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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-12 19:23:43瀏覽次數(shù):131次
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人核仁形成區(qū)嗜銀蛋白(Ag-NORs)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人核仁形成區(qū)嗜銀蛋白(Ag-NORs)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人核仁形成區(qū)嗜銀蛋白(Ag-NORs)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
48912 Adenylate Kinase 1/AK1 腺苷酸激酶-1抗體 0.2ml
48913 CTNNBIP1 β鏈接素相互作用蛋白1抗體 0.1ml
48914 phospho-CTNNBIP1 (Ser36) 磷酸化β鏈接素相互作用蛋白1抗體 0.1ml
48915 phospho-CTNNBIP1 (Thr43/Ser50) 磷酸化β鏈接素相互作用蛋白1抗體 0.1ml
48916 AKR1D1 醛固酮還原酶家族1成員D1抗體 0.2ml
48917 ALDH1B1 乙醛脫氫酶5抗體 0.1ml
48918 ALDOB 醛縮酶2抗體 0.1ml
48919 Aldolase A 醛縮酶A抗體 0.1ml
48920 Aldolase C 醛縮酶C抗體 0.2ml
48921 ALF/GTF2A1LF 通用轉錄因子IIA樣因子抗體 0.1ml
48922 ALK/CD246 間變型淋巴瘤激酶抗體 0.2ml
48923 CDC27/ANAPC3 后期促進復合蛋白3抗體 0.1ml
48924 CO4A2 膠原蛋白4a2亞基抗體 0.2ml
48925 REM/GTP binding protein REM1 GTP結合蛋白REM1抗體 0.2ml
48926 Laminin 1+2 層粘連蛋白1+2抗體 0.1ml
48927 Laminin Beta 2/Laminin S 層粘連蛋白β2抗體 0.2ml
48928 Plakophilin 1 橋粒斑菲素蛋白1抗體 0.2ml
48929 phospho-ALK/CD246(Tyr1604) 磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體 0.1ml
48930 phospho-ALK/CD246(Tyr1278/1282/1283) 磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體 0.1ml
48931 phospho-ALK/CD246(Tyr1586) 磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體 0.1ml
48932 SMOC2 分泌模塊化鈣結合蛋白2抗體(平滑肌相關蛋白2) 0.2ml
48933 Sprouty 2 快速發(fā)育生長因子同源蛋白2抗體 0.1ml
48934 THSD1 血小板跨膜反應蛋白1抗體 0.2ml
48935 VG5Q/AGGF1 血管生長因子VG5Q抗體 0.2ml
48936 stabilin1/STAB 1 淋巴管內(nèi)皮細胞和血管內(nèi)皮細胞受體1抗體 0.2ml
48937 UTS2D 尾加壓素2相關肽抗體 0.2ml
48938 Hyp/hydroxyproline 羥*抗體 0.2ml
48939 BAI1 腦特異性血管生成抑制蛋白1抗體 0.2ml
48940 BAI2/Brain Specific Angiogenesis Inhibitor 2 腦特異性血管生成抑制蛋白2抗體 0.2ml
48941 KLHL20 Kelch樣蛋白20抗體 0.2ml
48942 LECT1 白細胞衍生化學吸引素抗體 0.2ml
48943 Natriuretic Peptide Receptor A 利鈉肽受體A抗體 0.2ml
48944 Ribonuclease Inhibitor 核糖核酸酶抑制因子1抗體 0.2ml
48945 SEMA4A 跨膜蛋白SEMA4A抗體 0.2ml
48946 SPON1/F spondin 細胞外基質(zhì)底物反應蛋白1抗體 0.2ml
48947 phospho-CDC27/ANAPC3(Ser427) 磷酸化后期促進復合蛋白3抗體 0.1ml
48948 UCN2/Urotensin II 尾加壓素2抗體 0.1ml
48949 TXA2R 血栓素A2受體抗體 0.2ml
48950 phospho-CDC27/ANAPC3(Thr244) 磷酸化后期促進復合蛋白3抗體 0.1ml
48951 phospho-Caveolin-2(Tyr19) 磷酸化細胞質(zhì)膜微囊蛋白-2抗體 0.1ml
48952 Thrombospondin 2 血小板反應蛋白2/*敏感蛋白2抗體 0.2ml
48953 TNMD/tenomodulin 腱調(diào)蛋白抗體(軟骨調(diào)節(jié)素樣1蛋白) 0.2ml
48954 BTG1 B細胞遷移基因1抗體 0.2ml
48955 FAIM3 FAS凋亡抑制分子3抗體 0.2ml
48956 CTRP1/G protein coupled receptor interacting protein 1 G蛋白偶聯(lián)受體相互作用蛋白1抗體(補體Clq TNF相關蛋白1) 0.2ml
48957 Collagen VIII alpha 1 8型膠原抗體(內(nèi)皮膠原蛋白) 0.2ml
48958 Creatine Kinase MM 肌酸激酶M型抗體 0.2ml
48959 ALR 肝再生增強因子抗體 0.1ml
48960 Insulin Receptor R 胰島素受體相關受體抗體 0.2ml
48961 Islet 1 胰島素基因增強結合蛋白1抗體 0.2ml
48962 Lipin 1 磷脂酸磷酸酯酶LPIN1抗體 0.2ml
48963 AP-TNAP/ALPL 堿性磷酸酶抗體人核仁形成區(qū)嗜銀蛋白(Ag-NORs)ELISA試劑盒 0.1ml
48964 PGC1 beta 過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1β抗體 0.2ml
48965 PGC1 alpha + beta 過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1α+β抗體 0.2ml
48966 SERPINA12/Vaspin 內(nèi)臟脂肪組織源性*蛋白酶抑制蛋白抗體 0.2ml
48967 SIRT4/SIR 2 like protein 4 沉默調(diào)節(jié)相關蛋白4抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人核仁形成區(qū)嗜銀蛋白(Ag-NORs)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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