人信號傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子5ELISA試劑盒
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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-08 21:45:25瀏覽次數(shù):209次
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人c-fos ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人c-fos ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人c-fos ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
50258 RNF13 環(huán)指蛋白13抗體 0.2ml
50259 RNF14 環(huán)指蛋白14抗體 0.2ml
50260 RNF15 環(huán)指蛋白15抗體 0.2ml
50261 TRIM17/RNF16 環(huán)指蛋白16抗體 0.2ml
50262 TRIM17/RNF16 環(huán)指蛋白16抗體 0.2ml
50263 RNF17 環(huán)指蛋白17抗體 0.2ml
50264 TRIM7/RNF90 糖原生成素相互作用蛋白抗體 0.2ml
50265 TRIM6/RNF89 環(huán)指蛋白89 0.2ml
50266 RNF87 環(huán)指蛋白87 0.2ml
50267 RNF86 環(huán)指蛋白86 0.2ml
50268 RING2/RNF2 環(huán)指蛋白2抗體 0.2ml
50269 PCGF3/RNF3 環(huán)指蛋白3抗體 0.2ml
50270 RNF40 環(huán)指蛋白40抗體 0.2ml
50271 RNF44 環(huán)指蛋白44抗體 0.2ml
50272 RNF6 環(huán)指蛋白6抗體 0.2ml
50273 RNF8 環(huán)指蛋白8抗體 0.2ml
50274 TRIM3/RNF22 環(huán)指蛋白22抗體 0.2ml
50275 RNF10 環(huán)指蛋白10抗體 0.2ml
50276 RNF11 環(huán)指蛋白11抗體 0.2ml
50277 RNF12 環(huán)指蛋白12抗體 0.2ml
50278 MTM1/Myotubularin 肌微管素1抗體 0.2ml
50279 MLF1/2/3 髓細胞性白血病蛋白1抗體 0.2ml
50280 RSL1D1 細胞衰老抑制基因蛋白抗體 0.2ml
50281 Repetin 中間絲相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
50282 VGLL1 轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白1抗體 0.2ml
50283 VGLL2 轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白2抗體 0.2ml
50284 VGLL3 轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白3抗體 0.2ml
50285 VGLL4 轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白4抗體 0.2ml
50286 SIP1 Smad蛋白相互作用蛋白1抗體 0.2ml
50287 PTPH1/PTPN3 蛋白*磷酸酶H1抗體 0.2ml
50288 PROCA1 Cyclin A1相互作用蛋白抗體 0.2ml
50289 ZNF354C 鋅指蛋白354C抗體 0.2ml
50290 SLFN14 Schlafen家族14抗體 0.2ml
50291 SEMCAP3/LNX3 SEMCAP3蛋白抗體 0.2ml
50292 MLT5 睪丸特異性MLT5蛋白抗體 0.2ml
50293 LST1 淋巴細胞特異性轉(zhuǎn)運蛋白1抗體 0.2ml
50294 IGSF1 抑制素結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
50295 IGSF2/CD101 CD101抗體 0.2ml
50296 IGSF3 免疫球蛋白超家族成員3抗體 0.2ml
50297 IGSF5 免疫球蛋白超家族成員5抗體 0.2ml
50298 IGSF6 免疫球蛋白超家族成員6抗體 0.2ml
50299 IGSF9 疫球蛋白超家族成員9抗體 0.2ml
50300 IGSF10 免疫球蛋白超家族成員10抗體 0.2ml
50301 IGSF11 大腦和睪丸特異性免疫球蛋白超家族成員11抗體 0.2ml
50302 IGSF12/CD300 免疫球蛋白超家族成員12抗體 0.2ml
50303 IGSF16/CD300C 免疫球蛋白超家族成員16抗體 0.2ml
50304 IGSF21 免疫球蛋白超家族成員21抗體 0.2ml
50305 GDPD2/GDE3 促進成骨細胞分化因子抗體 0.2ml
50306 GDPD3 甘油磷酸二酯酶磷酸結(jié)構(gòu)域3抗體 0.2ml
50307 GDPD5 甘油磷酸二酯酶磷酸結(jié)構(gòu)域5抗體 0.2ml
50308 CSPP1 中心體和紡錘體極相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
50309 ZPI/SERPINA10 *蛋白酶抑制劑A10抗體 0.2ml
50310 SERPINB1 *蛋白酶抑制劑B1抗體 0.2ml
50311 SERPINB10 *蛋白酶抑制劑B10抗體 0.2ml
50312 SERPINB11 *蛋白酶抑制劑B11抗體 0.2ml
50313 SERPINB12 *蛋白酶抑制劑B12抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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