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人H-ras ELISA試劑盒

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人H-ras ELISA試劑盒，ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人H-ras ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人H-ras ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

50088 Annexin Ⅲ  膜粘連蛋白A3抗體 0.1ml
50089 Annexin IV  膜粘連蛋白 A4抗體 0.1ml
50090 BZW2  BZW2蛋白抗體 0.2ml
50091 TPH2  5*羥化酶2抗體 0.2ml
50092 Annexin V  膜粘連蛋白5抗體 0.1ml
50093 Annexin A9  膜粘連蛋白9抗體 0.2ml
50094 Annexin A10/14  膜粘連蛋白10抗體 0.1ml
50095 Annexin VI  膜粘連蛋白6抗體 0.1ml
50096 Annexin A7  膜粘連蛋白7抗體 0.2ml
50097 PRKCQ/PKC theta  蛋白激酶C theta抗體 0.1ml
50098 phospho-PRKCQ(Ser676)  磷酸化蛋白激酶C theta抗體 0.1ml
50099 phospho-PRKCQ(Ser695)  磷酸化蛋白激酶C theta抗體 0.1ml
50100 phospho-PRKCQ(Thr538)  磷酸化蛋白激酶C theta抗體 0.1ml
50101 Annexin V  重組膜粘連蛋白5抗體 0.1ml
50102 YES1  原癌基因*蛋白激酶Yes1抗體 0.1ml
50103 phospho-YES1(Tyr426)  磷酸化原癌基因*蛋白激酶Yes1抗體 0.1ml
50104 phospho-YES1(Tyr537)  磷酸化原癌基因*蛋白激酶Yes1抗體 0.1ml
50105 Anthrax  炭疽桿菌抗體 0.2ml
50106 Anthrax  炭疽菌抗體（采用活疫苗制備） 0.2ml
50107 SARM1  SARM1蛋白抗體 0.2ml
50108 SAMD9  SAMD9蛋白抗體 0.2ml
50109 SAMD7  SAMD7蛋白抗體 0.2ml
50110 SAMD3  SAMD3蛋白抗體 0.2ml
50111 CECR1/ADGF  貓眼綜合征染色體候選基因1抗體 0.2ml
50112 CECR6  貓眼綜合征染色體候選基因6抗體 0.2ml
50113 RCBTB1/CLLD7  *核苷酸交換因子抗體 0.2ml
50114 CLRN3/TMEM12  跨膜蛋白12抗體 0.2ml
50115 Transportin 1  轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 0.2ml
50116 DPP6  二肽基肽酶6抗體 0.2ml
50117 EFHA1  EFHA1蛋白抗體 0.2ml
50118 SENP1  小泛素相關(guān)修飾蛋白1抗體 0.2ml
50119 EFHC1  EFHC1蛋白抗體 0.2ml
50120 EFHC2  EFHC2蛋白抗體 0.2ml
50121 EFHD1  EFHD1蛋白抗體 0.2ml
50122 EF-CBP2  突觸結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml
50123 IQCD  IQCD蛋白抗體 0.2ml
50124 IQCE  IQCE蛋白抗體 0.2ml
50125 IQCC  IQCC蛋白抗體 0.2ml
50126 IQCA1  IQCA1蛋白抗體 0.2ml
50127 IQCJ  IQCJ蛋白抗體 0.2ml
50128 IQCG  IQCG蛋白抗體 0.2ml
50129 IQCK  IQCK蛋白抗體 0.2ml
50130 IQCF1  IQCF1蛋白抗體 0.2ml
50131 ISLR2  ISLR2蛋白抗體 0.2ml
50132 HPRT  次黃嘌呤磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶1抗體 0.2ml
50133 SPTLC2  *棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶2抗體 0.2ml
50134 AKAP2  蛋白激酶A2抗體 0.2ml
50135 PAPSS1  腺苷酸硫酸激酶1抗體 0.2ml
50136 PAPSS2  腺苷酸硫酸激酶2抗體 0.2ml
50137 PAS1C1  核纖層蛋白A相關(guān)結(jié)構(gòu)蛋白1抗體 0.2ml
50138 PBLD/MAWBP  MAWD結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
50139 PCID1  PCID1蛋白抗體 0.2ml
50140 PCID2  PCID2蛋白抗體 0.2ml
50141 PDXK  吡哆醛激酶抗體 0.2ml
50142 PDZK1  PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK1蛋白抗體 0.2ml
50143 PDZK3  前列腺癌激活蛋白抗體 0.2ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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