(SDC3)elisa檢測(cè),Syndecan3/試劑盒
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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-02-14 21:28:20瀏覽次數(shù):180次
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人癌胚鐵蛋白(CEF) ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人癌胚鐵蛋白(CEF) ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人癌胚鐵蛋白(CEF) ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
49698 FRMD4B FRMD4B蛋白抗體 0.2ml
49699 FRMD5 FRMD5蛋白抗體 0.2ml
49700 FRMD6 FRMD6蛋白抗體 0.2ml
49701 FRMD7 FRMD7蛋白抗體 0.2ml
49702 FRMD8 FRMD8蛋白抗體 0.2ml
49703 CTDSPL CTDSPL蛋白抗體 0.2ml
49704 CTDSPL2 CTDSPL2蛋白抗體 0.2ml
49705 CUEDC1 CUE結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 0.2ml
49706 CA XI/Carbonic Anhydrase XI 碳酸酐酶11抗體 0.2ml
49707 Alpha casein α酪蛋白抗體 0.2ml
49708 CADM2/IGSF4D/Cell adhesion molecule 2 細(xì)胞粘附分子2 0.2ml
49709 COBL/Cordon bleu homolog 耳聾-甲狀腺腫綜合征相關(guān)COBL蛋白抗體 0.2ml
49710 CUTA 乙酰*酯酶相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
49711 DCAKD 脫磷酸輔酶A結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 0.2ml
49712 DCST1 DCST1蛋白抗體 0.2ml
49713 DCUN1D4 DCUN1D4蛋白抗體 0.2ml
49714 DDRGK1 DDRGK1蛋白抗體 0.2ml
49715 DENND2A DENND2A蛋白抗體 0.2ml
49716 DENND1B DENND1B蛋白抗體 0.2ml
49717 DEPTOR/DEPDC6 DEPTOR蛋白抗體 0.2ml
49718 DIAPH1 耳聾常染色體顯性遺傳相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
49719 TBX1/Brachyury 先心病相關(guān)蛋白TBX1抗體 0.2ml
49720 DGCR2 DGCR2蛋白抗體 0.2ml
49721 DHPS 脫氧輔合酶蛋白抗體 0.2ml
49722 DHPS1 短鏈脫氫還原酶1抗體 0.2ml
49723 DHRS13 短鏈脫氫還原酶13抗體 0.2ml
49724 DHRS7 視網(wǎng)膜短鏈脫氫酶/還原酶家族7抗體 0.2ml
49725 DHRSX 短鏈脫氫酶/還原酶家族X抗體 0.2ml
49726 DHRS4 短鏈脫氫酶/還原酶家族4抗體 0.2ml
49727 DHRS7C 短鏈脫氫酶/還原酶家族7C抗體 0.2ml
49728 DHRS4L2 短鏈脫氫酶/還原酶家族4樣2蛋白抗體 0.2ml
49729 GIMAP1 GTP酶IMAP家族成員1抗體 0.2ml
49730 GIMAP2 GTP酶IMAP家族成員2抗體 0.2ml
49731 GIMAP3 GTP酶IMAP家族成員3抗體 0.2ml
49732 GIMAP4 GTP酶IMAP家族成員4抗體 0.2ml
49733 GIMAP5 GTP酶IMAP家族成員5抗體 0.2ml
49734 GIMAP6 GTP酶IMAP家族成員6抗體 0.2ml
49735 GIMAP7 GTP酶IMAP家族成員7抗體 0.2ml
49736 GIMAP8 GTP酶IMAP家族成員8抗體 0.2ml
49737 GPRIN1 G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白1抗體 0.2ml
49738 GPRIN2 G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白2抗體 0.2ml
49739 GPRIN3 G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白3抗體 0.2ml
49740 DIRC2 干擾腎細(xì)胞癌蛋白2抗體 0.2ml
49741 p400 p400蛋白抗體 0.2ml
49742 DNAJC7 DNAJC7蛋白抗體 0.2ml
49743 VAV1 鳥苷酸轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體 0.2ml
49744 DNMBP 動(dòng)力結(jié)合蛋白DNMBP抗體 0.2ml
49745 DPH2 白喉酰胺生物合成樣蛋白2抗體 0.2ml
49746 CRMP5 人癌胚鐵蛋白(CEF) ELISA試劑盒二氫嘧啶酶相關(guān)蛋白5抗體 0.2ml
49747 Phospho-CRMP2 (Thr514+Ser518) 磷酸化二氫嘧啶酶樣2抗體 0.1ml
49748 CRMP4/DRP3 腦衰蛋白反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白4抗體 0.2ml
49749 phospho-VAV1(Tyr160) 磷酸化鳥苷酸轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體 0.1ml
49750 phospho-VAV1(Tyr174) 磷酸化鳥苷酸轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體 0.1ml
49751 DYDC1 DYDC1蛋白抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人癌胚鐵蛋白(CEF) ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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