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人腫瘤特異性抗原（TSA） ELISA試劑盒

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人腫瘤特異性抗原(TSA) ELISA試劑盒，ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人腫瘤特異性抗原(TSA) ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人腫瘤特異性抗原(TSA) ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

49808 FCHSD1  FCHSD1蛋白抗體 0.2ml
49809 FOP/FGFR1OP  FGFR1癌基因伴侶蛋白抗體 0.2ml
49810 FGFR1OP2  FGFR1癌基因伴侶蛋白2抗體 0.2ml
49811 SUMO-1/UBC9  泛素蛋白連接酶E2I抗體 0.2ml
49812 UBE2D2  泛素蛋白連接酶D2抗體 0.2ml
49813 Ube2G2/UBC7  泛素蛋白連接酶G2抗體 0.2ml
49814 Ube2L3  泛素蛋白連接酶L3抗體 0.2ml
49815 Ube2N/UBC13  泛素蛋白連接酶2N抗體 0.2ml
49816 UBE2E3  泛素蛋白連接酶E3抗體 0.2ml
49817 UBE2E2  泛素蛋白連接酶2E2抗體 0.2ml
49818 UBE2D4  泛素蛋白連接酶D4抗體 0.2ml
49819 UBE2D3  泛素蛋白連接酶D3抗體 0.2ml
49820 UBE2D1  泛素蛋白連接酶D1抗體 0.2ml
49821 UBE2C  泛素蛋白連接酶C抗體 0.2ml
49822 KLHDC8A  KLHDC8A蛋白抗體 0.2ml
49823 KLHDC9  KLHDC9蛋白抗體 0.2ml
49824 LRRC2  LRRC2蛋白抗體 0.2ml
49825 LRRC59  LRRC59蛋白抗體 0.2ml
49826 LRRC41  LRRC41蛋白抗體 0.2ml
49827 NIPA  間變性淋巴瘤激酶核相互作用伴侶蛋白抗體 0.2ml
49828 phospho-NIPA(Ser354)  磷酸化間變性淋巴瘤激酶核相互作用伴侶蛋白抗體 0.1ml
49829 RAB40B  RAS癌基因家族蛋白R(shí)AB40B抗體 0.2ml
49830 RAB40A  RAS癌基因家族蛋白R(shí)AB40A抗體 0.2ml
49831 RAB40C  RAS癌基因家族蛋白R(shí)AB40C抗體 0.2ml
49832 EGR2  早期生長(zhǎng)反應(yīng)蛋白2抗體 0.1ml
49833 Ube2L6  泛素載體蛋白L6抗體 0.2ml
49834 Ube2H/UBCH2  泛素激活酶2H抗體 0.2ml
49835 Ube2G1/UBC7  泛素蛋白連接酶G1抗體 0.2ml
49836 UFC1  泛素結(jié)合酶UFC1抗體 0.2ml
49837 UBCH6/UBE2E1  泛素蛋白連接酶E1抗體 0.2ml
49838 UBC6e/UBE2J1  泛素結(jié)合酶E2J1抗體 0.2ml
49839 UBE2A/UBE2B/RAD6  泛素結(jié)合酶E2蛋白A抗體 0.2ml
49840 RNF160/ZNF294  環(huán)指蛋白160抗體 0.2ml
49841 NFX1  核轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml
49842 NCE2  泛素結(jié)合酶E2F抗體 0.2ml
49843 HIP2  泛素蛋白連接酶E2抗體 0.2ml
49844 UBE2O/E2 230K  泛素結(jié)合酶E2O抗體 0.2ml
49845 PTK9/TWF1  蛋白*激酶9抗體 0.2ml
49846 phospho-PTK9/TWF1(Tyr321)  磷酸化蛋白*激酶9抗體 0.1ml
49847 UBE2J2  泛素蛋白連接酶J2抗體 0.2ml
49848 UBE2M  泛素蛋白連接酶M抗體 0.2ml
49849 UBE2Q1  泛素蛋白連接酶Q1抗體 0.2ml
49850 UBE2U  泛素蛋白連接酶U抗體 0.2ml
49851 UBE2W  泛素蛋白連接酶W抗體 0.2ml
49852 CBLL1/Ecadherin binding protein E7  上皮鈣粘附分子結(jié)合蛋白E7 0.2ml
49853 BTRC2/beta TRCP2  BTRC2蛋白抗體 0.2ml
49854 WDR23  WDR23蛋白抗體 0.2ml
49855 SKP1  S期激酶相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
49856 SHFM3  SHFM3蛋白抗體 0.2ml
49857 ROC1/RNF75  環(huán)指蛋白75抗體 0.2ml
49858 RIT1  RIT1蛋白抗體 0.2ml
49859 FbxW2  FbxW2蛋白抗體人腫瘤特異性抗原(TSA) ELISA試劑盒 0.2ml
49860 Fbxw7/CDC4  Fbxw7蛋白抗體 0.2ml
49861 FBXW8/FBXO29  FBXW8蛋白抗體 0.2ml
49862 Fbx15  Fbx15蛋白抗體 0.2ml
49863 BTBD3  BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 0.2ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人腫瘤特異性抗原(TSA) ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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