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人Smad7 ELISA試劑盒

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人Smad7 ELISA試劑盒，ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人Smad7 ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人Smad7 ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

50426 MARCH7/Axotrophin  膜相關(guān)環(huán)指蛋白7抗體 0.2ml
50427 MARCH8  膜相關(guān)環(huán)指蛋白8抗體 0.2ml
50428 MARCH9  膜相關(guān)環(huán)指蛋白9抗體 0.2ml
50429 MARCH10  膜相關(guān)環(huán)指蛋白10抗體 0.2ml
50430 MARCH11  膜相關(guān)環(huán)指蛋白11抗體 0.2ml
50431 Proteasome 19S 10B  蛋白酶體PRS10B抗體 0.2ml
50432 Proteasome 19S S3  蛋白酶體PSMD3抗體 0.2ml
50433 ACPL2  酸性磷酸酶樣蛋白2抗體 0.2ml
50434 Proteasome 19S S7  蛋白酶體PRS7抗體 0.2ml
50435 Proteasome 20S C2  蛋白酶體PSMα1抗體 0.2ml
50436 Proteasome 20S alpha 2  蛋白酶體PSMα2抗體 0.2ml
50437 Proteasome 20S alpha 3  蛋白酶體PSMα3抗體 0.2ml
50438 Proteasome 20S alpha 3(Ser250)  磷酸化蛋白酶體PSMα3抗體 0.1ml
50439 Proteasome 20S alpha 5  蛋白酶體PSMα5抗體 0.2ml
50440 Proteasome 20S alpha 6  蛋白酶體PSMα6抗體 0.2ml
50441 Proteasome 20S alpha 7  蛋白酶體PSMα7抗體 0.2ml
50442 Proteasome 20S beta 3  蛋白酶體PSMβ3抗體 0.2ml
50443 Proteasome 20S beta 6  蛋白酶體PSMβ6抗體 0.2ml
50444 Proteasome 20S beta 7  蛋白酶體PSMβ7抗體 0.2ml
50445 Proteasome 20S alpha + beta  蛋白酶體PSMα+β抗體 0.2ml
50446 Proteasome 20S alpha 1+2+3+5+6+7  蛋白酶體PSMα1+2+3+5+6+7抗體 0.2ml
50447 phospho-Proteasome 20S beta 7(Ser214)  磷酸化蛋白酶體PSMβ7抗體 0.2ml
50448 Proteasome 26S S2/TRAP2  腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白2抗體 0.2ml
50449 LMP7  低分子量蛋白7抗體 0.2ml
50450 PSMD8  蛋白酶調(diào)解因子8抗體 0.2ml
50451 PSMD7  蛋白酶調(diào)解因子7抗體 0.2ml
50452 PSMD6/P44S10  蛋白酶調(diào)解因子6抗體 0.2ml
50453 OCEL1  緊密連接蛋白/小分子膠原蛋白OCEL1抗體 0.2ml
50454 ODF3B  外致密纖維蛋白3B抗體 0.2ml
50455 PGBD1/Cerebral protein 4  腦蛋白4抗體 0.2ml
50456 PGBD3  PGBD3蛋白抗體 0.2ml
50457 PGGT1β  香葉烯基轉(zhuǎn)移酶1β抗體 0.2ml
50458 MYCBP2  MYC結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml
50459 MURF3  肌肉特定環(huán)指蛋白3抗體 0.2ml
50460 MMS2/EDPF1  腸細(xì)胞分化相關(guān)因子1抗體 0.2ml
50461 MKRN1/RNF61  環(huán)指蛋白61抗體 0.2ml
50462 MKRN2/RNF62  環(huán)指蛋白62抗體 0.2ml
50463 MID1/Midline-1/RNF59  環(huán)指蛋白59抗體 0.2ml
50464 KF1/ZFP103  鋅指蛋白103抗體 0.2ml
50465 CNOT2  細(xì)胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白2抗體 0.2ml
50466 phospho-CNOT2(Ser101)  磷酸化細(xì)胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白2抗體 0.2ml
50467 CNOT4  細(xì)胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白4抗體 0.2ml
50468 CNOT6  細(xì)胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白6抗體 0.2ml
50469 LRSAM1  LRSAM1蛋白抗體 0.2ml
50470 CNOT8  細(xì)胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白8抗體 0.2ml
50471 MURF2  肌肉特異性環(huán)指蛋白2抗體 0.2ml
50472 MURF3  肌肉特異性環(huán)指蛋白3抗體 0.2ml
50473 SMURF1  Smad蛋白E3泛素連接酶1抗體 0.2ml
50474 p150 CAF1  染色質(zhì)組裝因子1P155抗體 0.2ml
50475 p55/DCAF1  染色質(zhì)組裝因子1P55抗體 0.2ml
50476 DCAF12/WDR40A  睪丸癌中心體相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
50477 DCAF13  DCAF13蛋白抗體 0.2ml
50478 phospho-gp130(Ser 782)  磷酸化gp130抗體 0.2ml
50479 ANKRD33B  錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白33B抗體 0.2ml
50480 ANKRD37  錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白37抗體 0.2ml
50481 ANKRD40  錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白40抗體 0.2ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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