Na+k+ ATP酶活性測(cè)試盒_微量法氧化磷酸化類(lèi)
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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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人普通急性淋巴細(xì)胞白血病抗原(CALLA)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人普通急性淋巴細(xì)胞白血病抗原(CALLA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人普通急性淋巴細(xì)胞白血病抗原(CALLA)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
49080 ARTS1 脂肪細(xì)胞源性*氨基肽酶抗體(血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白) 0.2ml
49081 NSPL2/RTN3 神經(jīng)內(nèi)分泌特異性蛋白2抗體 0.2ml
49082 TID1/HCA57 肝癌相關(guān)抗原57抗體 0.2ml
49083 FIS1/TTC11 線粒體裂變1蛋白抗體 0.2ml
49084 VDAC3 線粒體外膜孔蛋白3抗體(電壓依賴陰離子通道蛋白3) 0.2ml
49085 DFFB DNA斷裂因子抗體(蛋白酶激活脫氧核糖核酸酶) 0.2ml
49086 CIDE A DNA斷裂因子相似蛋白A抗體 0.2ml
49087 CIDE B DNA斷裂因子相似蛋白B抗體 0.2ml
49088 DNase I 脫氧核糖核酸酶1抗體 0.2ml
49089 DNase II 脫氧核糖核酸酶2抗體 0.2ml
49090 DNase gamma 脫氧核糖核酸酶γ抗體 0.2ml
49091 TIP30 TIP30蛋白抗體 0.2ml
49092 AMID/AIFM2 線粒體凋亡誘導(dǎo)因子2抗體 0.2ml
49093 ATAD5 染色體脆弱性相關(guān)基因抗體 0.2ml
49094 BAT3/BAG6 Bcl2相關(guān)抗凋亡基因6抗體 0.2ml
49095 CTNNBL1/Beta catenin like 1 β連環(huán)蛋白樣蛋白1抗體 0.2ml
49096 DATF1 死亡相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子1抗體 0.2ml
49097 TFDP2/DP2 轉(zhuǎn)錄因子E2F二聚體蛋白2抗體 0.2ml
49098 EAF2 睪酮調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)和腫瘤抑制基因抗體 0.2ml
49099 FLI1 尤文肉瘤FLI1蛋白抗體 0.2ml
49100 MDMX MDM2樣P53蛋白結(jié)合抗體 0.2ml
49101 TMUB1 跨膜和泛素樣結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 0.2ml
49102 NUP50 核孔蛋白50抗體 0.2ml
49103 PDCD2L/MGC13096 程序性細(xì)胞死亡2抗體 0.2ml
49104 SLTM 轉(zhuǎn)綠調(diào)節(jié)因子SLTM抗體 0.2ml
49105 GPR65 G蛋白偶聯(lián)受體65抗體 0.2ml
49106 AX2R/LOC389289 膜粘連蛋白2受體抗體 0.2ml
49107 NADE/NGFRAP1 神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
49108 NRH2 死亡結(jié)構(gòu)域蛋白NRH2抗體 0.2ml
49109 PGRPS 肽聚糖識(shí)別蛋白1抗體 0.2ml
49110 Porimin 前細(xì)胞脹亡受體誘導(dǎo)膜損傷蛋白抗體 0.2ml
49111 TRAF7 腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子7抗體 0.2ml
49112 ZDHHC16 細(xì)胞凋亡調(diào)控蛋白ZDHHC16抗體 0.2ml
49113 DR6/CD358 腫瘤細(xì)胞調(diào)亡素/腫瘤壞死因子受體死亡受體6抗體 0.2ml
49114 BCCIP/TOK1 乳腺癌易感基因2和p21蛋白抑制因子抗體 0.2ml
49115 Amphiphysin 神經(jīng)元突觸前膜蛋白抗體 0.2ml
49116 WISP39/FKBPL p21調(diào)控蛋白WISP39抗體 0.2ml
49117 RBM38 RNA結(jié)合蛋白38抗體 0.2ml
49118 TReP132/RAPA 乳腺癌抗雌激素抵抗蛋白2抗體 0.2ml
49119 ALS2CR8 肌萎縮側(cè)索硬化2染色體區(qū)域候選蛋白8抗體 0.2ml
49120 Corin 心臟特異性*蛋白酶抗體 0.2ml
49121 GPR55 蛋白偶聯(lián)受體55抗體 0.2ml
49122 LAP3 *氨基肽酶3抗體 0.2ml
49123 LMW Kininogen/Kininogen 1 低分子量生長(zhǎng)促進(jìn)因子抗體(激肽原1) 0.2ml
49124 KCNMB1/Maxi Potassium channel beta 鈣激活鉀通道蛋白β1抗體 0.2ml
49125 P2RX4 三磷酸腺苷門(mén)控陽(yáng)離子通道蛋白抗體 0.2ml
49126 ATP6IP2 ATP酶H+轉(zhuǎn)運(yùn)溶酶體輔助蛋白2抗體 0.2ml
49127 Relaxin 1 松弛肽/松弛素抗體 0.2ml
49128 Renalase 腎胺酶抗體 0.2ml
49129 SLC12A3/NCCT 鈉氯離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 0.2ml
49130 VNN1 血管非炎癥分子1抗體 0.2ml
49131 AXUD1 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β誘導(dǎo)蛋白3抗體(半*和*富含核蛋白1) 0.2ml
49132 BS69/Adenovirus 5 E1A binding protein 腺病毒5結(jié)合蛋白BS69抗體(骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體相關(guān)分子1) 人普通急性淋巴細(xì)胞白血病抗原(CALLA)ELISA試劑盒 0.2ml
49133 BTG3 高表達(dá)神經(jīng)上皮蛋白BTG3抗體 0.2ml
49134 BTG4 B細(xì)胞遷移基因4抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人普通急性淋巴細(xì)胞白血病抗原(CALLA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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