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人小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1（AFP-L1）ELISA試劑盒

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人小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)ELISA試劑盒，ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

51160 MID2/RNF60/Midline-2  環(huán)指蛋白60抗體 0.2ml
51161 RP1/DCDC4A  視網(wǎng)膜色素變性蛋白1抗體 0.2ml
51162 STAU2  雙鏈RNA結(jié)合蛋白Staufen2抗體 0.2ml
51163 Gliomedin/COLM  神經(jīng)膠質(zhì)蛋白(肝癌相關(guān)基因2)抗體 0.2ml
51164 KIF1B  驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員1B抗體 0.2ml
51165 MYBPC1  肌球蛋白結(jié)合蛋白C抗體 0.2ml
51166 Neurexin 1  軸突蛋白1(Neurexin 1α)抗體 0.2ml
51167 TANC1  TANC1蛋白抗體 0.2ml
51168 MYRIP/SLAC2-C  MYRIP蛋白抗體 0.2ml
51169 Amisyn  突觸融合結(jié)合蛋白6抗體 0.2ml
51170 Bestrophin  卵黃狀黃斑病蛋白抗體 0.2ml
51171 Bestrophin 2  卵黃狀黃斑病蛋白2抗體 0.2ml
51172 Bestrophin 3  卵黃狀黃斑病蛋白3抗體 0.2ml
51173 Bestrophin 4  卵黃狀黃斑病蛋白4抗體 0.2ml
51174 C1QL1  補(bǔ)體組分1q子成分樣蛋白1抗體 0.2ml
51175 CHL1/CALL  神經(jīng)細(xì)胞粘附分子CALL抗體 0.2ml
51176 COL6A5/Collagen VI alpha 5  6型膠原蛋白α5抗體 0.2ml
51177 CPA6  胰羧肽酶A6抗體 0.2ml
51178 GJC2/Connexin 47  間隙連接蛋白47抗體 0.2ml
51179 Sin3b  轉(zhuǎn)錄抑制蛋白Sin3b抗體 0.2ml
51180 HAPLN2  透明質(zhì)酸及粘蛋白2抗體 0.2ml
51181 HAS3  透明質(zhì)酸合成酶3抗體 0.2ml
51182 KAL1  卡爾曼綜合征基因1抗體 0.2ml
51183 Keratocan  細(xì)胞角膜蛋白多糖抗體 0.2ml
51184 Laminin alpha 4  層粘蛋白α4抗體(Lamininα4) 0.2ml
51185 Laminin alpha 4  層粘蛋白α4抗體(Lamininα4) 0.2ml
51186 Ligamentum Nuchae Elastin  項(xiàng)韌帶彈性蛋白抗體 0.2ml
51187 APBA3/Mint3/X11gamma  β淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白3抗體 0.2ml
51188 NTN3/Netrin-3  軸突生長(zhǎng)誘導(dǎo)因子3抗體 0.2ml
51189 Sphingomyelin Synthase 1  鞘磷脂合成酶1抗體 0.2ml
51190 OTOA/DFNB22  耳聾、常染色體隱性遺傳22抗體 0.2ml
51191 OLFM3/Optimedin  嗅球蛋白3抗體 0.2ml
51192 SMS2/Sphingomyelin Synthase 2  鞘磷脂合成酶2抗體 0.2ml
51193 PSCDBP/CYTIP  胞粘蛋白結(jié)合調(diào)節(jié)蛋白抗體 0.2ml
51194 Plakophilin 2  橋粒斑菲素蛋白2抗體 0.2ml
51195 SPON2/M spondin/Mindin  細(xì)胞外基質(zhì)底物反應(yīng)蛋白2抗體 0.2ml
51196 SNTG2/Syntrophin 5  肌蛋白結(jié)合蛋白γ2抗體 0.2ml
51197 DOK6  胞漿接頭蛋白Dok6抗體 0.2ml
51198 TECTB  遺傳性耳聾β-tectorin抗體 0.2ml
51199 TNR/Tenascin-R  腱糖蛋白R(shí)抗體 0.2ml
51200 procollagen type IIA  Ⅱ型膠原α1抗體 0.2ml
51201 AMIGO1  粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 0.2ml
51202 ANTXR2  炭疽毒素受體2抗體 0.2ml
51203 ASTN2  星形肌動(dòng)蛋白抗體 0.2ml
51204 CDH18  鈣粘附分子18抗體 0.2ml
51205 CNTN4/AXCAM  軸突相關(guān)粘附分子抗體 0.2ml
51206 CNTNAP3   接觸蛋白相關(guān)蛋白3抗體 0.2ml
51207 CNTNAP4  接觸蛋白相關(guān)蛋白4抗體 0.2ml
51208 Cadherin 8  鈣粘附蛋白8抗體 0.2ml
51209 Cadherin 8  鈣粘附蛋白8抗體 0.2ml
51210 Cadherin 9  人小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)ELISA試劑盒鈣粘附蛋白9抗體 0.2ml
51211 MPZL2/EVA1  髓鞘蛋白P0樣蛋白2抗體 0.2ml
51212 HDL/high density lipoprotein  高密度脂蛋白抗體 0.1ml
51213 ARSB  芳基硫酸酯酶B抗體 0.2ml
51214 CDHF15/FAT3  鈣粘蛋白15抗體 0.2ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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