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人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子（MMSAM）ELISA試劑盒

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人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒，ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

49864 BTBD10  BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體 0.2ml
49865 BTBD17  BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體 0.2ml
49866 ANGL2/ANGPTL2  血管生成素樣蛋白2抗體 0.1ml
49867 BTBD19  BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白19抗體 0.2ml
49868 GCLC/GCLM  γ谷氨酰半*合成酶抗體（γ-GCSc） 0.2ml
49869 GCOM1  GCOM1蛋白抗體 0.2ml
49870 OGFOD2  末端多聚腺苷酸2蛋白抗體 0.2ml
49871 GFOD2  葡萄糖果糖還原酶2抗體 0.2ml
49872 GFRAL  膠質(zhì)細(xì)胞系源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體α1樣蛋白抗體 0.2ml
49873 GHDC  GHDC蛋白抗體 0.2ml
49874 GK5/Glycerokinase 5  甘油激酶5抗體 0.2ml
49875 GLB1L3  β半乳糖苷酶1樣蛋白3抗體 0.2ml
49876 GLCCI1  糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體 0.2ml
49877 ANGPTL3/ANG5  血管生成素樣蛋白3 0.2ml
49878 GLIPR2  腦膠質(zhì)瘤發(fā)病相關(guān)蛋白2抗體 0.2ml
49879 Grpa  半乳糖凝集素相關(guān)蛋白A抗體 0.2ml
49880 Galectin 12/LGALS12  半乳糖凝集素12抗體 0.2ml
49881 ANGPTL4/ARP4  血管生成素樣蛋白4抗體 0.2ml
49882 HAGHL  羥基酰*水解酶樣蛋白抗體 0.2ml
49883 HEATR7B2  熱休克蛋白受體家族蛋白7B2抗體 0.2ml
49884 HEBP2  Heme結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml
49885 HEPACAM2  肝細(xì)胞粘附分子2抗體 0.2ml
49886 HEXDC  氨基己糖苷酶D抗體 0.2ml
49887 HHLA2  HHLA2蛋白抗體 0.2ml
49888 KIAA1576/VAT1L  囊泡胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1家族蛋白抗體 0.2ml
49889 BOLA1  BOLA1蛋白抗體 0.2ml
49890 BOLA2  BOLA2蛋白抗體 0.2ml
49891 BPIL1  殺菌通透性增加蛋白樣1抗體 0.2ml
49892 BPIL2  殺菌/通透性增加蛋白樣2抗體 0.2ml
49893 BPIL3  殺菌/通透性增加蛋白樣3抗體 0.2ml
49894 BRD1  BRD1蛋白抗體 0.2ml
49895 BRP44  腦蛋白44抗體 0.2ml
49896 BRP44L  腦蛋白44樣蛋白抗體 0.2ml
49897 BRPF3  BRPF3蛋白抗體 0.2ml
49898 LMO2  T淋巴細(xì)胞易位蛋白2抗體 0.2ml
49899 BTNL2  嗜乳脂蛋白樣2抗體 0.2ml
49900 BTNL3  嗜乳脂蛋白樣3抗體 0.2ml
49901 BTNL8  嗜乳脂蛋白樣8抗體 0.2ml
49902 BTNL9  嗜乳脂蛋白樣9抗體 0.2ml
49903 BXDC1  BXDC1蛋白抗體 0.2ml
49904 BXDC2  BXDC2蛋白抗體 0.2ml
49905 BEND3  BEND3蛋白抗體 0.2ml
49906 BEND4/CCDC4  BEND4蛋白抗體 0.2ml
49907 BEND6  BEND6蛋白抗體 0.2ml
49908 c-ABL1/2(Tyr393/429)  磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體 0.1ml
49909 NF-κB p105/p50(Phospho-Ser373)  磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體 0.1ml
49910 phospho-C-Myc(Thr373)  磷酸化致癌基因C-Myc抗體 0.2ml
49911 Lin28  RNA結(jié)合蛋白LIN28抗體 0.2ml
49912 Phospho-BRCA1(Ser988)  磷酸化乳腺癌易感基因1抗體 0.1ml
49913 phospho-Cdc25B (Ser149)  磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25B抗體 0.1ml
49914 phospho-GluR1(Ser849)  磷酸化*受體1抗體 0.1ml
49915 ZNF471  鋅指蛋白471抗體人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒 0.2ml
49916 Phospho-NMDAR2B (Tyr1474)  磷酸化*受體2B抗體 0.1ml
49917 phospho-ATF2 (Thr53)  磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 0.1ml
49918 phospho-ATF2 (Thr55)  磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 0.1ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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