癌(NPC)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人鼻咽癌(NPC)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
51398 HMG14/HMGN1 高遷移率核小體結(jié)合蛋白1 0.1ml
51399 G3BP1 Ras GTP酶活化蛋白結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml
51400 ORP150 氧氣調(diào)節(jié)蛋白150抗體 0.2ml
51401 AT1R/AGTR1 血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體 0.1ml
51402 AT1R/AGTR1 血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體 0.1ml
51403 phospho-G3BP1(Ser232) 磷酸化Ras GTP酶活化蛋白結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml
51404 phospho-HMGN1(Ser20+Ser24) 磷酸化高遷移率核小體結(jié)合蛋白1 0.1ml
51405 ATF1 活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體 0.1ml
51406 CUEDC2/CUE domain containing 2 CUE結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 0.2ml
51407 TRAP220/MED1 甲狀腺受體相關(guān)蛋白220抗體 0.2ml
51408 phospho-TRAP220/MED1(Thr1457) 磷酸化甲狀腺受體相關(guān)蛋白220抗體 0.1ml
51409 HOMER2 HOMER2抗體 0.2ml
51410 BNIP3 促凋亡調(diào)節(jié)蛋白BNIP3抗體 0.1ml
51411 HOMER3 HOMER3蛋白抗體 0.2ml
51412 UGT1A9 尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶1A9 0.2ml
51413 ATF2 活化復(fù)制因子2抗體 0.1ml
51414 phospho-HOMER3(Thr36) 磷酸化HOMER3蛋白抗體 0.1ml
51415 phospho-ATF2 (Ser490/498) 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 0.1ml
51416 phospho-ATF2(Thr69/71) 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 0.1ml
51417 phospho-ATF2(Ser322) 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 0.1ml
51418 phospho-ATF2(Ser44) 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 0.1ml
51419 phospho-ATF2(Ser94) 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 0.1ml
51420 phospho-ATF2 (Thr51) 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 0.1ml
51421 phospho-ATF2(Ser472) 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 0.1ml
51422 UGT2B4 尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶2B4抗體 0.2ml
51423 VAPA 囊泡相關(guān)膜蛋白相關(guān)蛋白A抗體 0.2ml
51424 ATF3 活化轉(zhuǎn)錄因子3抗體 0.2ml
51425 CPa(Clostridium perfringens alpha toxin) A型產(chǎn)氣莢膜梭菌(魏氏梭菌) 0.2ml
51426 DHRS3 短鏈脫氫還原酶3抗體 0.2ml
51427 VAPB 囊泡相關(guān)膜蛋白相關(guān)的蛋白B 0.2ml
51428 ATG1/ULK1 自噬相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
51429 Phospho-ATG1(Ser556) 磷酸化自噬相關(guān)蛋白1抗體 0.1ml
51430 APG7/ATG7 自噬相關(guān)蛋白7抗體 0.2ml
51431 ATGL 脂肪甘油三酯脂酶抗體 0.1ml
51432 ATG8/GABARAPL2 G1氨基丁酸A型受體相似蛋白2抗體 0.2ml
51433 phospho-ATG7(Ser95) 磷酸化自噬相關(guān)蛋白7抗體 0.1ml
51434 ATF4/CREB-2 活化轉(zhuǎn)錄因子4抗體 0.1ml
51435 ATM 毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體 0.1ml
51436 ATP2c1 鈣離子ATP酶通道蛋白抗體 0.2ml
51437 phospho-ATF4/CREB-2(Ser245) 磷酸化活化轉(zhuǎn)錄因子4抗體 0.1ml
51438 phospho-ATM(Ser1981) 磷酸化毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體 0.1ml
51439 ATF6 活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體 0.1ml
51440 p107/RBL1 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤樣蛋白p107抗體 0.1ml
51441 phospho-p107/RBL1(Ser975) 磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤樣蛋白p107抗體 0.1ml
51442 ATP4B 氫鉀ATP酶通道蛋白抗體 0.1ml
51443 Ran/ARA24 雄激素受體相關(guān)蛋白24抗體 0.2ml
51444 phospho-p107(Thr369) 磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤樣蛋白p107抗體 0.1ml
51445 ATP5J ATP5J抗體 0.1ml
51446 ATP7A 銅轉(zhuǎn)運蛋白質(zhì)α鏈抗體 0.1ml
51447 VLDL Receptor 極低密度脂蛋白受體抗體 0.1ml
51448 ATRN 吸引素抗體 人鼻咽癌(NPC)ELISA試劑盒 0.2ml
51449 ATG16A/ATG16L1 自噬相關(guān)蛋白16A抗體 0.2ml
51450 ATR/ACTR/RAC3 */*蛋白激酶ATR抗體 0.1ml
51451 phospho-ATG16A(Ser287) 磷酸化自噬相關(guān)蛋白16A抗體 0.1ml
51452 phospho-ATR/ACTR(Ser428) 磷酸化ATR抗體 0.1ml
51453 phospho-ATG16A(Ser213) 磷酸化自噬相關(guān)蛋白16A抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人鼻咽癌(NPC)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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