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人硫氧化還原蛋白（Trx）ELISA試劑盒

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人硫氧化還原蛋白(Trx)ELISA試劑盒，ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人硫氧化還原蛋白(Trx)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人硫氧化還原蛋白(Trx)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

48968 TRIB3/p65 interacting inhibitor of NF-kappaB  神經(jīng)細(xì)胞死亡誘導(dǎo)蛋白激酶抗體 0.1ml
48969 SERCA1 ATPase  肌漿/內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣ATP酶1抗體 0.2ml
48970 GRK5  G蛋白偶聯(lián)受體激酶5抗體 0.2ml
48971 EDG3  內(nèi)皮分化型G蛋白偶聯(lián)受體3抗體 0.2ml
48972 TNFAIP3 interacting protein 3/ABIN3  腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)相互作用蛋白3抗體 0.2ml
48973 RISC/Serine carboxypeptidase 1  *羧肽酶1抗體 0.2ml
48974 APS  APS抗體 0.1ml
48975 SOAT1/ACAT1  *?；D(zhuǎn)移酶1抗體 0.2ml
48976 phospho-APS(Ser598)  磷酸化APS抗體 0.1ml
48977 Scavenger Receptor BII  清道夫受體B2抗體 0.2ml
48978 CD239  B細(xì)胞粘附分子CD239抗體 0.2ml
48979 AP2 alpha  轉(zhuǎn)錄激活蛋白2α抗體 0.1ml
48980 CPB2/Carboxypeptidase B2  胰羧肽酶B2抗體 0.2ml
48981 Fibrinopeptide A  纖維蛋白肽A/血纖肽抗體 0.2ml
48982 GAS 6  生長(zhǎng)停滯特異性蛋白6抗體 0.2ml
48983 AUP1/Ancient ubiquitous protein 1  原始廣泛存在蛋白1抗體 0.2ml
48984 Biglycan  骨/軟骨蛋白多糖1抗體 0.2ml
48985 ALT1  谷*氨基轉(zhuǎn)移酶1抗體 0.1ml
48986 Eph receptor A2+A3+A4  內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白*激酶A2+A3+A4抗體 0.2ml
48987 phospho-Eph receptor A2+A3+A4 (Tyr588 + Tyr596)  磷酸化內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白*激酶A2+A3+A4抗體 0.1ml
48988 phospho-EPH A3+A4+A5 ( Tyr779)  磷酸化內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白*激酶A3+A4+A5抗體 0.1ml
48989 FLAP/5-lipoxygenase activating protein  5脂氧合酶激活蛋白抗體 0.2ml
48990 IKK alpha + IKK beta  KB抑制蛋白激酶α/β抗體 0.2ml
48991 MC3 Receptor  黑素皮質(zhì)素受體3抗體 0.2ml
48992 PDGF AB+BB  血小板源性生長(zhǎng)因子AB+BB抗體 0.2ml
48993 CPLA2  胞漿型磷脂酶A2抗體 0.2ml
48994 TIRAP  白細(xì)胞介素1受體銜接蛋白抗體 0.2ml
48995 phospho-TIRAP(Tyr86)  磷酸化白細(xì)胞介素1受體銜接蛋白抗體 0.1ml
48996 TNIP2/ABIN2/TNFAIP3 interacting protein 2  腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白3相互作用蛋白2抗體 0.2ml
48997 Azurocidin/Cationic antimicrobial protein 37  肝素結(jié)合蛋白/陽(yáng)離子抗菌蛋白37/天青殺素抗體 0.2ml
48998 AGPB/Alpha 1 acid glycoprotein 2  α1酸性糖蛋白2抗體（類粘蛋白2） 0.2ml
48999 RHBDD3  垂體瘤細(xì)胞凋亡抗體 0.2ml
49000 RIP1  受體相互作用蛋白激酶1抗體 0.2ml
49001 RNF122  環(huán)指蛋白122抗體 0.2ml
49002 RNF36  環(huán)指蛋白36抗體 0.2ml
49003 RNF7/CKBBP1  環(huán)指蛋白7抗體 0.2ml
49004 RPS3  核糖體蛋白S3抗體 0.2ml
49005 RRAGC  RAS相關(guān)GTP結(jié)合蛋白C抗體 0.2ml
49006 SAA4/Serum amyloid A 4 protein  血清淀粉樣蛋白4抗體 0.2ml
49007 RRAS  原癌基因R-Ras抗體 0.2ml
49008 SEC14 like protein 2/Squalene transfer protein  α*相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
49009 SEN1/  細(xì)胞衰老相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
49010 SLC25A6  線粒體載體腺嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6抗體 0.2ml
49011 SODD  Bcl2結(jié)合抗凋亡蛋白4抗體 0.2ml
49012 TXNDC5  硫氧還蛋白5抗體 0.2ml
49013 ZFAND5  AN1型鋅指蛋白5抗體 0.2ml
49014 ZHX2/Alpha fetoprotein regulator 1  甲胎蛋白調(diào)節(jié)蛋白1抗體 0.2ml
49015 BCL2L15  BCL2樣15促凋亡蛋白抗體 0.2ml
49016 BTF/BCLAF1  Bcl2相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體 0.2ml
49017 Bcl rambo/Bcl 2 like 13 protein  Bcl2樣凋亡蛋白13抗體 0.2ml
49018 Bcl G/BCL2 like 14  Bcl2樣凋亡蛋白14抗體 人硫氧化還原蛋白(Trx)ELISA試劑盒 0.2ml
49019 BOK/Bcl 2 like protein 9  Bcl2樣凋亡蛋白9抗體 0.2ml
49020 Bmf/Bcl2 modifying factor  Bcl2蛋白修飾因子抗體 0.2ml
49021 A4GALT/CD77  α1,4-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶1 0.2ml
49022 Blood Group Antigen Precursor  血型抗原前體蛋白抗體 0.2ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人硫氧化還原蛋白(Trx)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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